分离的与HLA-Cw*16分子复合的肽及其用途制造技术

由氨基酸序列Ｘａａ Ｉｌｅ（Ｘａａ）↓［４］Ａｒｇ（Ｘａａ）↓［２］Ｔｙｒ Ｘａａ组成的分离的肽，其中第１个Ｘａａ是０－３个氨基酸长，第４个Ｘａａ是０－２个氨基酸长，且第１个和第４个Ｘａａ总共不超过３个氨基酸长，各Ｘａａ是任意氨基酸，且所述肽与ＨＬＡ－Ｃｗ１６分子结合。（*该技术在2017年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利
本专利技术涉及免疫遗传学和肽化学。更具体地说，它涉及以各种方式使用的肽，包括作为免疫原和作为HLA-Cw*16分子的配体使用。更具体地说，它涉及所谓的“肿瘤排斥抗原”，该抗原来自基因MAGE-6编码的肿瘤排斥抗原前体，且由MHC类HLA-Cw*16分子提供。背景和现有技术目前已经以许多不同的方式对宿主生物能否识别癌细胞进行了研究。对这一领域的了解使得对基础免疫学和癌症学都有了一些了解。对小鼠肿瘤的早期研究揭示了当移植进同源动物时这些表现分子导致肿瘤细胞的排斥。这些分子在受体动物中被T细胞“识别”并激发溶解移植细胞的溶胞性T细胞反应。用诸如甲基胆蒽的化学致癌剂体外诱导的肿瘤首先获得了这一证据。发现肿瘤表达的且诱导T-细胞反应的抗原对于各肿瘤是不同的。参见Prehn等，国家癌症研究所杂志，18769-778(1957)；Klein等，癌症研究，201561-1572(1960)；Gross，癌症研究，3326-333(1943)，Basombrio，癌症研究，302458-2462(1970)关于用化学致癌剂诱导肿瘤和细胞表面抗原差异的一般教导。这类抗原最后称为“肿瘤特异性移植抗原”或“TSTAs”。当以化学致癌剂诱导时观察到存在该抗原后，经紫外照射体外诱导肿瘤时可获得相似的结果。参见Kripke，国家癌症研究所杂志，53333-1336(1974)。尽管对于上文所述的肿瘤类型观察到了T-细胞介导的免疫反应，但据认为自发肿瘤一般无免疫原性。因此据信在携带肿瘤的受试者中不存在激发与肿瘤反应的抗原。参见，Hewitt等，英国癌症杂志，33241-259(1976)。存在tum-抗原家族的细胞系是经过诱变小鼠肿瘤细胞或细胞系获得的免疫原性变异体，如Boon等，实验医学杂志，1521184-1193(1980)，其公开内容作为参考文献引用。详细来说，经过突变在同源小鼠中不产生免疫反应且形成肿瘤的肿瘤细胞(即，“tum+”细胞)获得tum-抗原。当诱变这些tum+细胞时，它们受同源小鼠排斥且不能形成肿瘤(因此称为“tum-”)。参见Boon等，美国科学院学报，74272(1977)，其公开内容作为参考文献引用。已显示许多肿瘤类型表现出这一表型。参见，例如，Frost等，癌症研究，43125(1983)。似乎tum-变异体不能形成进行性肿瘤，因为它们起动免疫排斥过程。支持这一假说的证据包括肿瘤的“tum-”变异体，即正常情况下不形成肿瘤的变异体在免疫系统受亚致死辐射损伤的小鼠中形成肿瘤的能力，Van Pel等，美国科学院学报，765282-5285(1979)；以及腹膜内注射的肥大细胞瘤P815的tum-细胞指数繁殖12-15天且然后在中等流入量的淋巴细胞和巨噬细胞存在下仅仅几天即被清除的观察结果(Uyttenhove等，实验医学杂志，1521175-1183(1980))。进一步的证据包括即使在细胞攻击后施用免疫抑制量的辐射时，小鼠仍能获得使其抗随后针对相同tum-变异体的攻击的免疫记忆的观察结果(Boon等，美国科学院学报，74272-275(1977)；Van Pel等，出处同上；Uyttenhove等，出处同上)。随后的研究发现当对自发肿瘤进行诱变时，产生发生反应的免疫原性变异体。事实上，这些变异体能诱导针对原发性肿瘤的免疫保护反应。参见Van Pel等，实验医学杂志，1571992-2001(1983)。