一种从他克莫司分离废液中回收子囊霉素、他克莫司8-丙基类似物的方法技术

本发明专利技术公开了一种从他克莫司分离废液中回收子囊霉素、他克莫司8‑丙基类似物的方法。该方法包括将他克莫司分离废液回收，他克莫司纯化废液中的组分主要为他克莫司、子囊霉素、他克莫司8丙基类似物，通过浓缩挂柱富集废液中的有效成分，银离子硅胶分离将他克莫司组分和子囊霉素、他克莫司8丙基类似物混合组分分离，再由反相填料将子囊霉素、他克莫司8丙基类似物混合组分进行精细纯化，得到高纯度的子囊霉素、他克莫司8‑丙基类似物的单体。本发明专利技术具有能够将他克莫司废液中的组分进行充分的回收利用，并且操作程序简单，方法稳定，重现性好的效果。

【技术实现步骤摘要】
一种从他克莫司分离废液中回收子囊霉素、他克莫司8-丙基类似物的方法
本专利技术涉及生物化学制药
，特别涉及一种从他克莫司分离废液中回收子囊霉素、他克莫司8-丙基类似物的方法。
技术介绍
他克莫司又名FK506，是从链霉菌属中分离出的发酵产物，其化学结构属23元大环内酯类抗生素。为一种强力的新型免疫抑制剂，主要通过抑制白介素-2(L-2)的释放，全面抑制T淋巴细胞的作用，较环孢素(CsA)强100倍。近年来、作为肝、肾移植的一线用药，已在美国、日本等多个国家上市。临床试验表明，其在心、肺、肠、骨髓等移植中有很好的疗效。他克莫司是一种新型强效的大环内酯类免疫抑制剂，1991日本开发的普乐可复他克莫司胶囊剂和注射剂正式上市，用于原发性肝移植和肾移植的排斥反应治疗，后又被批准用于骨髓乙酯。目前他克莫司制剂已在中国、日本、美国等多个国家上市，广泛应用于干燥、胰脏、肾脏、心脏、和肺等实体器官移植后的抗排异治疗。他克莫司通常从发酵液中分离提取得到。为了保证用药安全，在仿制药的研制和生产中，应当对药物杂质进行检测研究，从而提高药品质量，减少药物的不良反应。由于他克莫司的生产主要是通过发酵，会存在很多杂质，子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物就是其中最主要存在的杂质。目前，对采用发酵法制备他克莫司所制得的发酵液进行分离纯化，以及伴生杂质子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物的分离，是一个热门课题。在进行他克莫司的分离的时候，往往需要对色谱峰进行阶段性切割收集，切割之后的废液其中子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物的含量随之上升，废液也就再无他用，浪费了其中还存在的他克莫司有效组分，以及子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物。有鉴于此，有必要对现有技术中的废液进行处理回收，同时将子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物分离出来，以提高产品利用度和用药安全性。
技术实现思路
根据本专利技术的一个方面，提供了一种从他克莫司分离废液中回收子囊霉素、他克莫司8-丙基类似物的方法，步骤如下：S1，取他克莫司分离废液，浓缩后过大孔树脂富集，用醇或酮类溶剂解析，解析液浓缩后用酯类溶剂萃取；S2，萃取后酯溶液样品过银离子键合硅胶，流动相为醇类和酯类的混合溶液，收集子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物分离段，得到子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物混合组分回收液；S3，子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物混合组分回收液过反相C18填料进行制备纯化，流动相为乙腈水溶液，收集子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物各自的主峰段；S4，主峰段纯化液浓缩结晶，过滤，真空干燥，得到最终的杂质单体。在一些实施方式中，其步骤S1中，将含他克莫司的废液浓缩液，过HP20、SP207或D1300等大孔树脂，然后用溶剂将组分解析下来，将所得解析液真空浓缩，用酯类萃取浓缩液，将回收液处理成酯溶液。在一些实施方式中，其步骤S2中，酯相萃取液过银离子键合硅胶，流动相为甲醇或乙醇和乙酸乙酯的混合液，比例为甲醇/乙醇：乙酸乙酯＝40:60～60:40，收集子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物的混合段。在一些实施方式中，步骤S3中，所述流动相比例为40～70％的乙腈水溶液。在一些实施方式中，其步骤S4中，所述浓缩温度为30～60℃，结晶温度为0～5℃，干燥温度为30～50℃。在一些实施方式中，S1中溶剂为甲醇、乙醇或丙酮。在一些实施方式中，其步骤S2中，流动相流速为0.5～1.5BV/h。在一些实施方式中，步骤S3中，制备柱为100mm*250mm高压制备柱，流速为100～300ml/min。本专利技术的从他克莫司分离废液中回收子囊霉素、他克莫司8-丙基类似物的方法，其有益效果是，该方法能够将他克莫司废液中的组分进行充分的回收利用，并且操作程序简单，方法稳定，重现性好。附图说明图1他克莫司杂质分布分析图；图2他克莫司杂质银离子硅胶分离制备图；图3他克莫司杂质C18分离制备图；图4他克莫司杂质子囊霉素产品分析图；图5他克莫司杂质他克莫司8-丙基类似物产品分析图。具体实施方式下面结合实施例和附图对本专利技术作进一步详细的说明。实施例1取他克莫司分离后废液，浓缩后过HP20树脂富集，用乙醇解析，解析液浓缩后用乙酸乙酯萃取脱水。可见，附图1为他克莫司杂质分布分析图。脱水后酯溶液样品过银离子键合硅胶，流动相为甲醇：乙酸乙酯＝60:40，流速为0.5BV/h，收集杂质峰，得到子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物混合组分。可见，附图2为他克莫司杂质银离子硅胶分离制备图。将混合组分通过C18制备纯化，可见，附图3为他克莫司杂质C18分离制备图，制备柱为100mm*250mm高压制备柱，流动相为40％乙腈，流速为250ml/min，分别收集子囊霉素主峰和他克莫司8-丙基类似物主峰。将子囊霉素纯化液和他克莫司8-丙基类似物纯化液，各自在30℃浓缩，5℃冷却结晶，在30℃干燥，最终得子囊霉素1.2g，他克莫司8-丙基类似物2.1g。附图4,5分别为他克莫司杂质子囊霉素产品分析图和他克莫司杂质他克莫司8-丙基类似物产品分析图。实施例2取他克莫司分离后废液，浓缩后过sp207树脂富集，用甲醇解析，解析液浓缩后用乙酸丁酯萃取脱水。脱水后酯溶液样品过银离子键合硅胶，流动相为甲醇：乙酸乙酯＝50:50，流速为1BV/h，收集杂质峰，得到子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物混合组分。将混合组分通过C18制备纯化，制备柱为100mm*250mm高压制备柱，流动相为45％乙腈，流速为150ml/min，分别收集子囊霉素主峰和他克莫司8-丙基类似物主峰。将子囊霉素纯化液和他克莫司8-丙基类似物纯化液，各自在40℃浓缩，4℃冷却结晶，在40℃干燥，最终得子囊霉素1.3g，他克莫司8-丙基类似物2.3g。实施例3取他克莫司分离后废液，浓缩后过HP20树脂富集，用丙酮解析，解析液浓缩后用乙酸乙酯萃取脱水。脱水后酯溶液样品过银离子键合硅胶，流动相为甲醇：乙酸乙酯＝45:55，流速为1BV/h，收集杂质峰，得到子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物混合组分。将混合组分通过C18制备纯化，制备柱为100mm*250mm高压制备柱，流动相为60％乙腈，流速为100ml/min，分别收集子囊霉素主峰和他克莫司8-丙基类似物主峰。将子囊霉素纯化液和他克莫司8-丙基类似物纯化液，各自在40℃浓缩，5℃冷却结晶，在35℃干燥，最终得子囊霉素1.1g，他克莫司8-丙基类似物2.4g。实施例4取他克莫司分离后废液，浓缩后过D1300树脂富集，用乙醇解析，解析液浓缩后用乙酸丁酯萃取脱水。脱水后酯溶液样品过银离子键合硅胶，流动相为甲醇：乙酸乙酯＝55:45，流速为0.5BV/h，收集杂质峰，得到子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物混合组分。将混合组分通本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从他克莫司分离废液中回收子囊霉素、他克莫司8-丙基类似物的方法，其特征在于，步骤如下：/nS1，取他克莫司分离废液，浓缩后过大孔树脂富集，用醇或酮类溶剂解析，解析液浓缩后用酯类溶剂萃取；/nS2，萃取后酯溶液样品过银离子键合硅胶，流动相为醇类和酯类的混合溶液，收集子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物分离段，得到子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物混合组分回收液；/nS3，子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物混合组分回收液过反相C18填料进行制备纯化，流动相为乙腈水溶液，收集子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物各自的主峰段；/nS4，主峰段纯化液浓缩结晶，过滤，真空干燥，得到最终的杂质单体。/n

