一种测定柏子仁中黄曲霉毒素含量的方法技术

本发明专利技术属于黄曲霉毒素含量检测技术领域，具体涉及一种测定柏子仁中黄曲霉毒素含量的方法，基于IAC‑HPLC‑MS/MS法，将柏子仁样品液氮研磨后进行提取，净化洗脱后采用特定的色谱条件进行测定，本发明专利技术经方法学验证，灵敏度高，重现性好，实现了柏子仁中四种黄曲霉毒素AFB

【技术实现步骤摘要】
一种测定柏子仁中黄曲霉毒素含量的方法
本专利技术属于黄曲霉毒素含量检测
，具体涉及一种测定柏子仁中黄曲霉毒素含量的方法。
技术介绍
黄曲霉毒素(AFs)是由黄曲霉菌和寄生曲霉菌相互作用产生的一类次级代谢产物，主要包括黄曲霉毒素B1(AFB1)、黄曲霉毒素B2(AFB2)、黄曲霉毒素G1(AFG1)、黄曲霉毒素G2(AFG2)、黄曲霉毒素M1(AFM1)和黄曲霉毒素M2(AFM2)。AFM1和AFM2主要存在于动物和乳制品中。中药材中主要含有AFB1，AFB2，AFG1和AFG2。其中，AFB1具有最强的致癌性和毒性，而毒性尤为显着，是三氧化二砷的68倍，氰化钾的10倍，甚至三聚氰胺的416倍。它很容易对人和动物的肝脏组织造成损害，在严重的情况下甚至会导致肝癌甚至死亡。此外，暴露于较高浓度的黄曲霉毒素中可导致急性黄疸，肝衰竭和死亡。2002年，AFB1被国际癌症研究机构(IARC)列为I类强致癌物。从中药材的种植、收获、晾晒到加工、储藏、运输环节，若条件控制不好，容易滋生霉菌，甚至产生黄曲霉毒素，一些药材如柏子仁、酸枣仁等含丰富油脂，污染现本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定柏子仁中黄曲霉毒素含量的方法，其特征在于，基于IAC-HPLC-MS/MS法，其具体步骤为：/n(1)样品提取，取柏子仁样品，液氮研磨后，提取、稀释、过滤、收集上清液；/n(2)净化洗脱，取上清液注入免疫亲和柱中；待液体排干后，用水洗涤，弃去全部洗脱液；待液体排干后，加入甲醇，收集洗脱液并定容；洗脱液用滤膜过滤后转移至液相小瓶中作为待测样品备用；/n(3)建立标准曲线，将黄曲霉毒素混标对照品用甲醇稀释成不同浓度的黄曲霉毒素混标溶液，过滤，利用HPLC-MS/MS法进行测定，以峰面积为纵坐标，以四种黄曲霉毒素质量浓度为横坐标建立标准曲线，计算线性方程；/n(4)测定待测样品，将各化合...

【技术特征摘要】
1.一种测定柏子仁中黄曲霉毒素含量的方法，其特征在于，基于IAC-HPLC-MS/MS法，其具体步骤为：
(1)样品提取，取柏子仁样品，液氮研磨后，提取、稀释、过滤、收集上清液；
(2)净化洗脱，取上清液注入免疫亲和柱中；待液体排干后，用水洗涤，弃去全部洗脱液；待液体排干后，加入甲醇，收集洗脱液并定容；洗脱液用滤膜过滤后转移至液相小瓶中作为待测样品备用；
(3)建立标准曲线，将黄曲霉毒素混标对照品用甲醇稀释成不同浓度的黄曲霉毒素混标溶液，过滤，利用HPLC-MS/MS法进行测定，以峰面积为纵坐标，以四种黄曲霉毒素质量浓度为横坐标建立标准曲线，计算线性方程；
(4)测定待测样品，将各化合物峰面积代入相应标准曲线，计算样品浓度；
所述的黄曲霉毒素为AFB1、AFG1、AFB2和AFG2；
所述的色谱条件为：色谱柱：HALO90AC18色谱柱，2.1×100mm，2.7um；流动相：A相为含0.1％的甲酸水溶液，B相为甲醇；柱温：40℃，进样量：3ul，流速：0.25ml·min-1；梯度洗脱程序如下：0.00-6.00min，62％-30％A，6.00-6.20min，30％-0％A；6.20-10.00min，0.00％A；
所述的质谱条件为：离子源：电喷雾离子源(ESI)，扫描类型：正离子扫描，扫描模式：多反应监测模式(MRM)，干...

【专利技术属性】
技术研发人员：张永清，刘震营，王玲娜，蒲高斌，张龙霏，刘谦，李佳，
申请(专利权)人：山东中医药大学，
类型：发明
国别省市：山东;37