脐带间充质干细胞对高氧暴露肺和脑损伤保护的动物模型制造技术

本发明专利技术属于科学、医学或数学用的模型技术领域，公开了一种脐带间充质干细胞对高氧暴露肺和脑损伤保护的动物模型，在大鼠模型中使用持续高氧气诱导肺和脑损伤，同时构建慢病毒载体介导绿色荧光蛋白标记人脐带血间充质干细胞，采用气管及鼻腔与静脉移植，进行UC‑MSc定植与生长跟踪与凋亡检测，并行组织学评价、氧化应激与炎症因子检测及功能评估。本发明专利技术利用携带GFP的慢病毒载体转染UC‑MSc，采用气管、鼻腔及尾静脉注射UC‑MSc的3种移植方法比较。进行气管、鼻腔及尾静脉注射UC‑MSc的移植，跟踪其在肺和脑的定植情况，探索UC‑MSc对SCI大鼠高氧肺和脑损伤的同时治疗作用。

【技术实现步骤摘要】
脐带间充质干细胞对高氧暴露肺和脑损伤保护的动物模型
本专利技术属于科学、医学或数学用的模型
，尤其涉及一种脐带间充质干细胞对高氧暴露肺和脑损伤保护的动物模型。
技术介绍
目前，业内常用的现有技术是这样的：较高浓度和较长时间的持续氧疗可导致急性肺损伤或支气管肺发育不良(bronchopulmonarydysplasia,BPD)，BPD在全球发病率逐年增高，早产儿中BPD发生率为6％-57％，死亡率达20.8％。早产儿因多接受复苏和呼吸管理，且其抗氧化防御机制不成熟，特别容易受到氧疗毒性的影响，除了对肺的影响，高氧也导致发育中大脑的细胞死亡，导致运动和认知缺陷，对社会和家庭造成了严重的经济和心理负担。临床研究显示BPD是早产儿神经发育滞后及脑瘫的独立危险因素，尽管类固醇可以减少BPD，但可能与长期不良神经系统不良结果相关，或与新生儿死亡率增加有关，迄今无具体或有效的治疗方法。因而，如何防治高氧肺和脑损伤导致的呼吸道和神经功能障碍是新生儿重症监护领域研究的难点。干细胞治疗有望成为针对复杂且多因素的难治性和破坏性新生儿疾病治疗的新突破。早产儿中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种慢病毒介导GFP标记UCMSc细胞系的建立方法，其特征在于，所述慢病毒介导GFP标记UCMSc细胞系的建立方法包括：/n步骤一，利用慢病毒载体，构建GFP过表达病毒载体，得到滴度为1×10

【技术特征摘要】
1.一种慢病毒介导GFP标记UCMSc细胞系的建立方法，其特征在于，所述慢病毒介导GFP标记UCMSc细胞系的建立方法包括：
步骤一，利用慢病毒载体，构建GFP过表达病毒载体，得到滴度为1×108TU/mL的病毒颗粒；
步骤二，从脐带分离培养UCMSc，置于37°С、5％CO2培养箱培养，流式细胞术鉴定。


2.一种由权利要求1所述慢病毒介导GFP标记UCMSc细胞系的建立方法建立的慢病毒介导GFP标记UCMSc细胞系。


3.一种由权利要求2所述慢病毒介导GFP标记UCMSc细胞系构建的高氧大鼠模型。


4.一种如权利要求3所述高氧大鼠模型的构建方法，其特征在于，所述高氧大鼠模型的构建方法包括：新生足月SD大鼠96只，生后6h之内随机分为高氧组和空气组各48只；将高氧组新生大鼠生后30min内置于自制氧箱中，持续输入氧气，维持氧箱氧浓度在95％以上，持续7天至结束处死取材；用氧浓度测定仪检测氧浓度，钠石灰吸收氧箱内CO2，保持CO2浓度小于5％，用变色硅胶吸除水...

【专利技术属性】
技术研发人员：林益平，丁明星，姚静婵，
申请(专利权)人：金华职业技术学院，
类型：发明
国别省市：浙江;33