从盐地碱蓬中分离精制多种甜菜红素的方法技术

本发明专利技术提供了一种从盐地碱蓬中分离精制多种甜菜红素的方法，包括以下步骤：酸性水溶液浸提72小时后用酸性水溶液洗脱，得到A0；A0通过中压制备液相色谱分离得到B1和B2；B1通过凝胶色谱分离洗脱后得到B1‑C1；B1‑C1通过中压制备液相色谱分离、凝胶色谱分离和高压制备液相色谱纯化得到苋菜红苷；B2通过中压制备液相色谱分离得到B2‑C1和B2‑C2；馏分B2‑C1通过高压制备液相色谱分离得到B2‑C1‑D1和B2‑C1‑D2；B2‑C1‑D1通过凝胶色谱分离和高压制备液相色谱纯化得到甜菜红苷；B2‑C1‑D2通过高压制备液相色谱纯化，得到鸡冠花素II；B2‑C2通过高压制备液相色谱纯化，得到6’‑O‑丙二酰‑鸡冠花素II。通过本发明专利技术的技术方案，实现了从盐地碱蓬中分离精制4种甜菜红素，提取过程安全简便，纯度可达94％以上。

Separation and purification of beet red pigment from Suaeda salsa

【技术实现步骤摘要】
从盐地碱蓬中分离精制多种甜菜红素的方法
本专利技术涉及天然药物提取
，具体而言，涉及一种从盐地碱蓬中分离精制多种甜菜红素的方法。
技术介绍
甜菜红素是水溶性含氮的生物碱类色素，存在于苋科、藜科、紫茉莉科和商陆科等科中，是一类重要的天然色素，通常作为食品添加剂、化妆品着色剂，同时甜菜红素具有抗氧化、抗肿瘤、保肝等生物活性和潜在的保健医用价值，但由于其稳定性差目前市场上尚未见到甜菜红素的纯品。盐地碱蓬(Suaedasalsa)属于藜科(Chenopodiaceae)一年生草本植物，别名盐蓬、翅碱蓬、黄须菜，广泛分布于我国华北，东北和西北地区。相关研究已证实该植物茎叶中富含较高的甜菜红素，可用作食品工业中食品和饮料的原料。因此，从盐地碱蓬中提取甜菜红素具有较为实际的意义，而盐地碱蓬中的含有的甜菜红素的种类较多，如何从盐地碱蓬中分离精制提纯甜菜红素成为亟待解决的技术问题。
技术实现思路
本专利技术旨在至少解决现有技术或相关技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术的目的在于提供一种从盐地碱蓬中分离精制多种甜菜红素的方法，能够分离精制出4种甜菜红素，纯度可达94％以上，分别为苋菜红苷(amaranthin)、甜菜红苷(betanidin)、鸡冠花素II(celosianinII)、6’-O-丙二酰-鸡冠花素II(6'-O-malonyl-celosianinII)。为了实现上述目的，本专利技术的技术方案提供了一种从盐地碱蓬中分离精制多种甜菜红素的方法，包括以下步骤：r>(1)将新鲜的盐地碱蓬茎叶洗净晾干，加入酸性水溶液，在室温下浸提72小时，将浸提液用酸性水溶液洗脱，得到组分A0；(2)将所述组分A0通过中压制备液相色谱分离，得到馏分B1和馏分B2；(3)将所述馏分B1通过凝胶色谱分离，洗脱后得到馏分B1-C1；(4)将所述馏分B1-C1通过中压制备液相色谱分离、凝胶色谱分离和高压制备液相色谱纯化，即可得到第一种甜菜红素，苋菜红苷(amaranthin)；(5)将所述馏分B2通过中压制备液相色谱分离得到馏分B2-C1和馏分B2-C2；(6)将所述馏分B2-C1通过高压制备液相色谱分离得到馏分B2-C1-D1和B2-C1-D2；(7)将所述馏分B2-C1-D1通过凝胶色谱分离和高压制备液相色谱纯化，即可得到第二种甜菜红素，甜菜红苷(betanidin)；(8)将所述馏分B2-C1-D2通过高压制备液相色谱纯化，即可得到第三种甜菜红素，鸡冠花素II(celosianinII)；(9)将所述馏分B2-C2通过高压制备液相色谱纯化，即可得到第四种甜菜红素，6’-O-丙二酰-鸡冠花素II(6'-O-malonyl-celosianinII)。优选地，所述步骤(2)中的中压制备液相色谱(AgilentTechnologies971-FPFlashPurificationSystem)，使用MPLC-C18柱(MPLCBuchiC620，色谱柱ODS(YamazenODS-C18500×80mm，40-60μm))，温度为室温，以0.1％(v/v)乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱，洗脱梯度为0％5min，0％-55％45min，100％20min；流速为100mL·min-1。优选地，所述凝胶色谱分离中使用的凝胶为SephadexLH-20羟丙基葡聚糖凝胶，采用50％甲醇(0.5％TFA)洗脱。优选地，所述步骤(4)中的中压制备液相色谱(AgilentTechnologies971-FPFlashPurificationSystem)，使用MPLC-C18柱(MPLCBuchiC620,色谱柱ODS(YamazenODS-C1820×500mm,4-6μm))，温度为室温，以0.1％(v/v)乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱，洗脱梯度为0％5min，0％-55％45min，100％20min；流速为100mL·min-1。