一种斑点叉尾鮰疱疹病毒的快速检测方法及试剂盒技术

本发明专利技术属于生物检测领域，具体涉及一种斑点叉尾鮰疱疹病毒的快速检测方法及试剂盒。本发明专利技术的斑点叉尾鮰疱疹病毒的快速检测方法，包括以下步骤：（1）从待测样本中提取基因组DNA；（2）以基因组DNA为模板，利用特异引物组，在等温扩增反应体系中，进行等温扩增反应；（3）通过扩增结果判断待测样品中是否存在斑点叉尾鮰病毒。本发明专利技术的方法方便、快速，试剂盒操作简便、耗时短，检测效率高，适于斑点叉尾鮰病毒的快速检测。快速检测。

【技术实现步骤摘要】
一种斑点叉尾鮰疱疹病毒的快速检测方法及试剂盒


[0001]本专利技术属于生物检测领域，具体涉及一种斑点叉尾鮰疱疹病毒的快速检测方法及试剂盒。

技术介绍

[0002]斑点叉尾鮰病毒(Channel Catfish Virus，CCV)引起的斑点叉尾鮰病毒病最早于1968年发生于美国。该病毒是一种有囊膜的双链DNA病毒，又称鮰疱疹病毒I型(Ictalurid herpesvirus 1)，能够对斑点叉尾鮰鱼苗和鱼种造成致死性感染。我国1984年从美国引进斑点叉尾鮰养殖，养殖面积和产量逐渐扩大，目前已成为世界最主要的斑点叉尾鮰养殖国家之一。然而，与之相对应的是，由斑点叉尾鮰病毒引起的斑点叉尾鮰疱疹病毒病也日趋严重，给渔业造成严重的经济损失。
[0003]目前，进行斑点叉尾鮰病毒确诊的方法主要是采用细胞培养，结合中和试验或PCR鉴定。尽管上述方法也较为准确可靠，但相对来说操作比较复杂，耗时长，因而不适于推广使用。
[0004]因此，亟需开发一种适于推广使用的斑点叉尾鮰疱疹病毒的快速检测方法。

技术实现思路
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种斑点叉尾鮰疱疹病毒的快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）从待测样本中提取基因组DNA；（2）以基因组DNA为模板，利用特异引物组，在等温扩增反应体系中，进行等温扩增反应；（3）通过扩增结果判断待测样品中是否存在斑点叉尾鮰病毒；所述的特异引物组为：F3: 5
’‑
CGGAGTGGGTGGAGACCA
‑3’
，SEQ ID NO：1；FIP：5
’‑
CCCTCCCACCCCTCACGAAGGAGAAGACCAGGTTGATGGC
‑3’
，SEQ ID NO：2；BIP：5
’‑
CATCAAGATCATGACGGCGGCC AATGCCCTCGGGATCTTCTC
‑3’
，SEQ ID NO：3；B3：5
’‑
CGCCAAGTCTATCGTGACAC
‑3’
，SEQ ID NO：4。2.根据权利要求1所述的一种斑点叉尾鮰疱疹病毒的快速检测方法，其特征在于，所述的等温扩增反应体系含有下列组分中的一种或者几种：F3 引物0.2 μmol/L，B3引物0.2 μmol/L，FIP引物1.6 μmol/L，BIP引物1.6 μmol/L，反应液12.5 μl，Bst DNA聚合酶8 U。3.根据权利要求1所述的一种斑点叉尾鮰疱疹病毒的快速检测方法，其特征在于，所述的等温扩增反应的步骤包括：
①
65℃孵育60min；
②
80℃终止反应5min。4.根据权利要求1所述的一种斑点叉尾鮰疱疹病毒的快速检测方法，其特征在于，所述的判断待测样品中是否存在斑点叉尾鮰病毒包括：将反应管放置在65
o
C水浴锅中进行反应，反应结束后，82℃终止反应5min；随后加入Syb...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔大祥，李雪玲，仲禺俊，彭家伟，王茜茜，
申请(专利权)人：上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司，
类型：发明
国别省市：