分析元件的多种功能结构及其用于测定分析物的应用制造技术

本发明专利技术涉及用于检测分析物的分析元件，所述元件在能够在各区之间进行液体转运的材料之中或之上，含有样品施加区和位于下游的检测区，其中检测区含有特异性结合对１之配对物１，该配对物以能够与特异性结合对１的不是分析物之配对物２在接触时结合的方式被固定，其中特异性结合对２之经标记配对物１位于检测区的上游，它被浸渗在材料上，以使其可被液体脱附并能够与特异性结合对２之不是分析物的配对物２在接触时进行结合，本发明专利技术还涉及用所述分析元件检测分析物的方法。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及用于测定分析物的分析元件，所述元件在能够在各区之间进行液体转运的材料之中或之上，含有样品施加区和位于下游的检测区，其中检测区含有特异性结合对1之配对物1，该配对物以能够与特异性结合对1之不是分析物的配对物2在接触时结合的方式被固定，本专利技术还涉及用特异性结合对检测分析物的方法。本专利技术还涉及含分析元件的用于检测分析物的试剂盒。分析元件是现有技术中已知的，其中检测分析物所需的试剂存在于载体材料内或载体材料上。例如美国专利4861711，美国专利5591645和EP-A-0291194。在这些文献中描述之分析元件的共同特征是它们特别适用于进行免疫检测法。它们包括样品施加区和位于其下游的检测区。由于多孔载体材料内的毛细作用力，使液体样品迁移通过样品施加区和检测区之间的多个区，从而吸收检测分析物所需的试剂并使其与样品中的分析物反应。将结合配对物固定在检测区，它能够与待测分析物特异性结合。在有不同分析物的情况下，需要将用于分析物的不同结合配对物固定在固相上。从美国专利4861711的附图说明图1并结合例如在第5栏57行至第6栏48行的描述可以知道，可将特异性结合对1之配对物1固定在检测区，该配对物不与分析物结合但可以通用，因为它与特异性结合分析物的物质上存在的特异性结合对1的配对物2一样可与表位结合，因此，在检测反应过程中，将分析物的移动复合物和所述结合物质固定在检测区，并将其与未复合的移动反应组分分开。分析物的特异性标记物质有很重要的作用，因为只有它与分析物结合，和随后由分析物和针对分析物之标记物质形成的复合物在检测区中的固定，以及从检测区中去除移动的未反应的反应组分可以表明在液体样品中存在分析物。本领域已知的标记物质是特异于分析物的，即在夹心检测的情况下，它们是被标记的物质，例如与待测分析物(抗原或抗体)特异性反应的抗体或抗原。但是这需要取决于分析物，已制备出分析物的不同的标记的特异性结合配对物。本领域已知许多可用于标记的物质。过去，使用具有其所有缺点的放射性标记物，后来这些标记大部分被酶标记物所取代。现在，主要将颗粒标记物，特别是金或乳胶颗粒用于本领域以前所述文献中描述的分析元件中。由标记物和与分析物特异性结合的物质组成的缀合物的制备方法很复杂，而且如果要测定不同的分析物，则需优化每个独立的分析物-特异性结合配对物。另外，在分析元件中，必须根据每种具体需求来优化所述缀合物存在其上并于其上转运的材料。从这种意义上来说，常常需要解决上述所有稳定性问题。因此，本专利技术的目的是提供分析元件的多种功能结构(generalpurpose structure)，所述分析元件的使用不依赖于待测分析物，条件是该分析物或者一种由分析物衍生并代表该分析物的物质能够通过特异对结合来检测。该目的是利用权利要求书中所述之本专利技术主题达到的。本专利技术具体涉及用于测定分析物的分析元件，所述元件在能够在各区之间进行液体转运的材料之中或之上，含有样品施加区和位于下游的检测区，其中检测区含有特异性结合对1之配对物1，该配对物以能够与特异性结合对1的不是分析物之配对物2在接触时结合的方式被固定，其特征在于特异性结合对2的经标记的配对物1位于检测区之上游，它被浸渗在一种材料上以使其可通过液体脱附，并在与特异性结合对2不是分析物的配对物2接触时能够结合，其中特异性结合对1之配对物2和特异性结合对2之配对物2特异性结合于待测分析物，或通过待测分析物是衍生于并代表分析物之物质部分的反应进行结合。本专利技术还涉及用于检测分析物的试剂盒，该试剂盒含有上述分析元件以及选自特异性结合对1之配对物2和特异性结合对2之配对物2的至少一个配对物。