优选地，所述步骤(4)中的高压制备液相色谱(Pre-HPLCGilson281),色谱柱为ODS(LunaC18100×30mm,5μm)，温度为室温，以0.1％(v/v)乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱，洗脱梯度为1％～10％12min，100％2min；流速为25mL·min-1。优选地，所述步骤(5)中的中压制备液相色谱(AgilentTechnologies971-FPFlashPurificationSystem)，使用MPLC-C18柱(MPLCBuchiC620,色谱柱ODS(YamazenODS-C1820×500mm,40-60μm))，温度为室温，以0.1％(v/v)乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱，洗脱梯度为0％5min，0％-55％45min，100％20min；流速为100mL·min-1。优选地，所述步骤(6)中的高压制备液相色谱(Pre-HPLCGilson281),色谱柱为ODS(LunaC18100×30mm,5μm)，温度为室温，以含0.1％(v/v)乙腈溶液作为流动相进行洗脱，洗脱梯度为0％5min，0％-25％25min，90％10min；流速为30mL·min-1。优选地，所述步骤(7)、步骤(8)和步骤(9)中的高压制备液相色谱(Pre-HPLCGilson281),色谱柱为ODS(LunaC18100×30mm,5μm)，温度为室温，以含0.1％(v/v)乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱，洗脱梯度为10％～20％12min，100％2min；流速为25mL·min-1。优选地，所述步骤(1)中浸提预处理时，所述盐地碱蓬茎叶与所述酸性水溶液的料液比为1:3，所述酸性水溶液的pH值为5。本专利技术提出的从盐地碱蓬中分离精制多种甜菜红素的方法具有以下有益技术效果：(1)通过采用酸性水溶液浸提、中压制备液相色谱分离、高压制备液相色谱分离和凝胶色谱分离等的相互配合，实现了从盐地碱蓬中分离精制多种甜菜红素，提取过程安全简便，原料盐地碱蓬来源广泛容易获得，提取过程用的化工试剂较为常见，容易获得，利用本专利技术提出的方法得到的4种甜菜红素，纯度可达94％以上，适用于工业大规模生产，同时也充分开发了盐地碱蓬资源，具有广泛的应用价值和广阔的市场前景。(2)将盐地碱蓬茎叶在酸性水溶液中浸提72小时，有助于提取盐地碱蓬叶片浸出液，从而较大程度地将盐地碱蓬叶片中的甜菜红素提取出来，而采用的分离步骤和设计的各个参数较为合理，实现了4种甜菜红素的逐步分离精制，且纯度较高，利用率高。本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述部分中给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。附图说明本专利技术的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：图1示出了根据本专利技术的一个实施例的从盐地碱蓬中分离精制多种甜菜红素的方法的流程示意图；图2示出了根据本专利技术的一个实施例的从盐地碱蓬中分离本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从盐地碱蓬中分离精制多种甜菜红素的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)将新鲜的盐地碱蓬茎叶洗净晾干，加入酸性水溶液，在室温下浸提72小时，将浸提液用酸性水溶液洗脱，得到组分A0；/n(2)将所述组分A0通过中压制备液相色谱分离，得到馏分B1和馏分B2；/n(3)将所述馏分B1通过凝胶色谱分离，洗脱后得到馏分B1-C1；/n(4)将所述馏分B1-C1通过中压制备液相色谱分离、凝胶色谱分离和高压制备液相色谱纯化，即可得到第一种甜菜红素，苋菜红苷(amaranthin)；/n(5)将所述馏分B2通过中压制备液相色谱分离得到馏分B2-C1和馏分B2-C2；/n(6)将所述馏分B2-C1通过高压制备液相色谱分离得到馏分B2-C1-D1和B2-C1-D2；/n(7)将所述馏分B2-C1-D1通过凝胶色谱分离和高压制备液相色谱纯化，即可得到第二种甜菜红素，甜菜红苷(betanidin)；/n(8)将所述馏分B2-C1-D2通过高压制备液相色谱纯化，即可得到第三种甜菜红素，鸡冠花素II(celosianinII)；/n(9)将所述馏分B2-C2通过高压制备液相色谱纯化，即可得到第四种甜菜红素，6’-O-丙二酰-鸡冠花素II(6'-O-malonyl-celosianinII)。/n...

