定量检测BST1、STAB1和TLR4基因表达水平的方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种定量检测BST1、STAB1和TLR4基因表达水平的方法及应用，具体涉及BST1、STAB1和TLR4基因在诊断早期肺癌试剂中的应用。肺癌是绝大多数国家主要的癌症死亡原因,早期诊断和早期治疗尤为重要。本发明专利技术为了根据肺癌的发生和发展机制，将与肺癌相互作用的T细胞作为研究对象，为肺癌的诊断提供全新视角。首先拟通过转录组测序技术检测早期肺癌病人、正常人外周血经分选后获得CD8+PD‑1+T细胞中差异表达基因；其次通过转录组微量建库和RT‑qPCR技术对测序结果进行验证；再次扩大样本量，确定CD8+PD‑1+T细胞中差异性表达的基因谱，为肺癌的早期诊断提供新的标志物。

【技术实现步骤摘要】
定量检测BST1、STAB1和TLR4基因表达水平的方法及应用
本专利技术涉及基因诊断
，具体涉及一组表达于肿瘤相互作用T细胞的基因谱在早期肺癌诊断试剂中的应用，更具体涉及转录组微量建库实现检测极少量CD8+PD-1+T细胞中差异性表达基因，将该基因谱BST1、STAB1和TLR4应用于开发诊断早期肺癌的检测试剂。
技术介绍
2018年国际癌症研究机构公布的最新全球癌症评估报告显示，肺癌是世界上发病率和死亡率都位居前列的恶性肿瘤之一。我国国家癌症中心2017年的统计数据同样显示肺癌是高居癌症发病率和死亡率之首。目前，早期患者通过手术切除，并辅助以化疗，效果良好；但对晚期已转移的患者尚缺乏有效的治疗手段，且预后差。因此，亟待寻找早期诊断肺癌病变的手段以减少肺癌发病率和死亡率，如何将分子生物学的技术用于肺癌早期诊断，提高早期肺癌的检出率是当前研究的热点之一。近年来研究，对细胞程序性死亡受体1(PD-1；也称为CD279)及其配体PD-L1(B7-H1或CD274)通路在肿瘤免疫逃逸的作用有了深入理解，在肺癌外周血的T细胞也有PD-1/本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种定量检测CD8+PD-1+T细胞中BST1、STAB1和TLR4基因表达水平的方法，其特征在于，包括：提取分离离体的外周血样本，通过流式分选得到CD8+PD-1+T细胞，采用荧光定量PCR方法检测检测CD8+PD-1+T细胞中BST1、STAB1和TLR4基因的表达水平。/n

【技术特征摘要】
1.一种定量检测CD8+PD-1+T细胞中BST1、STAB1和TLR4基因表达水平的方法，其特征在于，包括：提取分离离体的外周血样本，通过流式分选得到CD8+PD-1+T细胞，采用荧光定量PCR方法检测检测CD8+PD-1+T细胞中BST1、STAB1和TLR4基因的表达水平。


2.根据权利要求1所述的定量检测CD8+PD-1+T细胞中BST1、STAB1和TLR4基因表达水平的方法，其特征在于，所述的荧光定量PCR方法检测BST1、STAB1和TLR4基因的CDS区域，含有三对特异性扩增的引物：
所述的BST1基因的引物上游引物序列为TGGGAAAATAGCCACCTCCT，下游引物序列为CCCTGCCATACAGAACATCG；
所述的STAB1基因的引物上游引物序列为CAACATTAGTGGGAGGGTCTGG，下游引物序列为GGGCACAAAGATGGTGTAGGC；
所述的TLR4基因的引物上游引物序列为AGACCTGTCCCTGAACCCTATG...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴式琇，
申请(专利权)人：吴式琇，
类型：发明
国别省市：广东;44