一种LC-MS法测定植物样本中微量赤霉素的方法技术

本发明专利技术涉及植物激素测定技术领域，具体涉及一种LC‑MS法测定植物样本中微量赤霉素的方法，包括以下步骤：样品经过液氮处理后，加入同位素内标液和提取液，得到样本提取液，向样本提取液中加入活化试剂和衍生化试剂进行衍生，衍生结束后复溶，制备待测液；然后在特定的色谱条件和质谱条件下采用LC‑MS检测分析，检测方法简单、高效、准确，可在15min内实现11种赤霉素化合物的测定。

【技术实现步骤摘要】
一种LC-MS法测定植物样本中微量赤霉素的方法
本专利技术涉及植物激素测定
，具体涉及一种LC-MS法测定植物样本中微量赤霉素的方法。
技术介绍
赤霉素(gibberellins，GAs)是一类非常重要的植物激素，在植物体内广泛存在，对种子萌发、叶片伸展、茎和根的伸长、花和果实的发育等方面均起到了重要的调控作用。近年来，关于赤霉素的生理学研究受到广泛关注。但是，一方面，赤霉素作为一种内源性激素，在植物体内含量极低，且在不同器官中含量波动较大，使得多种赤霉素的同时定量检测受到限制；另一方面，现发现的赤霉素均为二萜酸，具有相似的化学结构，均含有四个环，仅环上双键和羟基位置和数量不同，如果将赤霉素提取液直接进行LC-MS检测，其离子化效率低，导致其在质谱上的响应信号低，这就会导致许多低含量的赤霉素检测不到。
技术实现思路
基于此，本专利技术的目的在于提供一种简单、高效、准确的赤霉素检测方法，该检测方法可在15min内实现11种赤霉素化合物的测定。本专利技术通过以下技术方案来实现上述技术目的：>一种LC-MS法测本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种LC-MS法测定植物样本中微量赤霉素的方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1，样品预处理：称取液氮研磨得到的植物样本粉末，加入赤霉素的同位素内标液，然后加入提取液提取，得到样本提取液；向样本提取液中加入活化试剂与衍生化试剂进行衍生；衍生结束，经氮吹或冻干后用复溶溶液进行复溶，配制成待测液；/nS2，配制一系列不同浓度的赤霉素混标溶液，并加入赤霉素同位素的内标、活化试剂和衍生试剂进行衍生，衍生结束，经氮吹或冻干后用复溶溶液进行复溶，配制成待测液；/nS3，高效液相色谱-质谱分析：将步骤S1和S2中的待测液进行上机检测分析；/n其中，/n高效液相色谱条件：流动相A为含有体积百分比为0.0...

【技术特征摘要】
1.一种LC-MS法测定植物样本中微量赤霉素的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1，样品预处理：称取液氮研磨得到的植物样本粉末，加入赤霉素的同位素内标液，然后加入提取液提取，得到样本提取液；向样本提取液中加入活化试剂与衍生化试剂进行衍生；衍生结束，经氮吹或冻干后用复溶溶液进行复溶，配制成待测液；
S2，配制一系列不同浓度的赤霉素混标溶液，并加入赤霉素同位素的内标、活化试剂和衍生试剂进行衍生，衍生结束，经氮吹或冻干后用复溶溶液进行复溶，配制成待测液；
S3，高效液相色谱-质谱分析：将步骤S1和S2中的待测液进行上机检测分析；
其中，
高效液相色谱条件：流动相A为含有体积百分比为0.01～5％的乙酸的乙酸-水溶液，流动相B为含有体积百分比为0.01％～5％的乙酸的乙酸乙腈溶液，采用梯度洗脱方式；
质谱条件：正离子模式和MRM模式；
S4，根据步骤S2中混标的检测结果得到各标品的线性回归方程，将步骤S1中样品的检测结果代入到线性回归方程中计算得到样本中各赤霉素的含量；
步骤S1和S2中所述活化试剂为碱催化剂，所述衍生化试剂为带有季铵基团与卤元素的化学试剂；步骤S1中所用活化试剂与提取液的体积比为(0.5～5)：100；步骤S1中所用衍生化试剂与提取液的体积比为(0.5～5)：100。


2.根据权利要求1所述的LC-MS法测定植物样本中微量赤霉素的方法，其特征在于，所述活化试剂为三乙醇胺，所述衍生化试剂为3-溴丙基三甲基溴化铵。


3.根据权利要求1所述的LC-MS法测...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭焕芹，张永明，唐堂，
申请(专利权)人：武汉迈特维尔生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42