杂交瘤细胞株及其制备方法和应用、单克隆抗体及其应用技术

本发明专利技术涉及一种杂交瘤细胞株及其制备方法和应用、单克隆抗体及其应用。该杂交瘤细胞株的保藏号为GDMCC No：61044或者该杂交瘤细胞株的保藏号为GDMCC No：61043。上述杂交瘤细胞株能够分泌与胰岛素特异性结合的胰岛素抗体，该胰岛素抗体能够用于制备灵敏度高、特异性强、稳定性好的胰岛素检测试剂盒。用本研究提供的胰岛素抗体研制的检测试剂盒，可精确检测待测样品中胰岛素，与市售试剂盒检测结果高度相关，与临床诊断具有较高诊断一致性。

【技术实现步骤摘要】
杂交瘤细胞株及其制备方法和应用、单克隆抗体及其应用
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种杂交瘤细胞株及其制备方法和应用、单克隆抗体及其应用。
技术介绍
胰岛素（INS）是胰岛β细胞合成和分泌的一种多肽类激素，由21个氨基酸构成的A链和30个氨基酸构成的B链，以两个双硫链相连组成，相对分子质量为5734D，是机体内唯一的降糖激素，其与机体能量代谢密切相关，并参与机体细胞生长、发育、增殖、分化等调控。INS基因存在于所有细胞，并在这些细胞具有相同的拷贝和同样的结构，但只在胰岛β细胞高度特异地表达。在胰岛β细胞的细胞核中，第11对染色体短臂上胰岛素基因区DNA向mRNA转录，mRNA从细胞核移向细胞浆的内质网，转译成由110个氨基酸残基构成的前胰岛素原。前胰岛素原经过蛋白水解作用除其前肽，生成86个氨基酸组成的长肽链-胰岛素原（Proinsulin）。胰岛素原随细胞浆中的微泡进入高尔基体，经蛋白水解酶的作用，切去31、32、60三个精氨酸连接的链，断链生成没有生理活性的C肽，同时生成胰岛素，分泌到B细胞外，进入血液循环中。未经过蛋白酶水解本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种杂交瘤细胞株，其特征在于，所述杂交瘤细胞株的保藏号为GDMCC No：61044或者所述杂交瘤细胞株的保藏号为GDMCC No：61043。/n

【技术特征摘要】
1.一种杂交瘤细胞株，其特征在于，所述杂交瘤细胞株的保藏号为GDMCCNo：61044或者所述杂交瘤细胞株的保藏号为GDMCCNo：61043。


2.一种单克隆抗体，其特征在于，由权利要求1所述的杂交瘤细胞株分泌。


3.根据权利要求2所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体能够识别多肽片段，所述多肽片段的氨基酸序列如SEQIDNO：3或者SEQIDNO：4所示。


4.一种杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
采用胰岛素原免疫小鼠，获得免疫后的小鼠；及
提取所述免疫后的小鼠的脾细胞，并与小鼠骨髓瘤细胞融合，筛选，得到杂交瘤细胞株。


5.根据权利要求4所述的杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，所述筛选的步骤包括：采用多肽并按照ELISA方法对融合后的细胞进行筛选，得到所述杂交瘤细胞株，其中，所述多肽包括第一片段及第二片段中的至少一个，所述第一片段含有如SEQIDNO：3所示的氨基酸序列，所述第二片段含有如SEQIDNO：4所示的氨基酸序列。


6.根据权利要求5所述的杂交瘤细胞株的制备方法，其特征在于，所述采用多肽并按照ELISA方法对融合后的细胞进行筛选的步骤包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘先成，于蕾，曾映，胡明龙，杨宁，
申请(专利权)人：深圳普门科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44