一种对羟基磷灰石进行荧光标记的方法技术

本发明专利技术公开了一种对羟基磷灰石进行荧光标记的方法。该方法是将生物荧光素－异硫氰酸荧光素通过吸附或共价键等方法连接到羟基磷灰石颗粒上，使羟基磷灰石颗粒被标记上荧光。本发明专利技术采用的标记物异硫氰酸荧光素，是一种生物荧光素，具有较好的生物相容性；经过长时间反应和充分洗涤之后，异硫氰酸荧光素可以与羟基磷灰石颗粒实现牢固结合，使用过程中不会从羟基磷灰石表面脱离下来对试验结果造成负面影响；所得到的荧光物质吸收峰范围较窄，为４８０～５１０纳米之间，适用于多种荧光同时存在的环境中。本发明专利技术可应用于材料和生物医学研究领域，尤其适用于羟基磷灰石颗粒与细胞相互作用时的界面、过程及机理研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
自然界中，脊椎动物硬组织的主要生物矿物相是羟基磷灰石。研究发现， 人工合成的羟基磷灰石具有与矿物相羟基磷灰石相同的成分、结构和优秀的生 物相容性，因此被认为是最理想的骨组织修复替代材料之一，在临床上已被广 泛用于骨组织缺失和缺损的修复和替代。近年来，随着分析检测方法和技术的飞速发展，人们发现构成人体硬组织 的羟基磷灰石颗粒的基本构成单元都保持在纳米尺度一有序的羟基磷灰石颗粒镶嵌在胶原蛋白中，赋予了骨组织优秀的生物学和力学性能"Gao H., Ji B.， Jager I. L., Arzt E.， Fratz P., PNAS， 2003,100, 5597; Curry J . D., Proc. R. Soc. Lond. B,1997,196 , 443"。生物矿化及仿生材料研究使得人们将目标转向了纳米羟基磷 灰石。目前认为人体内钙化过程是在正确时间、正确地点，生成和维持正确量 和正确结构的矿化产物"王夔，化学通报，2003， 15， 428 ;杨晓达，张天蓝， 王夔，化学进展，2004， 16， 836"，在此过程中，细胞和有机基质起到了重要 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种对羟基磷灰石进行荧光标记的方法，其特征在于：配制重量百分比为１．５～３％的重碳酸钠缓冲溶液，将异硫氰酸荧光素溶解在该缓冲溶液中，控制异硫氰酸荧光素在缓冲溶液中的浓度为０．０２～０．１克每升；再将羟基磷灰石颗粒分散在上述溶液中，颗粒浓度为０．５～１．５克每升，搅拌０．５～２小时；利用羟基磷灰石的强吸附作用将异硫氰酸荧光素吸附到颗粒表面，再将该悬浊液避光环境保存在１～８℃下继续作用１０～２０小时后，通过离心、透析和过滤作用除去颗粒表面未吸附的荧光素；将标记好的羟基磷灰石颗粒在３５～４５℃避光环境中真空干燥，得到干燥的荧光标记的羟基磷灰石颗粒。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡玉荣，姚菊明，李恭楚，王秀华，
申请(专利权)人：浙江理工大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]