一种分离纯化枳实中多甲氧基黄酮的方法技术

本发明专利技术公开了一种分离纯化枳实中多甲氧基黄酮的方法，包括以下步骤：a)按照体积比1：1～10的比例，将粉碎的干燥枳实，加入浓度为60‑80％的乙醇中，回流提取2‑4次，每次1～2h，过滤后将多次的过滤液合并，浓缩至浓度为30～35％，调节pH值为4‑5后，得到预处理后的枳实提取液备用；b)将步骤a)中得到的枳实提取液通过备好的大孔吸附树脂柱进行上样，上样时枳实提取液的流速为10‑20ml/h，枳实提取液与大孔吸附树脂柱中树脂的体积比为1～3:1，吸附流速为0.4‑0.6BV/h，大孔吸附树脂柱径高比为1:10，上样后用与树脂体积比为3:1的乙醇作洗脱剂进行洗脱，并将洗脱液浓缩后，结晶，即得到多甲氧基黄酮晶体。本方法步骤简单，易于操作，成本低，得率高且产物纯度高。

A method for separation and purification of polyoxyflavones from Fructus aurantii Immaturus

【技术实现步骤摘要】
一种分离纯化枳实中多甲氧基黄酮的方法
本专利技术属于中药提取领域，涉及一种中药枳实中有效成分的提取方法，尤其涉及一种分离纯化枳实中多甲氧基黄酮的方法。
技术介绍
枳实是芸香科植物酸橙及其栽培变种或甜橙的干燥幼果，具有破气消积、化痰散痞的作用，用于治疗积滞内停、痞满胀痛、泻痢后重、大便不通、结胸、胃下垂、脱肛、子宫脱垂等症，主要含挥发油、生物碱(辛弗林、N-甲基酪胺)、黄酮类化合物、维生素C及维生素D等成分。黄酮类化合物是枳实中的主要有效活性成分，此前的研究多集中在枳实中含有的芸香柚皮苷与柚皮苷、橙皮苷与新橙皮苷等黄酮苷类化合物中，而对多甲氧基类黄酮化合物(PMFs)的研究较少。近年来有关PMFs抗癌的研究取得了很大进展，由于PMFs对多种癌细胞有较强的抑制作用，受到国内外的广泛关注。国内外对多甲氧基黄酮类成分的抗癌活性报道越来越多，提示这类成分具有潜在的新药开发价值。但是现有技术中枳实有效成分提取较困难，且方法复杂，得率低且成本高，同时，得到的样品纯度也不高等。随着各种天然有效成分的利用价值越来越受到人们的重视，从植物中提取这个有效成分也很重要，但一般都是为获得单一活性成分而开发设计提取方法。由于各种活性成分之间的性质差异，导致了这些方法生产的产品较为单一，也会损失剩余部分的药用价值。
技术实现思路
本专利技术为了解决上述技术问题，提供了一种分离纯化枳实中多甲氧基黄酮的方法，该方法步骤简单，易于操作，成本低，得率高且产物纯度高。本专利技术是通过以下技术方案来实现：一种分离纯化枳实中多甲氧基黄酮的方法，包括以下步骤：a)按照体积比1：1～10的比例，将粉碎的干燥枳实，加入浓度为60-80％的乙醇中，回流提取2-4次，每次1～2h，过滤后将多次的过滤液合并，浓缩至浓度为30～35％，调节pH值为4-5后，得到预处理后的枳实提取液备用；b)将步骤a)中得到的枳实提取液通过备好的大孔吸附树脂柱进行上样，上样时枳实提取液的流速为10-20ml/h，枳实提取液与大孔吸附树脂柱中树脂的体积比为1～3:1，吸附流速为0.4-0.6BV/h，大孔吸附树脂柱径高比为1:10，上样后用与树脂体积比为3:1的乙醇作洗脱剂进行洗脱，并将洗脱液浓缩后，结晶，即得到多甲氧基黄酮晶体。步骤a)之前还包括，c)大孔吸附树脂柱预处理：将大孔吸附树脂用浓度为90-95％的乙醇浸泡20-24h后，用水进行清洗，再用浓度为5-6％的盐酸浸泡5-8h，用水洗至中性，然后用5-7％氢氧化钠溶液浸泡5-8h，用水洗至中性后，湿法装注，再用乙醇对树脂进行清洗至洗出液澄清，用水清洗后备用。步骤c)中，所述的湿法装柱的具体步骤为：将树脂与水的体积比为1：3的比例，倒入柱子中。步骤c)中，所述的大孔吸附树脂为D-101型树脂。步骤c)中，所述的水为蒸馏水。步骤c)中，所述的乙醇对树脂进行清洗，乙醇浓度为90-95％。步骤a)中，所述的粉碎的干燥枳实的粒度为10-50目。步骤b)中，所述的乙醇浓度为50％。步骤b)中，所述的洗脱液浓缩至，以溶液中乙醇浓度小于25％为止。步骤b)中，所述的结晶是在室温下，结晶5～8h。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益的技术效果：1、与现有的传统提取技术相比较，本专利技术中利用枳实中多甲氧基黄酮的理化特性，通过控制提取条件和树脂吸附条件对提取物进行提取和纯化。