一株用于香蕉鞘腐病防控的解淀粉芽胞杆菌ZKY01及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株用于香蕉鞘腐病防控的解淀粉芽胞杆菌ZKY01及其应用。解淀粉芽胞杆菌ZKY01，已于2019年11月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学；保藏号为CCTCC NO:M 2019948。该菌株能够对多种植物病原真菌和细菌具有较好的平板拮抗活性，包括引起香蕉鞘腐病的変栖克雷伯氏菌在内的土传维管束病害具有很好的拮抗能力，并在温室和田间表现出良好的防治效果；在珠海平沙开展喷叶防控粉杂1号鞘腐病、恢复台风受损的粉杂1号粉蕉和珍珠芭乐的大田试验，对粉杂1号鞘腐病的防治效果达到85.71％，能够在台风后1个月恢复严重受损的粉杂1号和珍珠芭乐的正常生长。

【技术实现步骤摘要】
一株用于香蕉鞘腐病防控的解淀粉芽胞杆菌ZKY01及其应用
本专利技术属于生物农药领域，涉及一株用于香蕉鞘腐病防控的解淀粉芽胞杆菌ZKY01及其应用。
技术介绍
香蕉(Musaspp.)是著名的热带和亚热带水果，年产量超过1亿吨，是贸易量最大的水果(http://www.faostat.fao.org/)。在非洲和中南美洲等地，香蕉还是超过4亿人的主食，是排在水稻、小麦和玉米之后的第4大粮食作物。我国是世界香蕉生产第2大国，主产区包括广东、广西、海南、福建、云南和台湾等省区。近年来香蕉叶鞘腐烂病，又称鞘腐病，在我国影响香蕉的生产，该病的致病因子比较复杂，并表现出不同时期由不同病原引起的特征。谢昌平等2007年报道南方茎点霉(PhomajolyanaPirozynski&Morgan-Jones)引起鞘腐病(谢昌平等，香蕉茎点霉鞘腐病的病原鉴定与药剂毒力测定，热带作物学报，2007,28(3):88-92)，严玉宁等2011年报道成团泛菌(Pantoeaagglomerans)引起香蕉叶鞘腐败病(严玉宁等，香蕉叶鞘腐败病病原鉴定，植物病理学报,2011,41(2):124-130)，而Fan等则于2016年报道了変栖克雷伯氏菌Klebsiellavariicola引起的叶鞘腐烂病(FanH,etal.FirstreportofbananasoftrotcausedbyKlebsiellavariicolainChina.PlantDisease,2016,100(2):517)。近年来广东大面积发生叶鞘腐烂病病害，大田症状与上述后两篇文献描述的症状一致，腐烂叶鞘无臭味，但本实验室从东莞、佛山、珠海等发生鞘腐病的香蕉和粉蕉采集的样品分离未获得成团泛菌，而是変栖克雷伯氏菌，与Fan等的报道一致，显示近年来广东香蕉园的叶鞘腐烂病流行可能是変栖克雷伯氏菌引起。除国内有报道外，国外也报道在海地发现変栖克雷伯氏菌引起大蕉病害(FultonJCetal.FirstreportofPlantainsoftrotcausedbyKlebsiellavariicolainHaiti.PlantDisease,2020,104(6):1851.)，从文献报道的病害回接症状来看，与国内香蕉发病症状类似。変栖克雷伯氏菌引起的香蕉鞘腐病尚无有效防控措施的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一株植物根际解淀粉芽胞杆菌。本专利技术提供的解淀粉芽胞杆菌ZKY01菌株(Bacillusamyloliquefaciensstr.ZKY01)，已于2019年11月18日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址：中国武汉武汉大学；保藏号为CCTCCNO:M2019948。该菌株分离自广东省珠海市斗门区大赤坎村香蕉根际土，为革兰氏阳性菌，菌体杆状，产生芽胞，接触酶试验阴性、氧化酶试验阳性，具有水解淀粉、酪蛋白、尿素能力，能够利用木糖、甘露醇、半乳糖、柠檬酸盐，具有糖酵解能力、硝酸盐还原能力，具有产硫化氢能力，V.P试验呈负反应，不具备产吲哚和二羟基丙酮的能力，不能够产生苯丙氨酸脱氨酶、不能分解酪氨酸和吐温80，不能够利用阿拉伯糖产酸。好氧生长，生长pH范围较广，pH5.0～pH9.0均能生长，不能在50℃生长，10℃不能生长，能够在0.001％溶菌酶、3％～10％的NaCl中生长。在MSgg液体培养基上能够形成稳定的漂浮的薄皮，在MSgg固体培养基上能够形成具有多重褶皱的菌落，在BGM1液体培养基上可以形成薄皮，在BGM1固体培养基上形成分支的菌落，在BGDM液体培养基上也可以形成薄皮，但在固体培养基上只能形成圆形的光滑菌落。