钩藤发根的高效诱导和培养方法技术

本发明专利技术公开了钩藤发根的高效诱导和培养方法，具体方法是将活化的发根农杆菌C58C1用于浸染经预培养的钩藤外植体，然后接种于共培养的培养基上暗培养3d，然后转移至发根诱导培养基上诱导培养；该方法钩藤发根的诱导效率高，为外源基因的遗传转化奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】
钩藤发根的高效诱导和培养方法
本专利技术涉及组织培养领域，具体涉及钩藤发根的高效诱导和培养方法。
技术介绍
钩藤(Uncariarhynchophylla)是贵州省地道药材，种植面积广，需求量高，功能清血平肝，息风定惊，用于风热头痛，感冒压惊，惊痛抽搐等症。其药效活性成分为钩藤碱和异构藤碱，有降血压作用，能有效控制多种心血管疾病，广泛应用于医学临床，生产上其含量高低已作为评价钩藤药材品质优劣的标准。近年受心血管的高频率患发，使得市场上对钩藤的应用量及需求量明显上升，实现对钩藤优质品种的选育及钩藤中有效次生代谢物的大规模工业化生产势具有重要的产业意义。发根是发根农杆菌将自身pRi质粒上rol基因整合进植物基因组后诱导细胞产生的分支丰富的毛状根组织，拥有无激素自主生长、生长速度快，无向地性，遗传稳定等特点。同时发根具有和母体植物相同的代谢途径，并往往能合成比母体植物更高水平的次生代谢物。很多药用植物都建立了发根培养体系，用于大规模获取有价值的天然代谢产物，包括银杏、颠茄、丹参、甘草和朱砂根等。发根的诱导本质上是一种农杆菌介导的转基因过程，诱本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.钩藤发根的高效诱导和培养方法，其特征在于，包括如下步骤：将活化的发根农杆菌C58C1用于浸染经预培养的钩藤外植体，然后接种于共培养的培养基上暗培养3d，然后转移至发根诱导培养基上诱导培养。/n

【技术特征摘要】
1.钩藤发根的高效诱导和培养方法，其特征在于，包括如下步骤：将活化的发根农杆菌C58C1用于浸染经预培养的钩藤外植体，然后接种于共培养的培养基上暗培养3d，然后转移至发根诱导培养基上诱导培养。


2.根据权利要求1所述钩藤发根的高效诱导和培养方法，其特征在于：所述预培养为将钩藤的叶或茎剪出伤口接种于预培培养基上暗培养5天，所述预培培养基为WPM+2mg·L-12,4-D+0.5mg·L-16-BA+3g·L-1蔗糖+7.2‰琼脂，pH为5.8-6.0。


3.根据权利要求1所述钩藤发根的高效诱导和培养方法，其特征在于：所述共培养的培养基为WPM+400mg·L-1头孢克肟+30g·L-1蔗糖+7.2‰琼脂。


4.根据权利要求1所述钩...

【专利技术属性】
技术研发人员：强玮，张明生，谭艾娟，路星星，付维，
申请(专利权)人：贵州大学，
类型：发明
国别省市：贵州;52