具有方法简单，易于操作，成本低，得率高的优点。2、本专利技术中步骤a中的大孔吸附树脂型号为D-101，它是一种较为常见的大孔树脂，普遍吸附能力强，对黄酮类分离纯化的效果比较好。3、本专利技术步骤a中的水为蒸馏水，通过蒸馏作用的水，所含杂质较少，不会导致产品中有效成分受影响。4、本专利技术通过对工艺参数进行控制，优化了各个步骤中乙醇的浓度，旨在提高枳实中多甲氧基黄酮的提取率，实现成本低，得率高的目的。具体实施方式下面结合具体的实施例对本专利技术做进一步的详细说明，所述是对本专利技术的解释而不是限定。实施例1：一种分离纯化枳实中多甲氧基黄酮的方法，包括以下步骤：a)大孔吸附树脂柱预处理：将大孔吸附树脂用浓度为90-95％的乙醇浸泡20-24h后，用蒸馏水进行清洗，再用浓度为5-6％的盐酸浸泡5-8h，用蒸馏水洗至中性，然后用5-7％氢氧化钠溶液浸泡5-8h，用蒸馏水洗至中性后，湿法装注，再用浓度为90-95％的乙醇对树脂进行清洗至洗出液澄清，用蒸馏水清洗后备用；其中，步骤a)中，所述的湿法装柱的具体步骤为：将树脂与水的体积比为1：3的比例，倒入柱子中。步骤a)中，所述的大孔吸附树脂为D-101型树脂。b)将干燥的枳实粉碎至粒度为10-50目，按照体积比1：1～10的比例，将其加入浓度为60-80％的乙醇中，回流提取2-4次，每次1～2h，过滤后将多次的过滤液合并，浓缩至浓度为30～35％，调节pH值为4-5后，得到预处理后的枳实提取液备用；c)将步骤b)中得到的枳实提取液通过备好的大孔吸附树脂柱进行上样，上样时枳实提取液的流速为10-20ml/h，枳实提取液与大孔吸附树脂柱中树脂的体积比为1～3:1，吸附流速为0.4-0.6BV/h，大孔吸附树脂柱径高比为1:10，上样后用与树脂体积比为3:1的浓度为50％的乙醇作洗脱剂进行洗脱，并将洗脱液浓缩至溶液中乙醇浓度小于25％为止后，在室温下，结晶5～8h，即得到多甲氧基黄酮晶体。实施例2：一种分离纯化枳实中多甲氧基黄酮的方法，包括以下步骤a.大孔吸附树脂预处理将大孔吸附树脂用浓度为90％的乙醇浸泡24h后，用水进行清洗，再用浓度为5％的盐酸浸泡8h，用水洗至中性，然后用5％氢氧化钠溶液浸泡8h，用水洗至中性后，湿法装注，再用乙醇对树脂进行清洗至洗出液澄清，用水清洗后备用；其中，步骤a中，所述的湿法装柱的具体步骤为：将树脂与水的体积比为1：3的比例，倒入柱子中。步骤a中，所述的大孔吸附树脂为D-101型树脂。步骤a中，所述的水为蒸馏水。步骤a中，所述的乙醇对树脂进行清洗，乙醇浓度为90％。b.枳实预处理将干燥的枳实粉碎，加入体积比为1：10，浓度60％的乙醇，回流提取4次，每次2h，过滤后将多次的过滤液合并，浓缩至浓度为30％，调节pH值为5后备用；其中，步骤b中，所述的粉碎枳实的粒度为10目。c.多甲氧基黄酮的提取将步骤b中得到的枳实提取液通过步骤a中备好的大孔吸附树脂柱进行上样，上样时溶液的流速为10ml/h，溶液与树脂的体积比为2:1，吸附流速为0.4BV/h，树脂柱径高比为1:10，上样后用与树脂体积比为3:1的乙醇作洗脱剂进行洗脱，并将洗脱液浓缩后，结晶，即得到多甲氧基黄酮晶体。其中，步骤c中，所述的乙醇浓度为50％。步骤c中，所述的浓缩洗脱液，以溶液中乙醇浓度小于25％为止。步骤c中，所述的结晶是在室温下，结晶5h。实施例3一种分离纯化枳实中多甲氧基黄酮本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离纯化枳实中多甲氧基黄酮的方法，其特征在于，包括以下步骤：a)按照体积比1：1～10的比例，将粉碎的干燥枳实，加入浓度为60-80％的乙醇中，回流提取2-4次，每次1～2h，过滤后将多次的过滤液合并，浓缩至浓度为30～35％，调节pH值为4-5后，得到预处理后的枳实提取液备用；/nb)将步骤a)中得到的枳实提取液通过备好的大孔吸附树脂柱进行上样，上样时枳实提取液的流速为10-20ml/h，枳实提取液与大孔吸附树脂柱中树脂的体积比为1～3:1，吸附流速为0.4-0.6BV/h，大孔吸附树脂柱径高比为1:10，上样后用与树脂体积比为3:1的乙醇作洗脱剂进行洗脱，并将洗脱液浓缩后，结晶，即得到多甲氧基黄酮晶体。/n

