细胞外电位测量装置及其制造方法制造方法及图纸

测量被检体细胞的细胞外电位的装置包含：形成第１捕集孔的基板，该基板具有在第１面上形成有底面的凹槽、朝向第２面从凹槽底面形成的第１开口部；通过第１连接部与第１开口部连接的第１空洞部；到达通过第２连接部与第１空洞部连接的第２面的第２开口部，第１连接部直径比第１空洞部的最大直径小，比第２连接部的直径大，而且比被检体细胞的直径小，该装置可以可靠地保持被检体细胞，容易投入药液和被检体细胞。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及以活体试样，尤其是细胞发生的电化学变化作为指标，简易、高速地进行电生理学评价的。
技术介绍
目前以细胞的电气活动作为指标，将药品用碎片夹持(patch clamp)法，或使用荧光色素或发光指示药的方法进行筛选(screening)。该碎片夹持法通过微小电极探头电记录在微吸管前端部分上附着的称为细胞膜的碎片(patch)的微小部分的、经单一通道蛋白质分子的离子输送。该方法是可以通过实时调查一个蛋白质分子功能的少数方法之一(例如“Molecular Biology of the cell Third Edition”、Garlandpublishing Inc.，New York，1994、Bruce Alberts外，还可参照日语版“细胞の分子生物学 第三版”181～182页，1995年，教育社)。此外，根据特定的离子浓度变化，通过发光的萤光色素或发光指示剂，监控细胞内的离子移动，可以测量细胞的电气活动。可是，碎片夹持法在微吸管制作或操作方面需要特殊的技术，因为在一种试样的测定中需要许多时间，所以不适合高速地筛选大量药品候选化合物。此外，利用萤光色素等方法可以高速地筛选大量药品候选化合物，然而，对细胞染色的工序是必要的，在测定中，通过色素的影响也会使背景变色，而且由于随时间而脱色，所以S/N也差。
技术实现思路
测量被检体细胞的细胞外电位的装置具备在第1面上形成有底面的凹槽且形成有第1捕集孔的基板，该第1捕集孔具有向着第2面从所述凹槽的所述底面形成的第1开口部；通过第1连接部与所述第1开口部连接的第1空洞部；通过第2连接部与所述第1空洞部连接的、到达所述第2面的第2开口部，所述第1连接部的直径比所述第1空洞部的最大直径小，比所述第2连接部的直径大，而且比所述被检体细胞的直径小。该装置可以可靠地保持被检体细胞，容易投入药液和被检体细胞。附图说明图1是本专利技术实施方式1的细胞外电位测量用装置的立体图。图2是本专利技术实施方式1的细胞外电位测量用装置的截面图。图3是本专利技术实施方式1的细胞外电位测量用装置的截面放大图。图4是示出实施方式1的细胞外电位测量用装置的使用方法的截面图。图5是实施方式1的细胞外电位测量用装置的放大截面图。图6是实施方式1的细胞外电位测量用装置的放大截面图。图7是实施方式1的细胞外电位测量用装置的放大截面图。图8是实施方式1的细胞外电位测量用装置的放大截面图。图9是实施方式1的细胞外电位测量用装置的放大截面图。图10是示出实施方式1的细胞外电位测量用装置的制造方法的截面图。图11是示出实施方式1的细胞外电位测量用装置的制造方法的截面图。图12是示出实施方式1的细胞外电位测量用装置的制造方法的截面图。图13是示出实施方式1的细胞外电位测量用装置的制造方法的放大截面图。图14是示出实施方式1的细胞外电位测量用装置的制造方法的放大截面图。图15是示出实施方式1的细胞外电位测量用装置的制造方法的放大截面图。图16是示出实施方式1的细胞外电位测量用装置的制造方法的放大截面图。图17是示出实施方式1的细胞外电位测量用装置的制造方法的放大截面图。图18是示出实施方式1的细胞外电位测量用装置的制造方法的放大截面图。图19是示出实施方式1的细胞外电位测量用装置的制造方法的放大截面图。图20是示出实施方式1的细胞外电位测量用装置的其它制造方法的放大截面图。图21是示出实施方式1的细胞外电位测量用装置的其它制造方法的放大截面图。图22是示出实施方式1的细胞外电位测量用装置的其它制造方法的放大截面图。图23是本专利技术实施方式2的细胞外电位测量用装置的立体图。图24是实施方式2的细胞外电位测量用装置的截面图。图25是实施方式2的细胞外电位测量用装置的放大截面图。