半定量检验装置制造方法及图纸

一种用于抗体抗原特异结合之免疫分析的半定量检验装置，其包含于一支撑体上粘附有导引区、抗体指示区、测试区、吸收区，其中抗体指示区含有作为指示剂之待测物之第一抗体复合物；测试区含有至少两种不同浓度之待测物之第二抗体。本实用新型专利技术可方便简单地判断检体中待测物的浓度范围。（*该技术在2009年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本技术有关一种用于抗体抗原特异结合之免疫分析的半定量检验装置。抗体抗原特异结合之免疫分析技术已发展多年，并已配合色层分析法发展出简便、快速之方法，即使是任何无经验之个人，亦可以肉眼判读出现于尿液或血液中之特定抗原。附图说明图1所示的一种传统性检验试片是在一基片上从顶端至末端分别设置吸收区、控制区、测试区、抗体指示剂区及导引滤纸，其中测试区中只有一条测试线，将该试片末端插入检验样本，即可对待测物进行定性分析。福仁(Fren,1973,Nature(London)Phys.Sci.241:20-22)及豪瑞司伯格(Horisberger)等人(1984,Histochemistry,80:13-18)所发表之检验系统，其中通常需要一对单克隆抗体(第一抗体及第二抗体)，第一抗体及第二抗体能分别与特定抗原之两个不同抗原决定区结合。第一抗体先藉由非共价键紧密地与粉红胶体金悬浮液共轭形成胶体金－第一抗体复合物。第二抗体则被涂布于多孔硝化纤维膜。胶体金－第一抗体复合物与特定抗体结合后，再与第二抗体结合并固着于硝化纤维膜上。然后此复合物会形成可目测之粉红色带。此种试片检验法即为双面三明治免疫分析法。其中最广为使用之商品化产品为奥斯克维茨(Osikowicz)等人(1990,Clinical Chemistry,36:1586)所发展出，检验尿液中绒毛膜促性腺激素(HCG)之单一步骤验孕试片。单一步骤检验试片虽可快速地检测检体中之待测物，然传统之单一步骤检验试片必须在当抗原大于某一特定浓度时始会出现正结果，且每一试片一次仅能侦测一种判读(cut-off)浓度，故其仅具定性分析之用途。近期，美国食品及药物管理局公布一项关于摄腹腺癌之研究报告，其包含测量血液中PSA之浓度及数位式直肠检验法，对50岁(含)以上男性进行早期摄腹腺癌之分析。其结果显示，当血液中PSA之浓度介于每毫升4-10毫微克时，便应视为高危险群而需作进一步之生检实验。传统之单一步骤检验装置无法由单一装置同时侦测一种以上之浓度而达到定量分析之目的。因此，目前极需一种能在处理检体(尤其处理大量检体)时，藉由单一步骤同时侦测检体中待测物至少二种判读浓度范围之方便又简单之单一半定量筛检装置，以利专业与非专业检测人员藉由不同浓度之显示结果，判断待测物之浓度范围，进一步确认病患之病情。惟于单一半定量筛检装置中包含多种不同浓度之抗体(指示剂－第一抗体复合物及至少两种不同浓度之第二抗体)，故要精确地控制各抗体之浓度非常不易。本技术的目的为提供一种用于侦测检体中待测物的半定量检验装置，通过单一步骤即可对待测物作半定量分析，更可进一步分析待测物之浓度范围。本技术的技术方案是一种半定量检验装置，其包含于一支撑体粘附有(1)导引滤纸；(2)抗体指示剂区；(3)测试区；及(4)吸收区；其特征在于其中抗体指示剂区含有指示剂－第一抗体复合物；测试区含有至少两种不同浓度之第二抗体。所述的半定量检验装置，其特征在于该第一抗体及第二抗体为相异之抗待测物单克隆或多克隆抗体。所述的半定量检验装置，其特征在于该检体为尿液、血液、血清或粪便抽取物。所述的半定量检验装置，其特征在于该待测物为摄腹腺专一性抗原。所述的半定量检验装置，其特征在于该导引滤纸为一种或多种可提供毛细现象并吸附液体之天然或合成多孔性物质。所述的半定量检验装置，其特征在于该多孔性物质为玻璃纤维、人造纤维、滤纸、硝化纤维或尼龙。所述的半定量检验装置，其特征在于该指示剂为有色乳胶显料或金属胶质溶液。所述的半定量检验装置，其特征在于该指示剂－第一抗体复合物为胶体金－第一抗体复合物。