在分析用载体上沉积和分布试剂用的掩模片制造技术

本发明专利技术涉及一种用于将一种或多种试剂分布于一种分析用载体上的掩模片，所述分析用载体具体为一种电泳载体，例如电泳凝胶体。被保持在一掩模片保持装置１２中的掩模片（１０）（称为可移动掩模片）被设计成在分析用载体上的预定区域上移动，且包括用于将试剂分布于分析用载体上的横向孔３６。本发明专利技术应用于例如对存在于生物样本中的成分进行检测和鉴定的领域。特别是，检测可以通过免疫固定而完成。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种在分析用载体上沉积和分布一种或多种试剂用的掩模片，具体而言，所述分析用载体为一种用于电泳的载体，例如琼脂糖凝胶。本专利技术对于常规分析来说是有利的，特别是对于在上下文中的临床分析类型是有利的。本专利技术还涉及一种掩模片，旨在使一种或多种试剂沉积并分布在分析用载体上。该掩模片与一种具有定位装置的设备结合使用，当所述掩模片被用来沉积并分布所述试剂时，该定位装置允许所述掩模片在所述载体附近相对于分析用载体进行定位。这些定位装置也可以与导向装置结合使用，或可以包括导向装置，用于当掩模片被定位在分析用载体附近时移动所述掩模片，并允许试剂被分布于载体上的限定区域上，该限定区域包括被指定用于培养试剂和样本成分的区域。本专利技术的所述设备允许人工对试剂进行沉积和分布。也可以配置成对这些试剂进行自动沉积，并可选择地进行分布。在本专利技术的一些实施例中，将试剂装入掩模片中的步骤也可以以人工或自动方式实施。有利的是，本专利技术的掩模片比现有的掩模片更加易于装载。另一方面，本专利技术提供了一种用于将试剂沉积并分布于分析用载体上的方法。在本专利技术的一个特定实施例中，该方法被用于对试剂进行沉积和分布，以实施免疫固定，通过该方法检测或者确定一种生物样本中含有的特定成分的量，所述成分已经通过电泳法分离在载体例如琼脂糖凝胶上。本专利技术还涉及一种应用所述掩模片的免疫固定方法。另一方面，本专利技术提供一种试剂盒，包括按照本专利技术的掩模片。按照本专利技术的一种试剂盒有利地适合于实施一种使用本专利技术的掩模片的免疫固定。本专利技术也涉及用于对所述掩模片进行定位和导向的装置。应当记得，免疫固定是一种特别是在临床分析实验室中广泛采用的常规分析，该方法可以对生物样本进行以对其中所含有的病变蛋白进行以分型为目的分析。结合电泳法使用，在电泳凝胶体上形成沉淀物的这种技术在很长一段时间里是公知的。具体地，该技术已经在Alper CA和Johnson AM Vox.Sang.17445(1969)，Cawley LP et al.，Clin.Chem.221262(1976)，RitchieRF和Smith R Clin.Chem.22497，1735，1982(1976)中被公开。这种技术允许在不同生物样本特别是在生物液体例如血清，尿或脑脊髓液中辨别异常。这种技术主要包括以下步骤(1)利用电泳法从试验血清或液体中将蛋白质成分分离在一种载体上，这种载体例如是凝胶体，这种凝胶体例如是琼脂糖凝胶；(2)与分离蛋白的特异抗体进行免疫反应；(3)对形成的免疫合成物进行显色。实施这些步骤的条件已经在现有技术中公开。使用的设备也包括在相同的电泳载体上产生基准狭道(轨迹)等的可能性，具体是在相同的凝胶体上，通过使用蛋白质固定剂对存在于样本上的所有分离蛋白质进行固定而获得，所述蛋白质固定剂例如包括多价抗血清。用于对待分析的生物样本进行的、且用于在控制的温度下的迁移并用于沉积试剂(例如包括抗血清和固定剂)的新的半自动技术允许免疫固定的轮廓小型化，并保持理想的敏感度和分辨率。这种小型化允许在同一电泳载体上特别是在同一凝胶体上承载大量待分析的样本。这样，我们已经用几年时间在单个8×10cm的电泳凝胶体上从进行一个免疫固定发展到进行9个免疫固定(例如，使用SEBIA出售的商标为Hydragel9 IF的免疫固定试剂盒)。这就节约了分析时间，并减小了试剂的消耗，从而降低了分析的成本。为了在这种条件下进行免疫固定从而使试剂沉积的目的，例如欧洲专利EP-B1-0 526 271公开了一种用于分配试剂、通常具体为抗血清和固定剂的掩模片或装置，其能够克服现有技术的装置或掩模片所产生的问题，且更安全和易于使用。从而，例如使用在EP-B1-0 526 271中所描述的掩模片，在三个样本的三行中的同一电泳凝胶体上进行9个免疫固定，对于每一个样本，必须移出6种试剂(固定剂，抗-IgG抗血清，抗-IgA抗血清，抗-IgM抗血清，抗-k抗血清和抗-O抗血清)，即总共54次移液操作。