一种加速树突状细胞成熟的体外培养方法及其应用技术

本发明专利技术涉及细胞体外培养技术领域，具体涉及一种加速树突状细胞成熟的体外培养方法及其应用。所述方法包括如下步骤：(1)将PBMC细胞用1640培养液重悬于培养容器中，然后将该培养容器至于恒温、并提供气体碳源的培养箱中培养；(2)培养至预定时间后晃动培养容器，弃去悬浮细胞，然后加入DC无血清培养基、GM‑CSF试剂、Il‑4试剂、cholesterol试剂，继续在所述培养箱中培养；(3)培养至第三天时加入LPS，IL‑1alpha，继续培养至得到成熟DC细胞，即得。本发明专利技术的方法能够显著促进树突状细胞成熟，缩短树突状细胞的培养时间，同时，在培养过程中避免了血清的应用，临床应用更加安全。

【技术实现步骤摘要】
一种加速树突状细胞成熟的体外培养方法及其应用
本专利技术涉及细胞体外培养
，具体涉及一种加速树突状细胞成熟的体外培养方法及其应用。
技术介绍
公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。树突状细胞(dendriticcell，DC)由Steinman和Cohn于1973年首先发现，因其表面具有星状多形性或树枝状突起而得名。DC具有其他细胞所没有得形态特点和运动能力，分布十分广泛。DC不但具有吞噬能力，而且是迄今已知的功能最强的抗原提呈细胞，可以有效地刺激T淋巴细胞和B淋巴细胞活化，从而将固有免疫和获得性免疫有机地联系起来，在肿瘤等疾病治疗中发挥重要作用。传统的DC细胞培养方法一般采用1640培养基加血清，并以GM-CSF以及Il-4做诱导辅以TNF-alpha作为促成熟剂，从外周血单个核细胞(PBMC)历时7-8天培养而成。然而，本专利技术人发现上述这种培养方法具有如下不足：1.含血清培养，具有异源成份，临床应用存本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种加速树突状细胞成熟的体外培养方法，其特征在于：包括步骤：/n(1)将PBMC细胞用1640培养液重悬于培养容器中，然后将该培养容器至于恒温、并提供气体碳源的培养箱中培养；/n(2)培养至预定时间后晃动培养容器，弃去悬浮细胞，然后加入DC无血清培养基、GM-CSF试剂、Il-4试剂、cholesterol试剂，继续在所述培养箱中培养；/n(3)培养至第三天时加入LPS，IL-1alpha，继续培养至得到成熟DC细胞，即得。/n

【技术特征摘要】
1.一种加速树突状细胞成熟的体外培养方法，其特征在于：包括步骤：
(1)将PBMC细胞用1640培养液重悬于培养容器中，然后将该培养容器至于恒温、并提供气体碳源的培养箱中培养；
(2)培养至预定时间后晃动培养容器，弃去悬浮细胞，然后加入DC无血清培养基、GM-CSF试剂、Il-4试剂、cholesterol试剂，继续在所述培养箱中培养；
(3)培养至第三天时加入LPS，IL-1alpha，继续培养至得到成熟DC细胞，即得。


2.根据权利要求1所述的加速树突状细胞成熟的体外培养方法，其特征在于：步骤(1)中，所述培养箱的温度保持37℃恒温，并以体积浓度为5％的二氧化碳为碳源。


3.根据权利要求1所述的加速树突状细胞成熟的体外培养方法，其特征在于：步骤(2)中，所述预定时间为1～2h。


4.根据权利要求1所述的加速树突状细胞成熟的体外培养方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：王刚，叶永清，郑清富，
申请(专利权)人：和泓尚医成都生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51