一种酿酒酵母用于娃娃菜采后病害控制及贮藏保鲜的用途制造技术

本发明专利技术属于果蔬采后病害生物防治领域，涉及一种酿酒酵母用于娃娃菜采后病害控制及贮藏保鲜的用途；其中控制采后病害的步骤为：选取娃娃菜的菜叶，消毒晾干后用清水冲洗，再放入无菌的塑料筐内，晾干后在菜叶叶片表面均匀喷洒酵母菌悬液，静置后，再喷洒细极链格孢菌孢子悬浮液，自然晾干、保鲜膜密封，实现对娃娃菜黑斑病的控制；用于贮藏保鲜的用途，步骤为：将娃娃菜置于消毒塑料筐中，表面均匀喷洒酵母菌悬液，自然晾干后，用保鲜膜密封，于20℃下存放，即可实现对采后娃娃菜病害的防治及贮藏保鲜；本发明专利技术安全环保，不仅有效控制采后黑斑病，而且在一定程度上减缓娃娃菜品质的下降，代替化学杀菌剂防治娃娃菜采后病害，具有潜在的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种酿酒酵母用于娃娃菜采后病害控制及贮藏保鲜的用途
本专利技术属于果蔬采后病害生物防治领域，具体涉及一种酿酒酵母用于娃娃菜采后病害控制及贮藏保鲜的用途。
技术介绍
娃娃菜，是一种袖珍型小株白菜，属十字花科芸薹属白菜亚种，为半耐寒性蔬菜。娃娃菜质地脆嫩、营养丰富、物美价廉、可食率高，是一种深受欢迎的蔬菜品种，具有极高的市场价值。娃娃菜富含丰富的B族维生素、维生素C、胡萝卜素、叶酸，以及钙、磷、铁等微量元素，且叶绿素含量较高。娃娃菜有助于胃肠蠕动，促进排便、解渴利尿。娃娃菜可抑制亚硝酸盐的吸收，减少乳腺癌的发生，有防癌抗癌等作用。采后娃娃菜呼吸代谢旺盛，且在贮运和销售过程中容易受到病原菌侵染而产生黑斑甚至腐烂等现象，导致其品质下降，失去食用价值。在娃娃菜的采后病害中，由链格孢属真菌引起的黑斑病是最常见且发病率最高的真菌性病害之一。病害在田间和贮藏期大量发生，造成严重的经济损失。因此，采取合适的方法防治娃娃菜采后病害是如今亟待解决的问题。目前，果蔬采后病害的控制方法主要有物理防治、化学防治和生物防治三种方法。物理方法的优点是安全无害，对人体及自然环境无不良影响，但对设备的要求往往较高，控制效果有局限性，如有些致病菌耐低温，低温下仍可生长，造成果蔬腐败，且可能造成冷害。化学杀菌剂因其高效、低价、使用方便的优点，是现今使用仍最为广泛、且最为常见的一种防治方法。但由于长期使用化学杀菌剂会导致病原菌产生抗药性，降低化学药剂的杀菌效果，且在使用过程中会对环境造成污染，并且在果蔬上存在农药残留，处理不当会在食用时还对人类健康造成危害。因而，生物防治法成为目前果蔬采后病害防控研究的热点。生物防治是采用微生物菌株，通过浸泡或喷洒等方式处理果蔬，以防治和控制果蔬采后病害的保鲜方法。目前，已经研究的可作为果蔬采后病害拮抗菌的微生物包括：细菌、霉菌和酵母菌等。其中的酵母菌因其遗传稳定，抑菌谱广，并且具有较强的抗逆能力，在防治过程能够迅速的适应果蔬表面的环境进行定殖并快速生长繁殖，同病原菌竞争营养和空间，而具有广泛的应用前景。拮抗酵母菌已在苹果、柑橘、番茄、葡萄和草莓等水果上广泛应用，并取得了很好的效果。如海洋拮抗酵母(RhodosporidiumpaludigenumFell&Tallman)可抑制梨果实采后的青霉病；美极梅奇酵母(Metschnikowiapulcherrima)S4-1可抑制草莓腐败病；罗伦隐球酵母(Cryptococcuslauentii)可显著增强番茄果实对灰霉病(病原菌为灰葡萄孢Botrytiscinerea)和黑霉病(病原菌为链格孢霉Alternariaalternata)的抗性等。但目前还没有针对娃娃菜采后黑斑病病害防治的酵母菌。
技术实现思路
针对现有技术的缺陷与不足，本专利技术提供一种酿酒酵母用于娃娃菜采后病害控制及贮藏保鲜的用途；本专利技术中的酿酒酵母(CGMCCNo.7129)Y-912经急性动物试验证明为一种安全的酵母；研究结果表明，酿酒酵母能显著降低娃娃菜在贮藏过程中黑斑病病情指数，有效控制娃娃菜采后黑斑病和自然腐烂的发生，延缓其生理品质的下降，从而达到娃娃菜贮藏保鲜的目的；减少娃娃菜采后病害造成的损失，具有潜在的应用价值。为了实现以上目的，本专利技术采用的技术方案如下：本专利技术所提供的防治娃娃菜采后病害的酿酒酵母Y-912，已于2012年保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为：CGMCCNo.7129；此外，本专利技术所利用的菌株申请人已经获批中国专利技术专利，专利号ZL201310648466.8，专利技术名称为：酿酒酵母、在水果采后病害防治的应用及使用方法。1.