最后，本专利技术还涉及用特异性结合对检测分析物的方法，其特征在于将衍生于并代表分析物的、含有特异性结合对1之配对物2和特异性结合对2之配对物2的物质在本专利技术的分析元件中接触，以便用特异性结合对2的经标记配对物检测分析物，在分析元件中使所述物质通过液体转运向位于样品施加区上游之检测区移动，使其在检测区与特异性结合对1之配对物1结合并在特异性结合对2之配对物1的标记物的基础上进行检测。本专利技术分析元件的必要特征是液体可以在分析元件内向检测区移动。所述液体流例如可以在适当制备的中空体中借助重力来达到。通过作为重力之一种的离心力而能够进行液体转运的装置例见EP-B0052769。但是本专利技术的分析元件优选含有借助毛细作用力能够使液体移动的吸附材料。就此而言，本专利技术分析元件中各个区的材料可以相同，也可以不同。如果希望实现其最佳功能，常见的情况是不同区由不同的材料组成。适宜的吸附性毛细活性材料基本上是在所谓干试法中可用于吸收液体的那些材料，参见例如美国专利4861711,5591645或EP-A0291194。已证明多孔材料例如硝酸纤维素膜的膜是可行的。但是，还可以用纤维性吸附基质材料例如羊毛织物或编织物。羊毛是特别优选的。纤维性基质材料可包括玻璃、纤维素、纤维素衍生物、聚酯、聚酰胺，还包括粘性人工羊毛和聚乙烯醇。用纤维素性纤维制备的羊毛，以聚酯和/或聚酰胺和含有羟基和/或酯基之有机粘合剂为基础的聚合物纤维可参见EP-B326135，例如可将所述材料用于本专利技术。在欧洲专利申请0571941中，除玻璃纤维、聚酯纤维、聚酰胺纤维、纤维素纤维或纤维素衍生物纤维外，含有可溶的共聚酯纤维的羊毛材料也可用于本专利技术的分析元件。纸例如茶袋纸也是适宜的。为了改善本专利技术分析元件的操作，可将吸附性毛细活性材料或不同的吸附毛细活性材料放在本身不透液体的坚硬的载体材料上，所述载体材料对基质材料中的液体流没有不利影响并就分析元件中所发生的反应而言为惰性的。聚酯箔是优选的载体材料，在所述载体材料上附着能够进行液体转运的基质材料。在本专利技术的分析元件中，将每个区安放在载体材料上，它们在各自的顶端，彼此相接或部分在顶部并部分地彼此相接。一种特别优选的本专利技术分析元件是其中在载体材料上，将样品施加区和检测区以彼此相接的方式放置。在这一点上，彼此相接指这些区是相邻的并与另一区直接接触或者实质上放在由其他区隔开的同一平面上。样品施加区是本专利技术分析元件上加入待测样品的区域，该区域中可测定所述样品中是否存在特定的分析物或衍生于和代表所述分析物的物质，并还可确定其存在的量。检测区是本专利技术分析元件上的区域，其中可测定在加到分析元件上的样品中是否存在待测分析物或衍生于和代表所述分析物的物质。所述检测可以是定性的、半定量的或定量的。在这一点上，半定量指不能测定分析物或衍生于并代表分析物之物质的具体浓度值，而可测定分析物浓度所在的浓度范围。将特异性结合对1之配对物1固定在检测区，固定的方式是它与特异性结合对1之不是分析物的配对物2接触时可以与之结合。通过化学反应，即通过形成共价键可达到固定的目的。但是，还可通过吸附力来达到该目的，所述吸附力包括除共价键外的所有可能性。通常将硝酸纤维素膜用于当被浸渗，而不存在共价结合时，蛋白质和核酸会与之紧密结合的检测区。根据本专利技术，除特异性结合对1之配对物1外，还必须将特异性结合对2的经标记配对物1放在分析元件中。不必将该配对物固定，但该配对物必须以可被液体脱附的浸渗形式存在，即必须可由液体将该经标记的配对物转运到检测区。最好应可用尽可能少的液体将本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于检测分析物的分析元件，所述分析元件在能够在各区之间进行液体转运的材料之中或之上，含有样品施加区和位于下游的检测区，其中检测区含有特异性结合对１之配对物１，该配对物以能够与特异性结合对１之不是分析物的配对物２在接触时结合的方式被固定，其中特异性结合对２之经标记配对物１位于检测区的上游，并被浸渗在材料上，以使其可被液体脱附并能够与特异性结合对２之不是分析物的配对物２在接触时进行结合。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：J克勒普，G希勒尔，A尼赫特尔，T菲舍尔，M赫施，
申请(专利权)人：曼赫诊断器材股份有限公司，
类型：发明
国别省市：DE[德国]