GABRD甲基化靶点在制备抗海洛因复吸药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种GABRD甲基化靶点在制备抗海洛因复吸药物中的应用，与现有技术相比，本发明专利技术的优点在于：本发明专利技术的DNA甲基转移酶抑制剂可以降低GABRD基因的甲基化水平，能够有效降低海洛因复吸行为，说明以GABRD甲基化为靶点的甲基转移酶抑制剂可以应用到治疗海洛因成瘾和复吸。

【技术实现步骤摘要】
GABRD甲基化靶点在制备抗海洛因复吸药物中的应用
本专利技术涉及一种GABRD甲基化靶点，尤其涉及一种以GABRD甲基化为靶点的甲基转移酶抑制剂在制备抗海洛因复吸药物中的应用。
技术介绍
阿片类药物成瘾尤其是海洛因成瘾导致巨大的医疗和经济危害。联合国毒品和犯罪问题办公室(UNODC)调查数据显示，在全球范围内，2018年全年破获毒品犯罪案件10.96万起，抓获犯罪嫌疑人13.74万名，缴获各类毒品67.9吨，海洛因成瘾人群仍然占取较大的比例，海洛因滥用形势严峻。海洛因长期激活阿片受体使阿片受体及非阿片受体系统发生代偿性适应，从而导致成瘾。长期慢性使用海洛因出现强烈的躯体依赖和精神依赖，由此产生对再次用药的强烈渴求，这种渴求是导致复吸率居高不下的主要原因。中脑腹侧被盖(VTA)到伏隔核(NAc)脑区多巴胺能系统是目前公认的药物奖赏的主要通路。NAc是大脑奖赏回路中的重要核团，伏隔核中的中型多棘神经元，会产生一种主要的中枢神经系统的抑制性神经递质γ-氨基丁酸(GABA)。其中A型GABA受体δ亚型(GABRD)基因被证明与癫痫、惊厥等疾病有关，并发现该基因的甲基化可能参与可卡因等药物的成瘾和复吸。因此对海洛因成瘾干预机制的研究和药物治疗靶点的筛选，有利于促进海洛因成瘾和复吸的预防与治疗。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对上述现有技术现状而提供一种以GABRD甲基化为靶点的甲基转移酶抑制剂在制备抗海洛因复吸药物中的应用。本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案为：以GABRD甲基化为靶点在制备抗海洛因复吸药物中的应用，其特征在于：所述药物可降低GABRD基因目的片段的甲基化水平。进一步地，所述以GABRD甲基化为靶点的甲基化转移酶抑制剂为化合物I，其结构式如下：进一步地，所述药物是以甲基化转移酶抑制剂为化合物I为活性成分，加上药学上可接受的辅料或者辅助性成分制备而成的制剂。进一步地，所述药物是注射药剂。与现有技术相比，本专利技术的优点在于：本专利技术的DNA甲基转移酶抑制剂是可以降低GABRD基因甲基化水平，能够有效减少海洛因复吸行为，说明甲基转移酶抑制剂可以应用到治疗海洛因成瘾，开发出以GABRD基因甲基化作为靶点治疗海洛因成瘾和复吸的药物。附图说明图1A为本专利技术的海洛因模型构建中有效鼻触和无效鼻触数记录(海洛因自身给药组Heroin组；生理盐水被动给药组Control组)；图1B为本专利技术的海洛因模型构建中注射针数记录(海洛因自身给药组Heroinself-administration组；海洛因被动给药组Yokeheroin组；生理盐水被动给药组Control组)；图2为本专利技术的GABRD候选片段及待测位点位置信息；图3为本专利技术的GABRD基因甲基化在海洛因自身给药组(Heroinself-administration组)，海洛因被动给药组(Yokeheroin组)和对照组(Control组)中的变化情况；图4为本专利技术的GABRD基因中CG3测试位点在海洛因自身给药组中甲基化水平显著降低的结果图；图5为本专利技术的GABRD基因中CG4测试位点在海洛因自身给药组中甲基化水平显著降低的结果图；图6为本专利技术的GABRD基因中CG5测试位点在海洛因自身给药组中甲基化水平显著降低的结果图；图7为本专利技术的GABRD在海洛因自身给药组(Heroinself-administration组)，海洛因被动给药组(Yokeheroin组)和对照组(Control组)中mRNA表达情况；图8为本专利技术的GABRD在海洛因自身给药组(Heroinself