一种IL7-Fc-GMCSF融合蛋白及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种IL7‑Fc‑GMCSF融合蛋白及其应用，所述融合蛋白为二聚体蛋白，包括二聚化的第一条多肽链和第二条多肽链，第一条多肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，第二条多肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过IL7和GMCSF刺激外周血淋巴细胞增殖的作用进行外周血淋巴细胞的体外培养。

【技术实现步骤摘要】
一种IL7-Fc-GMCSF融合蛋白及其应用
本专利技术属于生物医药领域，涉及一种IL7-Fc-GMCSF融合蛋白及其应用。
技术介绍
IL7(interleukin7,白介素7)是白介素家族成员之一，为多潜能的细胞因子，主要由胸腺基质细胞产生，具有广泛的免疫效应，在T细胞生长、存活及分化中具有重要作用。IL7的主要功能是促进B细胞和T细胞生长及抗凋亡作用，是B细胞生长和preB细胞生存、分化、增殖因子。在T细胞发育、增殖及稳态调节中起关键作用。其效应细胞主要为CD8+亚群。IL7支持记忆CD8+T细胞稳态扩展和生存还可刺激外周血单核细胞的裂解活性。提高机体的免疫能力对于DC和NK细胞的产生有促进作用。粒细胞-巨噬细胞集落因子(Granulocyte-macrophagecolonystimulatingfactor，GMCSF)是一种细胞因子，可促进造血祖细胞分化为粒细胞、巨噬细胞，并且可以通过调节抗原递呈细胞(antigenpresentingcells,APCs)尤其是树突状细胞的数量和功能来增强机体的免疫应答。GMCSF可通过增本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种IL7-Fc-GMCSF融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白为二聚体蛋白，包括二聚化的第一条多肽链和第二条多肽链，第一条多肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，第二条多肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种IL7-Fc-GMCSF融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白为二聚体蛋白，包括二聚化的第一条多肽链和第二条多肽链，第一条多肽链的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，第二条多肽链的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。


2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白由Fc蛋白片段分别与IL7蛋白片段、GMCSF蛋白片段通过Knob-in-hole方式融合连接。


3.根据权利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，IL7蛋白片段来自人的IL7区域；Fc蛋白片段来自人IgG的Fc蛋白片段；GMCSF蛋白片段来自人GMCSF的GMCSF区域。


4.编码权利要求1所述的融合蛋白的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示。


5.一种含有IL7-Fc-GMCSF融合蛋白的表达载体，其特征在于，在表达载体中插入IL7-Fc-Flag和GMCSF-Fc-His融合蛋白，表达载体优选pCDNA3.4载体。


6.权利要求1所述IL7-Fc-GMCSF融合蛋白的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)对pCDNA3.4载体进行处理：用NotI/XbaI酶切
(2)构建IL7-Fc-Flag和GMCSF-Fc-His融合蛋白基因片段，以全基因合成的分段引物作为模板进行PCR扩增，回收PCR产物,克隆至处理后的pCDNA3.4载体No...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑飞剑，吴丽萍，查长春，唐静秋，朱锦秀，张婧，
申请(专利权)人：泰州市百英生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32