一种青稞抗坚黑穗病的鉴定方法技术

本发明专利技术公开了一种青稞抗坚黑穗病的鉴定方法，包括以下步骤：步骤1：冬孢子采集，采集青稞抽穗至灌浆乳熟期的病穗，干燥后保存；步骤2：配制冬孢子悬浮液，将步骤1中的冬孢子打碎，过筛得到冬孢子粉，配制为悬浮液，过滤得到所需悬浮液；步骤3：接菌，通过真空渗透法，用步骤2中的悬浮液对种子进行处理；步骤4：将步骤3中的种子阴干播种；步骤5：根据抗病性分级标准进行抗病水平的鉴定；本发明专利技术方法接菌方法能够将青稞坚黑粉菌精确接种到青稞种子上，诱发青稞坚黑穗病，可用于青稞品种或资源材料的抗坚黑穗病鉴定；方法简单易行、准确率高、操作性强。

【技术实现步骤摘要】
一种青稞抗坚黑穗病的鉴定方法
本专利技术涉及青稞抗病性鉴定
，具体涉及一种青稞抗坚黑穗病的鉴定方法。
技术介绍
坚黑穗病是西藏青稞常发生的种传真菌病害，西藏青稞种植区均有不同程度的发生。一般地块发病率为4％～5％，造成的平均产量损失为1％～5％。一般的防治方法包括建立无病种田，生产无病种子，发掘抗病资源，培育抗病品种，合理轮作倒茬，种子包衣处理，及时拔除病株，集中深埋或焚烧等。培育抗坚黑穗病品种是控制该病最经济有效的方法，抗源的鉴定是抗病育种的基础。但是目前国内在青稞品种对黑穗病的抗性鉴定研究较少。主要是采用田间种植鉴定法(在青稞黑穗病建立黑穗病鉴定圃，青稞材料鉴定材料行播，通过自然诱发，青稞抽穗期调查发病率，采用分级分类法进行抗性分级和定级)，根据青稞感病率，采用分级分类法进行抗性分级和定级，目前采用的方法受环境互作影响较大，种子带菌低，甚至不带菌，田间鉴定的结果与抗性差异大，不能准确反映品种的抗病性等。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术存在的缺点提供一种鉴定结果与抗性接近，能准确反映品种的抗病性的青稞抗坚黑穗病的鉴定方法。本专利技术来源于“青稞功能基因挖掘与新种质创制”课题中的子课题“青稞种质资源抗病性鉴定与筛选”。本专利技术采用的技术方案是：一种青稞抗坚黑穗病的鉴定方法，包括以下步骤：步骤1：冬孢子采集，采集青稞抽穗至灌浆乳熟期的病穗，干燥后保存；步骤2：配制冬孢子悬浮液，将步骤1中的冬孢子打碎，过筛得到冬孢子粉，配制为悬浮液，过滤得到所需悬浮液；步骤3：接菌，通过真空渗透法，用步骤2中的悬浮液处理对种子进行处理；步骤4：将步骤3中的种子阴干播种；步骤5：根据抗病性分级标准进行抗病水平的鉴定。进一步的，所述步骤1中采集的病穗，放置于玻璃纸袋中，在阴凉通风处干燥，干燥后在4℃～5℃条件下保存。进一步的，所述步骤2中的悬浮液中分别添加表面活性剂和种衣剂成膜剂。进一步的，所述步骤2中冬孢子病穗通过搅拌器打碎，采用120目尼龙网过筛。进一步的，所述步骤3中种子的处理方法如下：将种子包在纱布中，置于真空干燥器底部；加入步骤2中的悬浮液，悬浮液液面高于种子；纱布袋上设置重物防止其漂浮；抽真空10min，取出种子，用吸水纸吸去种子沙袋上的接种悬浮液，置于通风良好的地方阴干。进一步的，所述步骤5中的分级标准如下：病株率0％，免疫；病株率在0％～15％(不包括0％)，高抗；病株率在15％～35％(不包括15％)，中抗；病株率35％～55％(不包括35％)，中间过渡；病株率为55％～75％(不包括55％)，中感；病株率为75％～100％(不包括75％)，高感。进一步的，所述表面活性剂为吐温20，种衣剂成膜剂为661。进一步的，所述步骤4中的播种方法如下：将冬孢子悬浮液接种处理的种子播种于坚黑穗病试验鉴定病圃内，每个品种播种两行，行长为2m，每行播种约30～45粒种子，播种深度为10cm；品种之间间隔1行。进一步的，所述步骤2中冬孢子悬浮液中冬孢子的质量浓度为0.001wt％。本专利技术的有益效果是：(1)本专利技术能够将青稞坚黑粉菌精确、均匀接种到青稞种子上，诱发青稞坚黑穗病；(2)本专利技术方法鉴定结果与抗性接近，能准确反映品种的抗病性，用于青稞资源抗坚黑穗病的鉴定；(3)本专利技术鉴定方法简单易行、准确率高、操作性强。附图说明图1为本专利技术方法流程示意图。具体实施例下面结合具体实施例和附图对本专利技术做进一步说明。一种青稞抗坚黑穗病的鉴定方法，包括以下步骤：步骤1：冬孢子采集，采集青稞抽穗至灌浆乳熟期的病穗，干燥后保存；在青稞抽穗至灌浆乳熟期，病穗刚抽出叶鞘及时采集病穗，放置于玻璃纸袋中，在阴凉通风之处充分干燥后，采集的病穗干燥后在4℃～5℃条件下保存，一般可以保存3～5年。步骤2：配制冬孢子悬浮液，将步骤1中的冬孢子打碎，过筛得到冬孢子粉，配制为悬浮液，过滤得到所需悬浮液；取青稞坚黑穗病病穗，搅拌器打3～5秒，打碎病穗组织，细筛去除杂质，120目尼龙网过滤，得到冬孢子粉。用自来水配制成浓度为1g冬孢子粉1L水的冬孢子悬浮液。加入5滴吐温-20使冬孢子粉更均匀分散，再加入0.02mL种衣剂成膜剂661，增加悬浮液粘附力，剧烈摇均匀。将配制好的冬孢子悬浮液用双层显微镜擦镜纸过滤得到冬孢子悬浮液，悬浮液接种前配置，须现用现配。步骤3：接菌，通过真空渗透法，用步骤2中的悬浮液对种子进行处理；采用真空渗透法，播种前的2～3d内处理种子，将60～90粒种子包在5cm×4cm的小纱布中，同时放入用铅笔编号品种名称标签，置于真空干燥器底部，加入配置好的冬孢子悬浮液，液面高于种子，上面放置重物防止种子袋漂浮。抽真空10min，然后取出种子用吸水纸吸去种子沙袋上的接种悬浮液，置于通风良好的地方阴干种子，晾干的种子分装入纸袋，并在纸袋上记录品种名称，尽早播种。步骤4：将步骤3中的种子阴干播种；将冬孢子悬浮液接种处理的种子，播种于坚黑穗病试验鉴定病圃内，每个品种播种2行，行长2m，每行播种约30～45粒种子，播种深度10cm，拉萨播种时间4月20日左右，品种之间间隔1行。抗病性分级标准；表1.抗坚黑穗病分级标准步骤5：根据抗病性分级标准进行抗病水平的鉴定。根据连续2年或3年生长季的抗病性鉴定试验中最高株比例确定待鉴定品种的抗病水平。采用本专利技术方法对常见的青稞品种和资源进行鉴定，结果如下表所示。表格中序号1-12为青稞品种；序号为13-30为鉴别寄主；序号31-86为品系。通过上述结果可以看出，本专利技术方法能够准确反映品种的抗病性。采用真空渗透法接菌后发病品种占鉴定品种80％以上，而对照未接菌发病率为0％；能将青稞坚黑粉菌精确接种到青稞种子上，诱发青稞坚黑穗病；按照抗坚黑穗病分级标准，进行青稞品种(系)穗期抗性鉴定，能客观准确反映品种(系)抗性水平，能用于青稞资源抗坚黑穗病鉴定，可用于抗源筛选；方法简单易行、准确率高、操作性强。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种青稞抗坚黑穗病的鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤1：冬孢子采集，采集青稞抽穗至灌浆乳熟期的病穗，干燥后保存；/n步骤2：配制冬孢子悬浮液，将步骤1中的冬孢子打碎，过筛得到冬孢子粉，配制为悬浮液，过滤得到所需悬浮液；/n步骤3：接菌，通过真空渗透法，用步骤2中的悬浮液对种子进行处理；/n步骤4：将步骤3中的种子阴干播种；/n步骤5：根据抗病性分级标准进行抗病水平的鉴定。/n

