用于体外测定红细胞生成素生物活性的方法及其试剂盒技术

本发明专利技术涉及含有ＥＰＯ样品体内ＥＰＯ活性的体外测定方法。更具体地说，本方法包括在去除脱唾液酸ＥＰＯ的条件下处理含有ＥＰＯ的样品和测定所得处理样品的体外ＥＰＯ活性。在优选的实施方案中，通过将此样品与人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２的细胞孵育而将脱唾液酸ＥＰＯ从该样品中去除，并且通过将此处理过的样品与ＥＰＯ反应性细胞系的细胞孵育并测定此ＥＰＯ反应性细胞的增殖或活力以测定体外的ＥＰＯ活性。例如，本发明专利技术对定量多种样品类型中的生物学活性ＥＰＯ是有用的。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

红细胞生成素(EPO)是一种刺激哺乳动物红细胞类前体细胞成熟且因此调节红细胞产生的糖蛋白激素。人EPO(hEPO)的纯化和该EPO基因的克隆导致重组人EPO的商业化生产，其已成功用于对具有由于肾衰竭所致贫血病人的治疗，并且在临床上对治疗其它贫血也是有用的。目前定量样品，例如大量药物制剂中生物活性EPO的方法笨拙、昂贵且耗时。本专利技术提供了测定EPO体内生物活性安全、快速和相对廉价的方法和用于测定EPO生物活性的试剂盒。
技术介绍
EPO是一种刺激红细胞类前体细胞增殖、分化和成熟至成熟红血细胞的糖蛋白激素。EPO已被纯化(Miyake等，(1977)生物化学杂志2525558)并被分子克隆(Lin等，(1985)美国自然科学院院报827580)，并且重组hEPO已成功用于由晚期肾病所致贫血的治疗。在与AIDS、类风湿性关节炎、血癌和早熟有关的贫血的治疗中以及为了增加术前收集自身血液的产量中也已有报导EPO的临床使用。重组hEPO具有30.4KD的分子量，其40％为碳水化合物。对EPO糖基化性质和功能的研究表明hEPO的大部分寡糖链为含有岩藻糖、唾液酸化(sialylated)的四天本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于体外测定含有ＥＰＯ样品中体内红细胞生成素（ＥＰＯ）活性的方法，包括在去除脱唾液酸ＥＰＯ的体外条件下处理该样品，并测定此处理过样品的体外ＥＰＯ活性。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：PJ利斯，JK格伦，CW苏，
申请(专利权)人：奥索麦克尼尔药品公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]