所述的半定量检验装置，其特征在于该吸收区为厚吸收滤纸。所述的半定量检验装置，其特征在于其包含控制区，其中含有抗第一抗体之第三抗体。本技术的效果是由于传统之单一步骤检验装置仅能侦测待测物之单一判读浓度，故其仅能用于初步定量分析之目的。根据本技术的之半定量检验装置，除可达成定量分析之目的，更可藉由单一步骤同时观察至少两种不同判读浓度之结果，而能判断待测物的浓度范围。附图图面的说明图1为传统定性检验试片之结构示意图。图2为本技术之一种实施例结构示意图。图3A-C系为利用本技术装置侦测含有PSA检体之判读结果示意图。参照图2，本技术提供一种半定量检验装置，是在一支撑体上粘附有导引滤纸5、抗体指示剂区4、测试区3及吸收区1。其中抗体指示剂区4含有指示剂-第一抗体复合物；测试区含有至少两种不同浓度之第二抗体形成的第一测试线7和第二测试线8。本技术之半定量检验装置中，第一抗体及第二抗体皆为抗待测物之单克隆或多克隆抗体，惟与第一抗体及第二抗体结合之抗原决定区并不相同。本技术之半定量检验装置中，导引滤纸5为可提供毛细现象并吸附液体，而将检体导向本技术装置另一端之天然或合成多孔性物质。其可为(非限定为)，例如玻璃纤维、人造纤维(rayon)、滤纸、硝纤维或尼龙。本技术之半定量检验装置中，抗体指示剂区4中含有指示剂－第一抗体复合物，当检体达到抗体指示剂区时，该指示剂－第一抗体复合物会溶入检体中，并与检体中之待测物形成待测物－指示剂－第一抗体复合物，再向测试区移动。其中该指示剂为(非限定为)，例如有色乳胶颗粒(colored latex particles)或金属胶质溶液(metalliccolloidal solution)。其中较佳之指示剂－第一抗体复合物为胶体金－第一抗体复合物。本技术之半定量筛检装置中，测试区3含有至少两种不同浓度且固着于载体(如硝化纤维)之第二抗体。当指示剂－第一抗体复合物移入测试区后，便与固着之第二抗体形成第二抗体－指示剂－第－抗体复合物，并于测试区呈现可用肉眼判读之讯号。由于测试区含有不同浓度之第二抗体，故本技术半定量检验装置之测试区内可呈现不同待测物判读浓度之结果。而第二抗体之使用浓度系依据(1)抗原种类、(2)抗体来源及(3)胶体金－第一抗体复合物之浓度予以调配。由于其中有许多变因会直接影响半定量试剂之准确性，故于品质控制上非常困难。本技术之半定量检验装置中，吸收区1可为(非限定为)厚吸收滤纸。其具有吸附液体之能力，且容许检体不断地通过抗体指示剂区及测试区，以获得完全之反应。本技术半定量检验装置可适用之检体包括尿液、血液、血清及粪便抽取物。本技术半定量检验装置可适用之待测物包括所有能引发抗体/抗原结合反应之作用物。其中较佳为摄腹腺专一性抗原。本技术之半定量检验装置可进一步包含一控制区2，其中含有抗第一抗体之第三抗体，其与未反应之指示剂－第一抗体复合物结合后，便于控制区呈现可用肉眼判读之讯号。当讯号出现时，即表示本技术之半定量检验装置具有正常之功能。以下进一步说明本技术一种实施例的制法，其不应成为本技术之限制条件。步骤1．抗体指示剂区之制备(1)胶体金之制备取50毫克氯化金加入500毫升蒸馏水，将此溶液以磁棒搅拌直至沸腾。将12.5毫升之新鲜柠檬酸三钠(1％)快速地添入沸腾溶液中，并持续煮沸5分钟直至呈现酒红色之胶体金悬浮液形成。(2)胶体金－第一抗体复合物之制备取约50微克之第一抗体(抗PSA第一单克隆抗体；Scripps Lab.)加入10毫升本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种半定量检验装置，其包含：于一支撑体粘附有（１）导引滤纸；（２）抗体指示剂区；（３）测试区；及（４）吸收区；其特征在于：其中抗体指示剂区含有指示剂－第一抗体复合物；测试区含有至少两种不同浓度之第二抗体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：黄福全，
申请(专利权)人：佳和生物科技股份有限公司，黄福全，
类型：实用新型
国别省市：71[中国|台湾]