【技术特征摘要】
1.一种从盐地碱蓬中分离精制多种甜菜红素的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将新鲜的盐地碱蓬茎叶洗净晾干，加入酸性水溶液，在室温下浸提72小时，将浸提液用酸性水溶液洗脱，得到组分A0；
(2)将所述组分A0通过中压制备液相色谱分离，得到馏分B1和馏分B2；
(3)将所述馏分B1通过凝胶色谱分离，洗脱后得到馏分B1-C1；
(4)将所述馏分B1-C1通过中压制备液相色谱分离、凝胶色谱分离和高压制备液相色谱纯化，即可得到第一种甜菜红素，苋菜红苷(amaranthin)；
(5)将所述馏分B2通过中压制备液相色谱分离得到馏分B2-C1和馏分B2-C2；
(6)将所述馏分B2-C1通过高压制备液相色谱分离得到馏分B2-C1-D1和B2-C1-D2；
(7)将所述馏分B2-C1-D1通过凝胶色谱分离和高压制备液相色谱纯化，即可得到第二种甜菜红素，甜菜红苷(betanidin)；
(8)将所述馏分B2-C1-D2通过高压制备液相色谱纯化，即可得到第三种甜菜红素，鸡冠花素II(celosianinII)；
(9)将所述馏分B2-C2通过高压制备液相色谱纯化，即可得到第四种甜菜红素，6’-O-丙二酰-鸡冠花素II(6'-O-malonyl-celosianinII)。


2.根据权利要求1所述的从盐地碱蓬中分离精制多种甜菜红素的方法，其特征在于，
所述步骤(2)中的中压制备液相色谱(AgilentTechnologies971-FPFlashPurificationSystem)，使用MPLC-C18柱(MPLCBuchiC620，色谱柱ODS(YamazenODS-C18500×80mm，40-60μm))，温度为室温，以0.1％(v/v)乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱，洗脱梯度为0％5min，0％-55％45min，100％20min；流速为100mL·min-1。


3.根据权利要求1所述的从盐地碱蓬中分离精制多种甜菜红素的方法，其特征在于，
所述凝胶色谱分离中使用的凝胶为SephadexLH-20羟丙基葡聚糖凝胶，采用50％甲醇(0.5％TFA)洗脱。


4.根据权利要求1所述的从盐地碱蓬中分离精制多种甜菜红素的方法，其特征在于，
所述步骤(4)中的中压制备液相色谱(AgilentTechnologies971-FPFlashPurificationSystem)，使用MPLC-C18柱(MPLCBuchiC620,...

【专利技术属性】
技术研发人员：白军红，王昕，王伟，张光亮，王大伟，贾佳，关亚楠，张玲，
申请(专利权)人：北京师范大学，
类型：发明
国别省市：北京;11