检测血清鞘氨醇-1-磷酸的试剂在制备用于区分肝硬化或肝细胞癌的试剂盒中的应用制造技术

本发明专利技术实施例涉及一种检测血清鞘氨醇‑1‑磷酸的试剂在制备用于区分肝硬化或肝细胞癌的试剂盒中的应用。血清Sph(d18:1)‑1‑P的上调表现出对HCC良好的诊断性能。特别是Sph(d18:1)‑1‑P也可以作为用于诊断AFP阴性HCC的生物标志物。这些发现有助于非侵入性诊断包括AFP阴性HCC在内的HCC。

【技术实现步骤摘要】
检测血清鞘氨醇-1-磷酸的试剂在制备用于区分肝硬化或肝细胞癌的试剂盒中的应用
本专利技术涉及生物检测领域，具体涉及一种检测血清鞘氨醇-1-磷酸(Sph(d18:1)-1-P，S1P)的试剂在制备用于区分肝硬化或肝细胞癌的试剂盒中的应用。
技术介绍
肝细胞癌(HCC)是世界上与癌症相关的死亡中第三大死亡原因，70％～90％的HCC可能从肝硬化患者而来。早期区分出HCC与肝硬化并进一步提供及时的治疗可以显著改善HCC的预后。然而，在HCC的早期阶段没有典型的症状，并且缺少HCC的特异性诊断生物标志物，因此许多患者在被诊断时已处于晚期。这一事实使许多患者错过了进行根治性治疗的最佳机会，例如进行肝切除或肝移植。迄今为止，在临床实践中，通常使用成像方法和α-甲胎蛋白(AFP)来筛查和诊断HCC。但是，一方面，超声不能提供足够的灵敏度和客观性，可能导致诊断的不准确；而计算机断层扫描(CT)和磁共振成像(MRI)因为会有辐射曝露或成本高昂，并不建议作为HCC的一般筛查工具；另一方面，AFP的阳性率仅限于二分之一到三分之二，即，大约40％的HCC患者无法检测到AFP。此外，AFP可能会受到许多非HCC疾病(例如肝炎、肝硬化、胆管癌等)的影响。总之，目前用血清生物标志物诊断HCC(包括AFP阴性HCC)的效果仍不理想。因此，仍然迫切需要在筛查HCC、特别是AFP阴性HCC的过程中，发现新的生物标志物。鞘脂代谢高度互联，其中：神经酰胺占据鞘脂代谢网络的核心，神经酰胺可以被糖基化、磷酸化或去酰基化，以产生各种各样的代谢产物；其中：鞘氨醇(Sph)可以在神经酰胺酶的作用下生成，并被鞘氨醇激酶1(SphK1)进一步磷酸化为鞘氨醇-1-磷酸(如图1所示)。现有研究中检测到的鞘脂的种类和数量并不全面，例如，未包括某些碳链长度的神经酰胺或S1P，这可能会导致错过最佳诊断生物标志物。同时，未给出这些单个标志物的敏感度和特异度，也未评估它们对AFP阴性HCC的诊断作用。此外，鉴于病因不同和种族差异，必须进一步筛选能够以高灵敏度和特异性区分中国人群中各种原因所致的HCC(包括AFP阴性HCC)与肝硬化的鞘脂代谢产物。血清鞘脂筛查或诊断HCC患者的能力仍然有待进一步探讨的问题。高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)是一种能高度灵敏且特异地分析鞘脂代谢产物的强大工具，可用于该领域。公开于该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
技术实现思路
专利技术目的为了更有效地区分肝硬化或肝细胞癌，本专利技术的目的在于提供一种提取或检测血清Sph(d18:1)-1-P的试剂在制备用于区分待测对象为肝硬化或肝细胞癌的试剂盒中的应用。解决方案为实现本专利技术目的，本专利技术实施例提供了以下技术方案：本专利技术实施例的第一方面，提供了一种提取或检测血清Sph(d18:1)-1-P的试剂在制备用于区分待测对象为肝硬化或肝细胞癌的试剂盒中的应用。本专利技术实施例的第二方面，提供了一种血清Sph(d18:1)-1-P在制备或筛选用于区分待测对象为肝硬化或肝细胞癌的试剂中的应用，所述用于区分待测对象为肝硬化或肝细胞癌的试剂为提取或检测血清Sph(d18:1)-1-P的试剂。在一种可能的实现方式中，区分待测对象为肝硬化或肝细胞癌的方法包括以下步骤：获取来自于待测对象的血清样品，通过HPLC-MS/MS检测血清样品中的血清Sph(d18:1)-1-P水平；将所得血清Sph(d18:1)-1-P水平与参考值进行比较。在一种可能的实现方式中，当待测对象所患肝硬化或肝细胞癌的病因未知时，检测血清样品中的血清Sph(d18:1)-1-P水平前不包括对待测对象的肝硬化或肝细胞癌的病因进行判断的步骤；当检测血清样品中的血清Sph(d18:1)-1-P水平前待测对象的肝硬化或肝细胞癌的病因已知时，病因为乙型肝炎、丙型肝炎、酒精性肝病、原发性胆汁性肝硬化、隐源性肝硬化、肝静脉闭塞性疾病中的一种或多种；可选地，病因为丙型肝炎、酒精性肝病、原发性胆汁性肝硬化、隐源性肝硬化、肝静脉闭塞性疾病中的一种或多种。在一种可能的实现方式中，所述待测对象的甲胎蛋白为阴性。在一种可能的实现方式中，将所得血清Sph(d18:1)-1-P水平与参考值进行比较时，血清Sph(d18:1)-1-P的参考值为56.29pmol/0.1ml，当血清Sph(d18:1)-1-P的水平大于56.29pmol/0.1ml时，判断为肝细胞癌；当血清Sph(d18:1)-1-P的水平小于56.29pmol/0.1ml时，判断为肝硬化。在一种可能的实现方式中，待测对象为中国人口；可选地：待测对象选自以下一种：所患肝硬化或肝细胞癌的病因未知的中国人口，所患肝硬化或肝细胞癌的病因为乙型肝炎、丙型肝炎、酒精性肝病、原发性胆汁性肝硬化、隐源性肝硬化、肝静脉闭塞性疾病中的一种或多种的中国人口；进一步可选地，待测对象选自以下一种：所患肝硬化或肝细胞癌的病因未知的中国人口，所患肝硬化或肝细胞癌的病因为丙型肝炎、酒精性肝病、原发性胆汁性肝硬化、隐源性肝硬化、肝静脉闭塞性疾病中的一种或多种的中国人口。在一种可能的实现方式中，用于区分肝硬化和肝细胞癌的试剂盒中包括含有血清Sph(d18:1)-1-P的血清样品作为阳性对照。本专利技术实施例的第三方面，提供了一种用于区分待测对象为肝硬化或肝细胞癌的生物标志物，由选自以下生物标志物中的一种、两种、三种、四种、五种、六种或六种以上组成：Cer(d18:1/26:0)、Cer(d18:1/26:1)、Cer(d18:1/16:1)-1-P、HexCer(d18:1/18:0)、HexCer(d18:1/18:1)、dhSph(d18:1/18:0)、dhSph(d18:1/18:0)-1-P、dhCer(d18:0/24:1)-1-P、HexSph(d18:1)、Sph(d18:1)-1-P。在一种可能的实现方式中，所述生物标志物由Sph(d18:1)-1-P以及选自Cer(d18:1/26:0)、Cer(d18:1/26:1)、Cer(d18:1/16:1)-1-P、HexCer(d18:1/18:0)、HexCer(d18:1/18:1)、dhSph(d18:1/18:0)、dhSph(d18:1/18:0)-1-P、dhCer(d18:0/24:1)-1-P、HexSph(d18:1)中的一种、两种、三种、四种或四种以上组成。有益效果本专利技术实施例中血清Sph(d18:1)-1-P的上调表现出对HCC良好的诊断性能。特别是Sph(d18:1)-1-P也可以作为用于诊断AFP阴性HCC的生物标志物。这些发现有助于非侵入性诊断包括AFP阴性HCC在内的HCC。本专利技术实施例中血清Sph(d18:1)-1-P作为生物标志物，可以区别所有病因的肝癌与肝硬化，从而使得医生无需对待测人群的病因进行本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.提取或检测血清Sph(d18:1)-1-P的试剂在制备用于区分待测对象为肝硬化或肝细胞癌的试剂盒中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.提取或检测血清Sph(d18:1)-1-P的试剂在制备用于区分待测对象为肝硬化或肝细胞癌的试剂盒中的应用。