【技术特征摘要】
1.一种从他克莫司分离废液中回收子囊霉素、他克莫司8-丙基类似物的方法，其特征在于，步骤如下：
S1，取他克莫司分离废液，浓缩后过大孔树脂富集，用醇或酮类溶剂解析，解析液浓缩后用酯类溶剂萃取；
S2，萃取后酯溶液样品过银离子键合硅胶，流动相为醇类和酯类的混合溶液，收集子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物分离段，得到子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物混合组分回收液；
S3，子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物混合组分回收液过反相C18填料进行制备纯化，流动相为乙腈水溶液，收集子囊霉素和他克莫司8-丙基类似物各自的主峰段；
S4，主峰段纯化液浓缩结晶，过滤，真空干燥，得到最终的杂质单体。


2.根据权利要求1所述的从他克莫司分离废液中回收子囊霉素、他克莫司8-丙基类似物的方法，其特征在于，其步骤S1中，将含他克莫司的废液浓缩液，过HP20、SP207或D1300等大孔树脂，然后用溶剂将组分解析下来，将所得解析液真空浓缩，用酯类萃取浓缩液，将回收液处理成酯溶液。


3.根据权利要求2所述的从他克莫司分离废液中回收子囊霉素、他克莫司8-丙基类似物的方法，其特征在于，其步骤S2中，酯相萃取液过银离子键合硅胶...

【专利技术属性】
技术研发人员：游云龙，付静，吴东奇，李明青，金丹甜，
申请(专利权)人：卓和药业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32