甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体及其制备方法和检测试剂盒技术

本发明专利技术涉及一种甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体及其制备方法和检测试剂盒。该甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体包括氨基酸序列如SEQ ID NO：1～SEQ ID NO：6中任意一个所示的多肽；或者该抗体包括与氨基酸序列如SEQ ID NO：1～SEQ ID NO：6中任意一个所示的多肽具有至少95％的序列同一性的多肽。上述甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体的分子量小且能够与甲型H1N1流感病毒特异性结合，结合效果好。

【技术实现步骤摘要】
甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体及其制备方法和检测试剂盒
本专利技术涉及生物
，特别是涉及一种甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体及其制备方法和检测试剂盒。
技术介绍
流行性感冒病毒(influenzavirus)是正粘病毒科(Orthomyxoviridae)的代表种，简称流感病毒。人流感病毒分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型，是流行性感冒(流感)的病原体。其中甲型流感病毒抗原性易发生变异，多次引起世界性大流行。对于甲型流感病毒，根据其表面血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)抗原性的不同，可以进一步分为不同的亚型。目前，甲型病毒有16种HA亚型(H1-H16)和9种NA亚型(N1-N9)。甲型H1N1流感病毒表面的糖蛋白血凝素和神经氨酸酶均是1型，因此称为H1N1。随着单克隆技术的不断发展，单克隆抗体在生物药物、临床诊断与治疗方面起着举足轻重的作用。目前针对甲型H1N1流感病毒的抗体主要是通过单克隆技术获得，然而传统的通过单克隆技术获得的抗体存在抗体分子量大的问题。
技术实现思路
基于此，有必要提供一种分子量相对较小的甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体。此外，还提供一种用于表达上述甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体的表达基因、用于表达上述甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体的表达载体、能够分泌上述甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体的宿主细胞、上述甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体的制备方法和含有上述甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体的检测试剂盒。一种甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体，所述抗体包括氨基酸序列如SEQIDNO：1～SEQIDNO：6中任意一个所示的多肽；或者，所述抗体包括与氨基酸序列如SEQIDNO：1～SEQIDNO：6中任意一个所示的多肽具有至少95％的序列同一性的多肽。上述甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体具有较小的分子量且能够与甲型H1N1流感病毒的血凝素的抗原决定簇特异性结合且结合效果好，而且上述甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体还可以通过化学合成或基因工程技术合成，生产成本低。该甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体可应用于甲型H1N1流感病毒的检测。在其中一个实施例中，所述抗体还包括载体蛋白，所述载体蛋白与所述多肽偶联。在其中一个实施例中，所述载体蛋白选自牛血清白蛋白、匙孔血蓝蛋白、卵清蛋白、人血清白蛋白和多聚赖氨酸中的一种。在其中一个实施例中，所述抗体还含有修饰单元，所述修饰单元与所述多肽连接，所述修饰单元的材料选自胶体金、纳米磁珠、生物素和荧光染料中的一种。一种甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体，所述抗体包括氨基酸序列如SEQIDNO：7所示的环肽及与所述环肽偶联的载体蛋白。一种表达基因，所述表达基因包括用于编码上述的甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体中的多肽的核苷酸片段。一种表达载体，所述表达载体包含上述的表达基因。一种宿主细胞，所述宿主细胞内包含上述的表达载体。一种甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体的制备方法，包括以下步骤：培养上述的宿主细胞。一种甲型H1N1流感病毒的检测试剂盒，包括检测试剂，所述检测试剂包括上述的甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体或上述的甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体的制备方法制得的甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体。附图说明图1为实施例1的多肽作为包被抗体的OD值统计图；图2为实施例1的多肽作为包被抗体的P/N值统计图；图3为实施例2的多肽作为包被抗体的OD值统计图；图4为实施例2的多肽作为包被抗体的P/N值统计图；图5为实施例2的未经环化修饰的多肽和经环化修饰后的多肽分别作为包被抗体的P/N值对比图；图6为实施例3的多肽作为包被抗体的OD值统计图；图7为实施例3的多肽作为包被抗体的P/N值统计图。具体实施方式为了便于理解本专利技术，下面将对本专利技术进行更全面的描述，本专利技术可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使本专利技术公开内容更加透彻全面。除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术。本专利技术一实施方式提供了一种甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体，与传统的通过利用杂交瘤细胞的单克隆抗体技术制备的抗体相比，上述甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体的分子量很小、穿透性好，疏水程度、所含电荷及含酸碱性氨基酸的构成合适，可以在氨基酸的个数不超过30个的条件下与甲型H1N1流感病毒表面的血凝素特异性结合，而且上述甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体还可以通过化学合成或基因工程技术合成，生产成本低。该甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体可应用于甲型H1N1流感病毒的检测。具体地，甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体包括氨基酸序列如SEQIDNO：1、SEQIDNO：2或SEQIDNO：3所示的多肽。如SEQIDNO：1所示的氨基酸序列为：MAWMMLLLTLLAHCTGSWAQSVLTQPPSLS；如SEQIDNO：2所示的氨基酸序列为：VFGGGTKLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEEL；如SEQIDNO：3所示的氨基酸序列为：SYWMTWVRQAPGKGLEWVANIKQYGSEKYY。可以理解的是，在一些实施例中，该甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体包括与氨基酸序列如SEQIDNO：1、SEQIDNO：2或SEQIDNO：3所示的多肽具有至少95％的序列同一性的多肽。在其中一个实施例中，甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体为氨基酸序列如SEQIDNO：1、SEQIDNO：2或SEQIDNO：3所示的多肽。在另一个实施例中，该甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体是与氨基酸序列如SEQIDNO：1、SEQIDNO：2或SEQIDNO：3所示的多肽具有至少95％的序列同一性的多肽。在其中一个实施例中，甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体包括氨基酸序列如SEQIDNO：1、SEQIDNO：2或SEQIDNO：3所示的多肽和载体蛋白。通过连接载体蛋白提高甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体的分子量，使得甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体更容易与甲型H1N1流感病毒的血凝素特异性结合，进而提高甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体与甲型H1N1流感病毒的血凝素特异性结合的效果。在一个可选地具体示例中，载体蛋白选自有牛血清白蛋白(BovineSerumAlbumin,BSA)、匙孔血蓝蛋白(KeyholeLimpetHemocyanin，KLH)、卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)、人血清白蛋白(HumanSerumAlbumin,HSA)和多聚赖氨酸中的一种。需要说明的是，本文中的多聚赖氨酸是指由25个～30个赖氨酸残基聚合而成的多肽。当然，在其他实本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体，其特征在于，所述抗体包括氨基酸序列如SEQ ID NO：1～SEQ ID NO：6中任意一个所示的多肽；/n或者，所述抗体包括与氨基酸序列如SEQ ID NO：1～SEQ ID NO：6中任意一个所示的多肽具有至少95％的序列同一性的多肽。/n

