一种用于人乳头瘤病毒核酸分型检测的引物探针组合物及应用制造技术

本申请涉及一种用于人乳头瘤病毒核酸分型检测的引物探针组合物及应用。所述引物探针组合物包括一条通用标签引物和28组分别用于对28种人乳头瘤病毒核酸分型进行检测的引物探针组；其中每组所述的引物探针组中均包括一条上游引物、一条下游引物和一条探针，且所述上游引物和下游引物的5

【技术实现步骤摘要】
一种用于人乳头瘤病毒核酸分型检测的引物探针组合物及应用


[0001]本申请涉及分子生物学
，尤其是涉及一种用于人乳头瘤病毒核酸分型检测的引物探针组合物及应用。

技术介绍

[0002]人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus，HPV)属于乳头瘤病毒科，是一种小分子的、无被膜包被的环状双链DNA病毒，基因组长约8000碱基对(bp)，分为3个功能区，即早期转录区(E区)、晚期转录区(L区)和非转录区(长控制区，LCR)。HPV通过直接或间接接触污染物品或性传播感染人类。该病毒不但具有宿主特异性，而且具有组织特异性，只能感染人的皮肤和粘膜上皮细胞，引起人类皮肤的多种乳头状瘤或疣及生殖道上皮增生性损伤。
[0003]对于感染生殖道和肛门的HPV，根据各基因型别致病力大小或致癌危险性大小可分为低危型和高危型两大类。而持续性的高危型HPV感染则是导致宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的主要原因。低危型HPV一般与尖锐湿疣或低度鳞状上皮内病变相关。
[0004]目前已报道发现的HPV亚型已超过百数之多，如果将这些亚型全部实现分型检测，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于人乳头瘤病毒核酸分型检测的引物探针组合物，其特征在于，所述引物探针组合物包括一条通用标签引物和28组分别用于对28种人乳头瘤病毒亚型进行核酸分型检测的引物探针组；其中每组所述的引物探针组中均包括一条上游引物、一条下游引物和一条探针，且所述上游引物和下游引物的5
’
端均连接有所述通用标签引物的碱基序列，所述通用标签引物的碱基序列如SEQ ID NO:59所示；优选地，所述通用标签引物的5
’
端修饰有生物素。2. 根据权利要求1所述的引物探针组合物，其特征在于，所述28组分别用于对28种人乳头瘤病毒亚型进行核酸分型检测的引物探针组中的28条上游引物的碱基序列分别如SEQ ID NO:1~28所示，28条下游引物的碱基序列分别如SEQ ID NO:30~57所示，28条探针的碱基序列分别如SEQ ID NO:60~87所示；优选地，所述28条探针的5
’
端均修饰有氨基。3. 根据权利要求1或2所述的引物探针组合物，其特征在于，所述引物探针组合物中还包括一组针对内参基因的引物探针组，其包括一条针对内参基因的上游引物、一条针对内参基因的下游引物和一条针内参基因的探针；优选地，所述针对内参基因的上游引物的碱基序列如SEQ ID NO: 29所示，下游引物的碱基序列如SEQ ID NO:58所示，探针的碱基序列如SEQ ID NO:88所示；进一步优选地，所述针对内参基因的探针的5
’
端修饰有氨基。4.根据权利要求1或2所述的引物探针组合物，其特征在于，所述的28种人乳头瘤病毒亚型分别为HPV6、HPV11、HPV16、HPV18、HPV26、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV40、HPV42、HPV43、HPV44、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV54、HPV56、HPV58、HPV59、HPV61、HPV66、HPV68、HPV73、HPV81、HPV82和HPV83。5.一种用于人乳头瘤病毒核酸分型的全自动检测试剂盒，其包括如权利要求1
‑
4中任意一项所述的引物探针组合物。6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括核酸提取试剂、扩增试剂和杂交显色试剂；优选地，所述试剂盒中还包括阳性质控品和阴性质控品。7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述核酸提取试剂包括裂解液、磁珠、结合液、漂洗液和洗脱液；优选地，所述裂解液中包括胍盐、表面活性剂和第一缓冲盐；所述磁珠为硅羟基磁珠；所述结合液为异丙醇；所述漂洗液中包括第二缓冲盐和有机醇；所述洗脱液为水；进一步优选地，所述胍盐为盐酸胍，所述盐酸胍在所述裂解液中的浓度为2~8M；所述表面活性剂为吐温20，所述吐温20在所述裂解液中的浓度为1~20wt%；所述第一缓冲盐为MOPS，...

【专利技术属性】
技术研发人员：柳春霞，连朋敬，王瑾瑾，段会梅，曾滨，
申请(专利权)人：北京博晖创新生物技术集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：