【技术特征摘要】
1.一种分离纯化枳实中多甲氧基黄酮的方法，其特征在于，包括以下步骤：a)按照体积比1：1～10的比例，将粉碎的干燥枳实，加入浓度为60-80％的乙醇中，回流提取2-4次，每次1～2h，过滤后将多次的过滤液合并，浓缩至浓度为30～35％，调节pH值为4-5后，得到预处理后的枳实提取液备用；
b)将步骤a)中得到的枳实提取液通过备好的大孔吸附树脂柱进行上样，上样时枳实提取液的流速为10-20ml/h，枳实提取液与大孔吸附树脂柱中树脂的体积比为1～3:1，吸附流速为0.4-0.6BV/h，大孔吸附树脂柱径高比为1:10，上样后用与树脂体积比为3:1的乙醇作洗脱剂进行洗脱，并将洗脱液浓缩后，结晶，即得到多甲氧基黄酮晶体。


2.根据权利要求1所述的分离纯化枳实中多甲氧基黄酮的方法，其特征在于，步骤a)之前还包括，c)大孔吸附树脂柱预处理：
将大孔吸附树脂用浓度为90-95％的乙醇浸泡20-24h后，用水进行清洗，再用浓度为5-6％的盐酸浸泡5-8h，用水洗至中性，然后用5-7％氢氧化钠溶液浸泡5-8h，用水洗至中性后，湿法装注，再用乙醇对树脂进行清洗至洗出液澄清，用水清洗后备用。


3.根据权利要求2所述的分离纯化枳实中多甲氧基黄酮的方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈冠宇，王佳明，王蕾，阮娜，
申请(专利权)人：陕西慧科植物开发有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61