图26是示出实施方式2的细胞外电位测量用装置的制造方法的截面图。图27是示出实施方式2的细胞外电位测量用装置的制造方法的放大截面图。图28是示出实施方式2的细胞外电位测量用装置的制造方法的放大截面图。图29是实施方式1的其它细胞外电位测量装置的截面图。图30是本专利技术的实施方式3的细胞外电位测量装置的立体图。图31A是实施方式3的细胞外电位测量装置的截面图。图31B是实施方式3的细胞外电位测量装置的放大截面图。图32是示出实施方式3的细胞外电位测量装置的动作的截面图。图33是实施方式3的细胞外电位测量装置的放大截面图。图34是实施方式3的细胞外电位测量装置的放大截面图。图35是示出实施方式3的细胞外电位测量装置的制造方法的截面图。图36是示出实施方式3的细胞外电位测量装置的制造方法的放大截面图。图37是示出实施方式3的细胞外电位测量装置的制造方法的放大截面图。图38是示出实施方式3的细胞外电位测量装置的制造方法的截面图。图39是示出实施方式3的细胞外电位测量装置的制造方法的截面图。图40是示出实施方式3的细胞外电位测量装置的制造方法的截面图。图41是示出实施方式3的细胞外电位测量装置的制造方法的截面图。图42是示出实施方式3的细胞外电位测量装置的制造方法的截面图。图43是本专利技术的实施方式4的细胞外电位测量装置的截面图。图44是示出实施方式4的细胞外电位测量装置制造方法的放大截面图。图45是示出实施方式4的细胞外电位测量装置制造方法的放大截面图。图46是示出本专利技术的实施方式5的细胞外电位测量装置制造方法的放大截面图。图47是示出本专利技术的实施方式5的细胞外电位测量装置制造方法的放大截面图。图48是示出本专利技术的实施方式5的细胞外电位测量装置制造方法的放大截面图。具体实施例方式(实施方式1)图1是本专利技术实施方式1的细胞外电位测定装置的立体图，图2是其截面图，图3是其截面放大图。该细胞外电位测量装置包含设置凹槽2的、由硅构成的基板1。在凹槽2的底面3上设置多个细胞捕集孔101，各捕集孔101通过在一直线上按顺序连接的第1开口部4、空洞部6、第2开口部5构成。第1开口部4的直径比空洞部6的最大直径小，比第2开口部5的直径大。这些具体的尺寸根据被检体细胞的大小最适合地决定。例如，在25微米直径的被检体细胞中，第1开口部4的直径为比25微米小的20微米，空洞部6的最大直径为比被检体细胞大的35微米，第2开口部5的直径设定在比被检体细胞小的10微米左右。通常，因为被检体细胞直径为数微米～数十微米，所以第1开口部4的直径取10～50微米，第2开口部5的直径取1～5微米左右，根据这些，希望空洞部6的最大直径在10～100微米之间作为最佳值。如图3所示，在至少第2开口部5的内壁面和空洞部6的下方形成由金属构成的检测电极7。在基板1的下面设置由金属构成的引出电极8。检测电极7和引出电极8在第2开口部5上电连接。因为在空洞部6的上方没有设置导体，所以检测电极7与凹槽2电绝缘。下面对该细胞外电位测量用装置的使用方法加以说明。图4是把被检体细胞9和培养液10投入凹槽2内的细胞外电位测定用装置的截面图。图5～图9是第1开口部4、第2开口部5、空洞部6的放大截面图。如图4及图5所示，在把培养液10和被检体细胞9放入凹槽2内的当初，被检体细胞9浮游在培养液10中。培养液10不仅在凹槽2内，而且在第1开口部4、空洞部6、第2开口部5满了之后，也流出到第2开口部5侧。在该状态下，浮游本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于测量被检体细胞的细胞外电位装置，其特征在于，具备在第１面上形成有底面的凹槽且形成有第１捕集孔的基板，该第１捕集孔具有向着第２面从所述凹槽的所述底面形成的第１开口部；通过第１连接部与所述第１开口部连接的第１空洞部；通过第２连接部与所述第１空洞部连接的、到达所述第２面的第２开口部，所述第１连接部的直径比所述第１空洞部的最大直径小，比所述第２连接部的直径大，而且比所述被检体细胞的直径小。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：中谷将也，冈弘章，江本文昭，
申请(专利权)人：松下电器产业株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]