因此，已表明可在作为同源排斥反应靶的肿瘤中诱导提供所谓的“肿瘤排斥抗原”。当将外源基因转染进自发肿瘤时已获得了相似的结果。在这方面，参见Fearon等，癌症研究，482975-1980(1988)。已识别了一类抗原，它存在于肿瘤细胞的表面，且被溶细胞的T细胞识别，导致溶解。这类抗原称为“肿瘤排斥抗原”或下文称为“TRAs”。TRAs可以或不能诱导抗体反应。经过体外溶细胞的T细胞鉴定研究，即以特定溶细胞的T细胞(下文称为“CTL”)亚类鉴定抗原的研究已研究了这些抗原的诱导程度。当识别存在的肿瘤排斥抗原时，该亚类增殖，且存在肿瘤排斥抗原的细胞溶解。鉴定研究已鉴定了特异性溶解表达肿瘤排斥抗原的细胞的CTL克隆。这类研究的例子可参见Levy等，癌症研究进展，241-59(1977)；Boon等，实验医学杂志，1521184-1193(1980)；Brunner等，免疫学杂志，1241627-1634(1980)；Maryanski等，欧洲免疫学杂志，1241627-1634(1980)；Maryanski等，欧洲免疫学杂志，12406-412(1982)；Palladino等，癌症研究，475074-5079(1987)。这类分析对于CTLs识别的其它类抗原是必需的，包括次要组织相容性抗原，雄性特异性H-Y抗原，和称为“tum-”抗原且在本文中讨论的这类抗原。上文所述的受试者的肿瘤例子称为P815。参见DePlaen等，美国科学院学报，852274-2278(1988)；Szikora等，EMBO杂志，91041-1050(1990)，和Sibille等，实验医学杂志，17235-45(1990)，其公开内容作为参考文献引用。P815肿瘤是在DBA/2小鼠中用甲基胆蒽诱导且作为体外肿瘤及细胞系培养的肥大细胞瘤。P815细胞系经诱变后已产生了许多tum-变异体，包括称为P91A(DePlaen，出处同上)，35B(Szikora，出处同上)，和P198(Sibille，出处同上)的变异体。与肿瘤排斥抗原相反(且它是关键性区别)，肿瘤细胞仅在诱变后存在tum-抗原。肿瘤排斥抗原存在于未经诱变的给定肿瘤的细胞上。因此，根据参考文献，细胞系可以是tum+，例如称为“P1”的细胞系，且可以被激发产生tum-变异体。由于tum-表型不同于亲本细胞系，人们预期tum-细胞系与其tum+亲本细胞系相比DNA有区别，且该区别可用于定位tum+细胞中感兴趣的基因。结果，发现诸如P91A，35B和P198的tum-变异体的基因与其正常等位基因的区别在于该基因编码区的点突变。参见Szikora和Sibille，出处同上，和Lurquin等，细胞，58293-303(1989)。用本专利技术的TRAs证实事实并非如此。这些论文还证实来自tum-抗原的肽由Ld分子提供用于被CTLs识别。P91A由Ld提供，P35由Dd提供且P198由Kd提供。转让给与本申请相同的受让人的1992年5月22日申请的PCT申请PCT/US92/04354教导了一个编码人肿瘤排斥抗原前体的基因家族，称为MAGE家族。一些这类基因也在Van der Bruggen等，科学，2541643(1991)中讨论。现在已清楚MAGE家族的各种基因在肿瘤细胞中表达，且可用作诊断这些肿瘤的标记，以及用于本文讨论的其它目的。也参见Traversari等，免疫遗传学，35145(1992)；vander Bruggen等，科学，2541643(1991)和De Plaen等，免疫遗传学，40360(1994)。现在已相当充分地证实了蛋白质加工并出现在细胞表面的机制。本领域进展的综述可参见Barinaga，“获得一些‘骨架’MHC如何结合肽”，科学25788本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：皮埃尔·范德布鲁根，艾蒂安·德普莱恩，蒂埃里·布恩法勒尔，
申请(专利权)人：路德维格癌症研究所，
类型：发明
国别省市：