一种短双歧杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术还提供了短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)TR103，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2018728，保藏地址为中华人民共和国湖北省武汉市武汉大学，保藏日期为2018年10月31日。本发明专利技术提供的短双歧杆菌TR103来源于长寿老人，其具有保护肠道黏膜、保护肝脏、避免肝损伤、调节排便频率、缓解肥胖的作用。

【技术实现步骤摘要】
一种短双歧杆菌及其应用
本专利技术属于微生物领域，特别涉及一种短双歧杆菌，还涉及该菌株的应用。
技术介绍
引起肠道黏膜损伤的因素主要是严重创伤、严重感染、烧伤、休克、急性胰腺炎和其它危重病人可出现肠黏膜屏障的损伤，而后者又可加重各种原发疾病的病情，两者互相促进，互为因果。其中放化疗药物、腹部透析、细菌性腹膜炎、炎症性肠病等病对肠道黏膜损伤最为常见，肠黏膜屏障损伤会引起细菌移位，使寄生于大肠的致病菌可以移位到小肠(横向移位)，也可以跨过肠黏膜进入肠系膜淋巴结和门静脉，继而进入体循环(纵向移位)，均可引起严重全身性生理功能紊乱。尤其是肠内细菌的大量繁殖引起过多的毒素进入门静脉和肝脏，一旦肝脏清除毒素的能力下降，便发生内毒素血症，而内毒素不仅可直接损伤重要脏器，还可激活补体和凝血机制，出现呼吸窘迫综合征和弥漫性血管内凝血，甚至发生多器官功能衰竭。目前，治疗肠道黏膜损伤疾病的药物品种很少，临床上对此病治疗的现有西药疗效均有限，且对肝肾副作用大，无法长期使用，对患者肝肾不利或有损伤。中药品种相对较少，治疗功能较单一，短期疗效不明显。酒精对人体的危害是众所周知的。过量饮酒会引起消化系统、循环系统等损伤，表现为情绪失控、意识障碍、消化道不适、甚至死亡等。长期饮酒可引起的酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝硬化等肝脏疾病。我国酒精肝患者高达近亿人，且发病率呈每年递增趋势。长期饮酒更可使心肌细胞细胞膜受损、细胞器功能失常、机体内环境钙离子失衡、蛋白质收缩功能障碍，引起酒精性心脏病。如何维护酒民身体健康一直是医学界和社会学界高度关注的课题。便秘是一种常见症状，指的是大便次数减少和（或）粪便干燥难解，一般两天以上无排便，提示存在便秘。据统计，我国便秘患者人数在30％以上，女性是男性的4倍以上，且随着年龄的增大，其发病率也呈上升趋势。现代科学研究表明，大便中含吲哚、硫化氢、甲烷、酚、氨等有毒物质高达796种，人每天排便一次就能将这些细菌、毒物、代谢废物及时排出体外。如排便时间超过48小时，则毒力成倍增加。长期便秘者易导致痔疮、肛裂和脱肛等疾病；患有心脏病、高血压病人排便因用力，可诱发中风，心肌梗塞、脑溢血，甚至可导致生命意外；便秘在有些疾病如结肠癌(据资料表明，严重便秘者约10％患结肠癌)、肝性脑病、乳腺疾病、早老性痴呆的发生中也有重要作用。因此，预防和及时合理治疗便秘，将会大大减轻便秘带来的严重后果和社会负担，庞大的患者消费群体将有力地刺激便秘市场不断拓展。目前，可用于便秘治疗的药物较多，但多数不适于慢性便秘患者，亦不适宜长期适用。人们对饮食与健康之间关系的认识日渐提高，这已使得他们对在提供基本营养之余还能增强健康的产品需求日益高涨。有研究表明摄入益生菌有益于维持身体微妙的微生物平衡。众所周知，这种平衡可促进肠道健康并增强免疫系统及其他生理机能，由此成为全面提升人体健康的一项关键因素。
技术实现思路
专利技术目的：为了解决保证人们的身体健康，本专利技术提供了一种短双歧杆菌。技术方案：本专利技术所采用的技术方案为：短双歧杆菌(Bifidobacteriumbreve)TR103，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO：M2018728，保藏地址为中华人民共和国湖北省武汉市武汉大学，保藏日期为2018年10月31日。上述短双歧杆菌（Bifidobacteriumbreve）TR103的规模化发酵方法，包括以下步骤：组份1：水溶液，其中，酵母膏2%、大豆蛋白胨1%、无水乙酸钠0.5%、磷酸氢二钾0.2%、柠檬酸氢二铵0.2%、吐温-800.1%，121℃灭菌20分钟；组份2：水溶液，其中，无水葡萄糖2.3%，低聚半乳糖0.4%，无水硫酸镁0.025%，一水硫酸锰0.02%，115℃灭菌20分钟；组份3：水溶液，其中，L-半胱氨酸盐酸盐0.1%，灭菌锅121℃灭菌20分钟；冷却至40℃以下的组份1和冷却至40℃以下的组份2混合，调pH至7.1；接种；再加入组份3；37℃恒温培养。