本专利技术所述的解淀粉芽胞杆菌ZKY01在制备防治香蕉鞘腐病的生物农药中的应用。本专利技术所述的解淀粉芽胞杆菌ZKY01在制备防治不同来源植物病原真菌镰刀菌、花生果实腐烂病菌、菌核病菌、白绢病菌、香蕉枯萎病菌中的应用。本专利技术所述的解淀粉芽胞杆菌ZKY01在制备恢复果树台风受损的制剂中的应用。由本专利技术所述的解淀粉芽胞杆菌ZKY01制备的菌剂。所述的菌剂优选为可湿性粉剂。本专利技术所述的可湿性粉剂可以利用本领域常规的可湿性粉剂制备工艺制备。本专利技术所述的菌剂在防治香蕉鞘腐病、花生果实腐烂病、菌核病、白绢病、香蕉枯萎病以及恢复果树台风受损中的应用。有益效果：本专利技术提供的上述菌株通过获得的16SrDNA、gyrA和gyrB基因片段，在NCBI上通过BLAST搜索和比对后被证明是一株未被报道的解淀粉芽胞杆菌，能够对多种植物病原真菌和细菌具有较好的平板拮抗活性，包括引起香蕉鞘腐病的変栖克雷伯氏菌、引起柑橘溃疡病的黄单胞菌，以及不同寄主型的尖孢镰刀菌、立枯丝核菌、齐整小核菌等土传维管束病害具有很好的拮抗能力，并在温室和田间表现出良好的防治效果；在珠海平沙开展喷叶防控粉杂1号鞘腐病、恢复台风受损的粉杂1号粉蕉和珍珠芭乐的大田试验，对粉杂1号鞘腐病的防治效果达到85.71％，能够在台风后1个月恢复严重受损的粉杂1号和珍珠芭乐的正常生长。附图说明图1ZKY01在Msgg培养基上形成的薄皮和菌落形态A、ZKY01在Msgg液体培养基上形成的薄皮；B、ZKY01在固体Msgg培养基上形成的菌落图2ZKY01在BGM1和BGDM培养基上形成的薄皮和菌落形态A、BGM1上形成的薄皮；BBGM1上形成的菌落；C、BGDM上形成的薄皮；D、BGDM上形成的菌落图3基于16SrDNA序列的菌株ZKY01与相关菌株的系统发育树图4基于gyrA基因序列的菌株ZKY01与相关菌株的系统发育树；图5基于gyrB基因序列的菌株ZKY01与相关菌株的系统发育树；图6ZKY01对変栖克雷伯氏菌的平板拮抗活性生物材料保藏证明BacillusamyloliquefaciensstrainZKY01，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2019年11月18日，保藏地点中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCCNO：M2019948。具体实施方式实施例1：ZKY01的分离纯化和理化性质研究(一)ZKY01的分离、纯化和保藏在珠海市斗门区大赤坎香蕉种植园中，采集发病地健康巴西蕉根际土，采用稀释平板法在LB上分离培养细菌；37℃恒温培养过夜，挑长出的形态有差异的细菌，于新的LB平板纯化培养，并以菌液形式用30％甘油保存于-20℃及-80℃。(二)ZKY01的理化性质测定试验方法及所需培养基参考《常见细菌系统鉴定手册》(东秀珠、蔡妙英等编著，北京：科学出版社，2001)。测试结果如表1所示。表1ZKY01生理生化特征注：“－”表示阴性，“+”表示阳性。(三)利用Biolog细菌鉴定系统测定的碳源利用结果本申请对ZKY01菌株进行了Biolog鉴定，样品送往广东省微生物分析检测中心鉴定。Biolog未能给出准确本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.解淀粉芽胞杆菌ZKY01(Bacillus amyloliquefaciens str.ZKY01)，于2019年11月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:M 2019948。/n

【技术特征摘要】
1.解淀粉芽胞杆菌ZKY01(Bacillusamyloliquefaciensstr.ZKY01)，于2019年11月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNO:M2019948。


2.权利要求1所述的解淀粉芽胞杆菌ZKY01在制备防治香蕉鞘腐病的生物农药中的应用。


3.权利要求1所述的解淀粉芽胞杆菌ZKY01在制备防治不同来源植物病原真菌镰刀菌、花生果实腐烂病菌、菌核病菌、白绢病菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：喻国辉，程萍，郑丽，李春季，孙昀皓，
申请(专利权)人：仲恺农业工程学院，
类型：发明
国别省市：广东;44