【技术特征摘要】
1.一种甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体，其特征在于，所述抗体包括氨基酸序列如SEQIDNO：1～SEQIDNO：6中任意一个所示的多肽；
或者，所述抗体包括与氨基酸序列如SEQIDNO：1～SEQIDNO：6中任意一个所示的多肽具有至少95％的序列同一性的多肽。


2.根据权利要求1所述的甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体，其特征在于，所述抗体还包括载体蛋白，所述载体蛋白与所述多肽偶联。


3.根据权利要求2所述的甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体，其特征在于，所述载体蛋白选自牛血清白蛋白、匙孔血蓝蛋白、卵清蛋白、人血清白蛋白和多聚赖氨酸中的一种。


4.根据权利要求1～3任一项所述的甲型H1N1流感病毒的人工合成抗体，其特征在于，所述抗体还含有修饰单元，所述修饰单元与所述多肽连接，所述修饰单元的材料选自胶体金、纳米磁珠、生物素和荧光染料中的一种。


5.一种甲型H1N1...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭小艳，顾大勇，何建安，龙军，李涛，张良，吴晓聪，覃淑萍，
申请(专利权)人：深圳市第二人民医院，深圳市检验检疫科学研究院，深圳国际旅行卫生保健中心深圳海关口岸门诊部，
类型：发明
国别省市：广东;44