【技术实现步骤摘要】
一种替代中和效力测定的ELISA方法及其应用技术方案本专利技术属于生物医学
，具体涉及一种替代中和效力测定的ELISA方法及其应用。
技术介绍
传染性支气管炎(IB)是由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的传染病。IBV感染鸡引起严重的呼吸道和肾脏疾病，导致重大的经济损失。虽然疫苗现在被广泛使用，但是在鸡群中仍然可以观察到IB的流行。中和抗体是当病原微生物侵入机体时会产生相应的抗体。病原微生物入侵细胞时需要依赖病原体自身表达的特定分子与细胞上的受体结合，才能感染细胞，并进一步扩增。中和抗体是B淋巴细胞产生的某些抗体，能够与病原微生物表面的抗原结合，从而阻止该病原微生物黏附靶细胞受体，防止侵入细胞。中和抗体是由适应性免疫应答细胞分泌的一种可溶性蛋白。病毒侵入机体之后，免疫细胞将中和抗体分泌到血液里，后者与血液里的病毒颗粒结合，阻止病毒感染细胞，破坏病毒颗粒，这样就把病毒“中和”掉了。目前一般采用细胞培养方法检测血清中的中和抗体滴度，从而评估疫苗在免疫鸡群中的效用，然而，这个过程耗时费力，难以在基层实现。有报道称免疫荧光和...
【技术保护点】
1.一种IBV特异性中和表位抗原多肽，其特征在于，所述多肽为环状多肽，所述多肽的氨基酸序列为CSCPYVSYGRFCIQPDGSIKQC。/n
【技术特征摘要】
1.一种IBV特异性中和表位抗原多肽，其特征在于，所述多肽为环状多肽，所述多肽的氨基酸序列为CSCPYVSYGRFCIQPDGSIKQC。
2.一种IBV特异性抗体，其特征在于，所述IBV特异性抗体特异性的与权利要求1所述的IBV特异性中和表位抗原多肽结合。
3.一种IBV特异性抗体的制备方法，其特征在于，将权利要求1所述的IBV特异性中和表位抗原多肽与佐剂混合，免疫小鼠、鸡或其他实验动物，经2-3次免疫后即可产生抗IBV特异性抗体。
4.一种替代中和效力测定的ELISA方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）将权利要求1所述的IBV特异性中和表位抗原多肽包被酶标板，包被后用兔血清封闭；
2）洗涤多次后，加入鸡血清共同孵育；
3）再次洗涤多次，再与山羊抗鸡IgG酶标抗体共同孵育，经多次洗涤后，用TMB底物显色；
4）最...
【专利技术属性】
技术研发人员：秦爱建，张昱晗，武奇，钱琨，邵红霞，叶建强，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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