稳定表达hFcRn细胞株的制备方法及其在药物筛选中的应用技术

本发明专利技术公开了一种FcRn稳定表达的细胞系及其在药物筛选中的应用，本发明专利技术提供了该细胞株的构建方法及其应用实例，包括(1)将FcRn基因插入真核表达载体；（2）将步骤1得到的载体导入到宿主细胞中，经过加压筛选得到稳定表达FcRn的细胞系；3）步骤2得到的细胞系用于药物筛选。本发明专利技术的独特之处在于1）实现了FcRn和β2M蛋白的同比例共表达，便于组装有功能活性的FcRn异源二聚体；2）选用有极性特征的细胞比如MDCK细胞作为FcRn表达的宿主细胞，便于做FcRn介导的抗体或其它药物分子内吞、外泌及跨膜转运的能力测试；3）提供了应用相应的细胞株检测、筛选以FcRn为基础的药物内吞、外泌及跨膜转运的基本方法和技术途径。

【技术实现步骤摘要】
稳定表达hFcRn细胞株的制备方法及其在药物筛选中的应用
本专利技术涉及一种稳定表达hFcRn细胞株的制备方法及其在药物筛选中的应用
技术介绍
hFcRn是由大小两个亚基组成的异源二聚体，分别为分子量45～53kD的α链和分子量14kD的β2微球蛋白(β2microglobinorβ2M)。β2微球蛋白对于hFcRn的生物学功能至关重要。晶体结构显示hFcRn与抗体的结合区域是CH2～CH3,在生理PH＝7.4时，抗体与FcRn解离结合，在酸性条件PH＝6.0时hFcRn与抗体结合。FcRn在体内分布广泛，能够介导抗体或抗体类似物的内吞、外泌和跨膜转运，所以与FcRn的结合决定了IgG抗体在体内的半衰期。ShreeramAkilesh等使用FcRn缺陷型小鼠的研究结果表明，致病性IgG在FcRn缺陷型小鼠血液中被快速清除，因此降低了致病性IgG在FcRn缺陷型小鼠中的致病性，提示通过抑制FcRn可以用于治疗由自身抗体引起的自身免疫疾病(ShreeramAkilesh等，2004，JClinInvest.113(9):1328-33)。同时，为了本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种稳定表达具有功能活性FcRn的细胞系。/n

【技术特征摘要】
1.一种稳定表达具有功能活性FcRn的细胞系。


2.权利要求1中的细胞系是通过基因工程手段将外源基因片段插入细胞基因组中获得。


3.权利要求1中的细胞系同时表达人源FcRn和人源β2M蛋白。


4.权利要求1中的细胞系是MDCK或其它有极性特征的哺乳动物来源上皮细胞。

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【专利技术属性】
技术研发人员：韩照中，潘红芽，
申请(专利权)人：领诺上海医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31