快速检测哈氏弧菌的试剂盒及检测方法技术

一种快速检测哈氏弧菌的试剂盒，包括：　　　　（ａ）ＤＮＡ提取试剂：含缓冲试剂Ａ和细胞裂解试剂Ｂ，　　　　试剂Ａ含有ＮａＣｌ０．１－０．３Ｍ、ｐＨ８．０的三羟基甲基氨基甲烷１－１００ｍＭ、ｐＨ８．０的乙二胺四乙酸０．１－１０ｍＭ和Ｖ／Ｖ浓度为０－２０％的曲拉通Ｘ－１００；　　　　试剂Ｂ含有浓度为１－１０ｍｇ／ｍｌ的溶菌酶和ｐＨ８．０、浓度为１－１００ｍＭ三羟基甲基氨基甲烷；　　　　（ｂ）聚合酶链式反应试剂：包括反应预混试剂Ｃ和反应引物试剂Ｄ，　　　　试剂Ｃ含有１０倍聚合酶链式反应缓冲液、热聚合酶和灭菌双蒸水，含量分别为２．５－５．０μｌ、０．５－２．５个单位和１８－３５．５μｌ；　　　　试剂Ｄ：包括特异引物对ＶＰ↓［０１］和ＶＰ↓［０２］、ｄＮＴＰ（四种脱氧核苷酸的混合物）及ＭｇＣｌ↓［２］，含量分别为０．２－１μＭ和０．２－１μＭ、２０－２００μＭ及０．５－１０ｍＭ；　　　　ＶＰ↓［０１］特指５′－ＧＣＡＣＣＡＴＧＧＧＴＴＡＡＡＡＧＣＣＧＣＴ；ＶＰ↓［０２］特指５′－ＡＧＡＧＡＡＣＴＧＡＣＧＣＡＣＡＡＣＧ　　ＴＧＧＴＴＣ　　　　（ｃ）电泳和显色试剂，包括试剂Ｅ和试剂Ｆ，　　　　试剂Ｅ：为５０倍电泳缓冲液，含三羟基甲基氨基甲烷－乙酸和乙二胺四乙酸，浓度分别为０．０４Ｍ和０．００１Ｍ；　　　　试剂Ｆ：含Ｗ／Ｖ为０．８－２％的琼脂糖和０．５－２０μｇ／ｍｌ溴乙锭。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种快速检测哈氏弧菌的试剂盒，进一步涉及使用快速检测哈氏弧菌的试剂盒快速测检哈氏弧菌的方法。
技术介绍
近年来，我国海水养殖业迅猛发展，在过去10年间海水养殖产量增加了5-6倍。但是，前阶段海水养殖的大发展带有很大的盲目性、甚至破坏性，导致这两年海水养殖产量增长开始放缓，尤其是病害的问题变的愈来愈严重。其中弧菌病是危害养殖鱼虾贝藻类等多种海水养殖生物的重要病原之一。弧菌是海洋起源的土著细菌，在海水和海洋生物中广为分布；病原性弧菌能引起养殖生物爆发性死亡，而且可以与病毒，其它细菌或寄生虫等一起造成共同感染。在我国海水养殖生物中，哈氏弧菌是最常见的病原性弧菌之一，每年由哈氏弧菌造成的损失十分巨大。当前的弧菌病原检测技术主要有以下几种1，常规生化检测技术，它是将纯化后的细菌接种到含不同生化物质的培养基中，由于不同种的细菌代谢的物质不完全相同，与培养基中显色剂反应的结果也不同，将这些结果与标准菌株和文献记录结果对照，就可以得出结论。(参考文献娄永新 王金良 主编《实用临床细菌学检验与进展》1992天津科技翻译出版公司)，这种方法结果比较准确但十分耗时，而且对新的种类的检测结果本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈偿，胡超群，
申请(专利权)人：中国科学院南海海洋研究所，
类型：发明
国别省市：