-administration组)，海洛因被动给药组(Yokeheroin组)和对照组(Control组)蛋白表达情况；图9为GABRD基因候选片段以及片段甲基化功能验证结果图(Pro即pGL3-promoter质粒，F-luc:Fireflyluciferase萤火虫荧光素酶；R-Luc:Renillaluciferase海肾荧光素酶；Pro:pGL3-promoter空载对照组；Pro-GABRD:GABRD插入组pGL3-promoter-GABRD；Me-Pro-GABRD:甲基化处理的GABRD插入组即pGL3-promoter-GABRD甲基化处理组；图10为本专利技术的外周注射甲基化转移酶抑制剂5’AZA对大鼠海洛因自身给药消退后海洛因引燃的复吸行为的影响(Active：有效鼻触反应数；Inactive：无效鼻触反应数；Heroin：海洛因；SAL：生理盐水；5’AZA：5-氮杂-2'-脱氧胞嘧啶核苷，5-aza-2-deoxycytidine)；图11为本专利技术的外周注射甲基化转移酶抑制剂5’AZA对大鼠条海洛因自身给药消退后条件性线索诱导复吸行为的影响(Active：有效鼻触反应数；Inactive：无效鼻触反应数；Heroin：海洛因；SAL：生理盐水；5’AZA：5-氮杂-2'-脱氧胞嘧啶核苷，5-aza-2-deoxycytidine)；图12为本专利技术的NAc脑区微注射甲基化转移酶抑制剂5’AZA对大鼠海洛因引燃的复吸行为的影响(Active：有效鼻触反应数；Inactive：无效鼻触反应数；Her：海洛因，Heroin；Sal:生理盐水，Saline；aCSF：溶媒剂；5’AZA：5-氮杂-2'-脱氧胞嘧啶核苷，5-aza-2-deoxycytidine)；图13为本专利技术的NAc脑区微注射甲基化转移酶抑制剂5’AZA对NAc脑区GABRD基因甲基化的影响(Her：海洛因，Heroin；Sal:生理盐水，Saline；aCSF：溶媒剂；5’AZA：5-氮杂-2'-脱氧胞嘧啶核苷，5-aza-2-deoxycytidine)；图14为本专利技术的NAc脑区注射甲基化转移酶抑制剂5’AZA对GABRD蛋白表达的影响(Her：海洛因，Heroin；Sal:生理盐水，Saline；aCSF：溶媒剂；5’AZA：5-氮杂-2'-脱氧胞嘧啶核苷，5-aza-2-deoxycytidine)。具体实施方式以下结合附图实施例对本专利技术作进一步详细描述。本专利技术实施例中使用的海洛因纯度为98％，由公安部物证鉴定中心提供。实施例1海洛因静脉自身给药模型的建立静脉自身给药(IntravenousDrugSelf-Administration)是研究药物成瘾最经典的动物模型之一，静脉自身给药模型是反映用药者主动觅药和用药行为的经典动物模型，可以利用实验动物考察给药动机和主动强迫性用药行为。经典的大鼠海洛因自身给药模型可以很好的模拟临床上吸毒患者的海洛因吸食行为，大鼠经过训练可以产生对海洛因的自我给药，同时训练过程中不断上升的对海洛因的行为反应率和给药量可以反映吸毒患者从一开始接触海洛因到大量吸食海洛因成瘾的强迫性觅药行为。我们采用如下方法来建立大鼠的自身给药模型：首先，SD雄性大鼠本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种以GABRD甲基化为靶点的甲基化转移酶抑制剂5’AZA在制备抗海洛因复吸药物中的应用，其特征在于：所述药物是降低GABRD基因目的片段的甲基化水平。/n

【技术特征摘要】
1.一种以GABRD甲基化为靶点的甲基化转移酶抑制剂5’AZA在制备抗海洛因复吸药物中的应用，其特征在于：所述药物是降低GABRD基因目的片段的甲基化水平。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述以GABRD甲基化为靶点的甲基化转移酶抑制剂为化合物I，...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘惠芬，洪青晓，徐文锦，刘婧，陈为升，朱华强，赖苗军，周文华，
申请(专利权)人：宁波市微循环与莨菪类药研究所，
类型：发明
国别省市：浙江;33