本专利技术还提供了短双歧杆菌（Bifidobacteriumbreve）TR103在制备治疗/预防肠道黏膜损伤的药物或保健品中的应用。本专利技术还提供了短双歧杆菌（Bifidobacteriumbreve）TR103在制备预防和/或治疗酒精引起肝损伤的药物或保健品中的应用。本专利技术还提供了短双歧杆菌（Bifidobacteriumbreve）TR103在制备预防和/或治疗便秘的药物或保健品中的应用。本专利技术还提供了一种药物组合物，所述组合物中包括短双歧杆菌（Bifidobacteriumbreve）TR103，还包括至少一种药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂或辅助剂。优选地，所述药物组合物用于治疗/预防小鼠肠道黏膜损伤、预防和/或治疗酒精引起肝损伤、预防和/或治疗便秘的药物或保健品；所述短双歧杆菌（Bifidobacteriumbreve）TR103的剂量为（0.3-2.0）×1010CFU/g。有益效果：本专利技术提供的短双歧杆菌TR103来源于长寿老人，其具有保护肠道黏膜、保护肝脏、避免肝损伤、调节排便频率、缓解肥胖的作用。附图说明图1为短双歧杆菌TR103革兰氏染色光学显微镜照片示意图。图2为短双歧杆菌TR103的生物进化树图。图3为各组小鼠解剖之后取出的各组小鼠结肠照片。图4为各组小鼠造模后每日体重图。图5为饮酒小鼠灌胃短双歧乳杆菌TR103后体重的变化趋势图。图6为短双歧乳杆菌TR103对小鼠血清ALT的影响图。图7为短双歧乳杆菌TR103对小鼠血清AST的影响图。具体实施方式下面结合附图对本专利技术做出进一步说明。实施例1菌株的分离、纯化及鉴定1、菌种和培养基和培养条件（1）菌源对一位百岁老人体内通过菌种分离筛选，得到新的短双歧杆菌。宿主健康状况与饮食特点：该百岁老人活动自如，精神状态良好，体重指数正常。日常饮食以杂粮和白肉为主，每日饮白酒约50ml。（2）培养基富集培养基：5g/L酵母粉，10g/L蛋白胨和2.5g/LNacl；平板培养基：20g/L葡萄糖，2g/L(NH4)2SO4，13.3g/LKH2PO4，1.2g/LMgSO4.7H2O，1.7g/L柠檬酸，1.7g/L微量元素溶液，15g/L琼脂，0.5μg/mL尼罗蓝A。2、菌株的分离和鉴定（1）菌株的分离取样品约0.2g，加入1mlMRS培养基，涡旋震荡1min，依次10倍稀释至10-6，每个稀释浓度取200μL涂布于含1%CaCO3乳酸菌选择性培养基MRS培养基上，37℃厌氧罐中培养48h，挑取平板上单菌落，在MRS固体培养基上划线纯化，37℃厌氧罐中培养48h，得到纯的菌落。（2）菌株的鉴定细胞形态：细胞短，纤细或粗大，常为棒状杆菌，有或无分叉。用革兰氏染色有时可见颗粒。细胞在盐水中自动本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)TR103，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2018728，保藏地址为中华人民共和国湖北省武汉市武汉大学，保藏日期为2018年10月31日。/n

【技术特征摘要】
1.短双歧杆菌(Bifidobacteriumbreve)TR103，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO：M2018728，保藏地址为中华人民共和国湖北省武汉市武汉大学，保藏日期为2018年10月31日。


2.权利要求1所述的短双歧杆菌（Bifidobacteriumbreve）TR103的规模化发酵方法，其特征在于：包括以下步骤：
组份1：水溶液，其中，酵母膏2%、大豆蛋白胨1%、无水乙酸钠0.5%、磷酸氢二钾0.2%、柠檬酸氢二铵0.2%、吐温-800.1%，121℃灭菌20分钟；
组份2：水溶液，其中，无水葡萄糖2.3%，低聚半乳糖0.4%，无水硫酸镁0.025%，一水硫酸锰0.02%，115℃灭菌20分钟；
组份3：水溶液，其中，L-半胱氨酸盐酸盐0.1%，灭菌锅121℃灭菌20分钟；
冷却至40℃以下的组份1和冷却至40℃以下的组份2混合，调pH至7.1；接种；再加入组份3；37℃恒温培养。

【专利技术属性】
技术研发人员：李珮铷，贾长生，边高瑞，王信超，李苗，许登泉，王林，
申请(专利权)人：南京益瑞兰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32