2.血清Sph(d18:1)-1-P在制备或筛选用于区分待测对象为肝硬化或肝细胞癌的试剂中的应用，所述用于区分待测对象为肝硬化或肝细胞癌的试剂为提取或检测血清Sph(d18:1)-1-P的试剂。


3.根据权利要求1所述的应用或权利要求2所述的应用，其特征在于：区分待测对象为肝硬化或肝细胞癌的方法包括以下步骤：获取来自于待测对象的血清样品，通过HPLC-MS/MS检测血清样品中的血清Sph(d18:1)-1-P水平；将所得血清Sph(d18:1)-1-P水平与参考值进行比较。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：
当待测对象所患肝硬化或肝细胞癌的病因未知时，检测血清样品中的血清Sph(d18:1)-1-P水平前不包括对待测对象的肝硬化或肝细胞癌的病因进行判断的步骤；
当检测血清样品中的血清Sph(d18:1)-1-P水平前待测对象的肝硬化或肝细胞癌的病因已知时，病因为乙型肝炎、丙型肝炎、酒精性肝病、原发性胆汁性肝硬化、隐源性肝硬化、肝静脉闭塞性疾病中的一种或多种；可选地，病因为丙型肝炎、酒精性肝病、原发性胆汁性肝硬化、隐源性肝硬化、肝静脉闭塞性疾病中的一种或多种。


5.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述待测对象的甲胎蛋白为阴性。


6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：将所得血清Sph(d18:1)-1-P水平与参考值进行比较时，血清Sph(d18:1)-1-P的参考值为56.29pmol/0.1ml，当血清Sph(d18:1)-1-P的水平大于56.29pmol/0.1ml时，判断为肝细胞癌；当血清Sph(d18:1)-1-P的水平小于56.29pmol/0.1ml时，判断为肝硬化。

【专利技术属性】
技术研发人员：郑素军，张金兰，段钟平，蒋莹莹，刘梅，陈煜，
申请(专利权)人：首都医科大学附属北京佑安医院，中国医学科学院药物研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11