【技术特征摘要】
1.一种青稞抗坚黑穗病的鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：冬孢子采集，采集青稞抽穗至灌浆乳熟期的病穗，干燥后保存；
步骤2：配制冬孢子悬浮液，将步骤1中的冬孢子打碎，过筛得到冬孢子粉，配制为悬浮液，过滤得到所需悬浮液；
步骤3：接菌，通过真空渗透法，用步骤2中的悬浮液对种子进行处理；
步骤4：将步骤3中的种子阴干播种；
步骤5：根据抗病性分级标准进行抗病水平的鉴定。


2.根据权利要求1所述的一种青稞抗坚黑穗病的鉴定方法，其特征在于，所述步骤1中采集的病穗，放置于玻璃纸袋中，在阴凉通风处干燥，干燥后在4℃～5℃条件下保存。


3.根据权利要求1所述的一种青稞抗坚黑穗病的鉴定方法，其特征在于，所述步骤2中的悬浮液中分别添加表面活性剂和种衣剂成膜剂。


4.根据权利要求1所述的一种青稞抗坚黑穗病的鉴定方法，其特征在于，所述步骤2中冬孢子病穗通过搅拌器打碎，采用120目尼龙网过筛。


5.根据权利要求1所述的一种青稞抗坚黑穗病的鉴定方法，其特征在于，所述步骤3中种子的处理方法如下：
将种子包在纱布中，置于真空干燥...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚小波，刘何春，蔺瑞明，王文峰，次仁央拉，雷雪萍，扎罗，李杨，
申请(专利权)人：西藏自治区农牧科学院农业研究所，
类型：发明
国别省市：西藏;54