这些手动移液操作证明是长时间且困难的，即使使用重复剂量移液器也是这样的。在第一方面中，本专利技术提供一种用于将试剂沉积和分布在分析用载体上的掩模片，这种设计考虑了其应用，所述应用包括将其移动，以进行将试剂分布到分析用载体的预定区域上的步骤。因此本专利技术的掩模片可以被认为是一种使用中可移动的掩模片。本专利技术还限制了试剂的消耗，特别是昂贵的抗血清和免疫固定反应情况下的固定剂的消耗，因此降低了所进行的分析的成本。它还有利于将试剂加载到掩模片中，特别是通过限制移液操作的次数和/或通过使掩模片被自动加样。另外，在改善的或甚至简化的操作条件下，所述掩模片确保了恒定的结果质量。尤其是，在使用本专利技术的装置培养被分布的试剂阶段之后，不再必须去掉留在凝胶体和掩模片之间的多余试剂，这和使用EP-B1-0 526271中提出的掩模片时的情况相同。使用本专利技术的掩模片，在分散和分布试剂之后，在掩模片和分析用载体之间不再有自由的试剂，这是由于，起初被引入的所有试剂已经沉积在分析用载体上。因此，不必泵去可能存在于分析用载体上的任何多余试剂。因此，本专利技术提供了一种将试剂沉积和分布在一种用于分析生物样本的分析用载体上的掩模片，包括——一个下表面和一个上表面，它们至少局部地相互平行，它们隔开构成掩模片厚度的距离；——一个或多个划定的区域(狭道)，它们位于掩模片下表面的水平面上，并包括一个从掩模片下表面凸出的元件(凸出元件)，各凸出元件包括构成相对于水平面倾斜的斜面的一部分；——与一狭道相连的一个开口，该开口在掩模片的整个厚度上从掩模片上表面的一个上部孔到一个下部孔横过所述掩模片，所述下部孔位于狭道斜面的最低点附近的狭道中；所述掩模片是这样的，即其包含的一个或多个狭道能够通过毛细作用将加载入每个开口并要沉积在分析用载体上的试剂保持在所述狭道和所述分析用载体的表面之间，所述掩模片朝向该表面放置。用在本专利技术中的术语“掩模片”通常表示一块板，该板被设计成允许对准分析用载体上的划定区域定位，如果必须与相关的装置相结合，其中当试剂被加载到掩模片中并与划定区域接触时，试剂必须被沉积并分布。本专利技术的掩模片的尺寸是这样的，即，当操作时掩模片与分析用载体紧邻时，其不会覆盖分析用载体的整个表面，加载在掩模片上的试剂被沉积并分布于载体上。特别是掩模片的宽度(包括其狭道的长度)小于分析用载体的电泳迁移狭道的长度，这是由于掩模片的狭道的长度小于分析用载体的电泳迁移狭道的长度。试剂在这些狭道上的分布是由于此后所述的掩模片在分析用载体上的移动引起的，而且是由于试剂在所述载体上的移动而引起的——这是作为掩模片狭道结构所可以产生的结果。本专利技术的掩模片可以在分析用载体上方移动，为的是分布试剂。所述开口被指定为“与各狭道相连”，在本专利技术的上下文中这指的是如此设定其下部孔，以便将加载到掩模片的开口中的试剂供给到狭道的斜面上，以允许试剂被沉积到分析用载体上，并且以便通过毛细作用而将试剂保持在载体和狭道之间，并在掩模片移动期间将试剂分布在分析用载体上。所述开口例如是一个垂直于掩模片上表面的孔，从一侧到另一侧横穿掩模片。所述开口的下部孔优选地位于邻近斜面的最低点处的斜面中。通过位于狭道斜面——相对于水平面——的最低点的“附近”本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种掩模片，用于将试剂沉积并分布于一用于生物样本的分析用载体上，其包括：－－至少部分相互平行的一下表面和一上表面，彼此间隔开一构成所述掩模片厚度的距离；－－位于所述掩模片下表面水平上的一个或多个限定区域（狭道），其包括一从所述掩模片 的下表面凸出的部件（３２）（凸出部件），每个凸出部件包括一部分－－其构成相对于水平面倾斜的斜面；－－与一狭道相连的一开口，其从所述掩模片的上表面上的一上部孔（３６）穿过所述掩模片的整个厚度通到一下部孔（３４），所述下部孔位于所述狭道中， 在所述狭道斜面的最低点附近；所述掩模片是这样的，其包括的一个或多个狭道可以将载入每个开口中的且借助毛细作用沉积在所述分析用载体上的试剂保持在所述狭道和所述分析用载体的表面之间，朝着所述表面放置着所述掩模片。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：弗兰克贝隆，
申请(专利权)人：莎碧亚公司，
类型：发明
国别省市：FR[法国]