酿酒酵母Y-912用于娃娃菜采后病害控制的用途，按照下述步骤进行：首先，本专利技术的酿酒酵母Y-912用于控制娃娃菜采后黑斑病，具体步骤为：选取新鲜的娃娃菜，去除外层后，选取健康无黑斑、大小、颜色一致的菜叶，消毒后用清水将其冲洗干净，放入无菌的塑料筐内晾干；晾干后的菜叶表面均匀喷洒1.0×108cells/mL的酵母菌悬液，静置1～2h后，再喷洒细极链格孢菌孢子悬浮液(1×106spores/mL)；待娃娃菜自然晾干后，用保鲜膜密封，置于恒温培养箱中贮藏；结果表明，酿酒酵母Y-912对娃娃菜黑斑病具有良好的控制效果。所述消毒是用0.02％的次氯酸钠溶液将整片浸泡1～2min；所述恒温培养箱的温度为20℃，相对湿度为90％。2.酿酒酵母Y-912用于娃娃菜贮藏保鲜的用途，按照下述步骤进行：(1)首先将酿酒酵母Y-912接种在NYDA培养基上、28℃培养24h进行活化；然后，转接入NYDB培养基中，在28～30℃培养20～24h；活化后的酵母培养液经离心收集菌体，用无菌生理盐水洗涤数次后，重新用无菌生理盐水配置成1.0×108cells/mL的菌悬液；(2)控制娃娃菜自然腐烂：选取新鲜的娃娃菜，不做消毒处理，保持娃娃菜的自然状态；将娃娃菜菜叶置于消毒塑料筐中，将1.0×108cells/mL的酵母菌悬液喷洒于娃娃菜表面，使其均匀覆盖；晾干后进行密封，置于相对湿度为90％、温度为20℃的恒温培养箱中贮藏，即可实现采后娃娃菜的贮藏保鲜。优选的，所述离心的转速为7000r/min，时间为15min。优选的，所述的NYDA培养基成分如下：牛肉膏8g，酵母浸出物5g，葡萄糖10g，琼脂20g，115℃湿热灭菌20min。优选的，所述的NYDB培养基成分如下：牛肉膏8g，酵母浸出物5g，葡萄糖10g，蒸馏水1000mL，pH自然，115℃湿热灭菌20min。优选的，所述接种在NYDB培养基中的接种量为1～2％。优选的，所述用无菌生理盐水洗涤数次具体为2～3次。优选的，所述密封时采用保鲜膜进行密封。本专利技术的优点：(1)本专利技术所使用的酿酒酵母Y-912经动物急性毒性试验确认其安全无毒，对人体健康无危害。(2)本专利技术所使用的酿酒酵母Y-912可以有效控制娃娃菜采后黑斑病和自然腐烂，从而降低娃娃菜采后病害所造成的损失。(3)本专利技术所使用的酿酒酵母Y-912对采后娃娃菜主要品质指标：维生素C和有机酸含量无显著不良影响，且可以减缓维生素C含量和失重率的降低以及有机酸含量的增加，从而控制娃娃菜品质下降。(4)本专利技术所使用的酿酒酵母Y-912目前尚未有在娃娃菜采后病害防治上应用的报道，具有独创性。本专利技术使用酿酒酵母Y-912，既可以代替化学杀菌剂防治娃娃菜采后病害，减少化学杀菌剂对人体及环境的潜在危害，亦可减少使用物理方法贮藏保鲜时所产生的经济和能源负担，具有显著的经济效益和社会效益。附图说明图1为不同酵母菌对细极链格孢菌的体外抑制作用。注：CK为无菌生理盐水处理组，即对照组；S.cerevisiae为1×108cells/mL酿酒酵母Y-912菌悬液处理组；S.pararoseus为1×108cells/mL拟粉红锁掷孢酵母菌悬液处理组；所用细极链格孢菌孢子悬浮液浓度均为5×104spores本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)Y-912，保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为：CGMCC No.7129。/n

【技术特征摘要】
1.酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)Y-912，保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为：CGMCCNo.7129。


2.根据权利要求1所述的酿酒酵母Y-912用于娃娃菜采后病害的控制及贮藏保鲜的用途。


3.根据权利要求2所述酿酒酵母Y-912用于娃娃菜采后病害控制的用途，其特征在于，具体步骤如下：选取新鲜的娃娃菜，去除外层后，取健康无黑斑、大小、颜色一致的菜叶，消毒后用清水将其冲洗干净，放入无菌的塑料筐内晾干；晾干后在菜叶表面均匀喷洒1.0×108cells/mL的酿酒酵母Y-912菌悬液，静置1～2h后，再喷洒浓度为1×106spores/mL细极链格孢菌孢子悬浮液；待娃娃菜自然晾干后，用保鲜膜密封，置于恒温培养箱中贮藏，实现酿酒酵母Y-912对娃娃菜黑斑病的控制。


4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述消毒是用0.02％的次氯酸钠溶液将整片浸泡1～2min；所述恒温培养箱的温度为20℃，相对湿度为90％。


5.根据权利要求2所述的酿...

【专利技术属性】
技术研发人员：张红印，张晓云，孙露，王子洋，李鹏霞，张雷刚，赵利娜，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32