人体血液中微量乙醇的气相色谱分析方法技术

本发明专利技术公开了一种人体血液中微量乙醇的气相色谱分析方法。该方法选择色谱级二乙烯基苯多孔聚合物固定相，或者选择担载５％甲基聚硅氧烷的白色硅藻土固定相和色谱级二乙烯基苯多孔聚合物固定相两种固定相，制备色谱柱；控制色谱条件为柱温：１５０℃；汽化室温度：１５０℃；ＦＩＤ检测器温度：１６０℃；载气流量：２２ｍｌ／ｍｉｎ；柱前压：０．１４ＭＰａ；氢气：４２ｍｌ／ｍｉｎ；空气：２７０ｍｌ／ｍｉｎ；进样方式：柱上进样；进样量：０．５－５μｌ；对人体血液中微量乙醇进行气相色谱分析。本发明专利技术操作简便，准确度高，不需要对血样进行特殊处理，数分钟内即可完成从采样、预处理、样品进样与分析步骤。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种。
技术介绍
酒后驾车是城市交通安全的重要隐患之一，所以人体血液中乙醇(酒精)的准确定量检测显得非常重要。乙醇通过人体消化系统进入血液遍及全身各组织，对人体的作用主要是麻痹和抑制中枢神经系统，而作用的强弱与血液中乙醇含量密切相关。由于饮食和代谢的复杂过程，在没有饮酒的常人血液中有时也可检测出微量乙醇。因此欧美许多国家对驾驶员血液中乙醇浓度最低限都制定有法定标准，一般在50-80mg/100ml。我国现行法规严令禁止酒后驾车，凡发现驾驶员有酒精反应，均可按酒后驾车予以处罚，然而，若没有血液中乙醇浓度数据则缺乏判罚依据，常引起争议，因此建立血液中乙醇快速准确且适合中国仪器设备情况的分析方法具有实际意义。目前检验驾驶员是否饮酒有两类方法，第一类是检验吹(或哈)气中乙醇含量的，主要有以下几种方法1)车载式酒精浓度控制器，在确认驾驶员呼气中乙醇含量合格时才接通电路启动车辆；2)利用化学反应使乙醇和显色剂作用(如将黄色的六价铬还原成蓝色的三价铬)，使乙醇呼气检测管显色的小型测试器，根据显色不同与标准比色卡进行比较确定乙醇大致浓度范围；3)采用半导体(多数是二氧化锡)作为气敏元件测量酒精的便携式酒精测试仪；4)利用燃料电池作传感器的便携式检测仪。其中前两种方法普遍存在测量值不稳定、可靠性差、测量误差大等缺点，只能定性不能定量，检测结果易出现假阳性而不能普遍使用；便携式半导体酒精测试仪的气敏元件易受其它气体干扰，尤其是对湿度非常敏感，很难排除影响，而且其比较短的输出衰落周期和相对较小的线性区段，使得它测量准确性差，线性和稳定性也不能完全达到要求，近年来各国也相继取消用这种设备来检测酒后驾车；以燃料电池作传感器的酒精检测仪，由于其具有良好的线性和很高的精密度，作为计量检测设备为世界各国所采用，然这种进口产品，价格昂贵，还需要经常校准，校准周期为一至六个月，为使结果达到较高的精度，必须保证每次采样体积一致，并且由于燃料电池的特性，在连续测量时输出数据有下降现象。以上方法都是检测吹气中的乙醇含量，再由吹气中乙醇含量推算血醇浓度。由吹气中的乙醇含量推算血醇浓度，受温度、湿度、吹气压力和吹气量等因素、以及人的个体差异，特别是饮酒后在体内的消化时间长短的影响，准确度和稳定性不高，只可做为可疑饮酒者的预备检验，其结论不具备法律效力。第二类是气相色谱法，可测定乙醇在血液中的浓度，是较为准确的方法，按其血样的处理方法又可分为顶空法，溶剂萃取法，沉淀蛋白法，稀释法等。其中顶空法报道最多，该法不引入干扰物质，但定量准确性较多依赖于顶空设备的自动化程度，简易设备往往定量准确性较差。溶剂萃取法设备简单，但要引入溶剂，易造成干扰和色谱分离上的困难，浓缩时也易造成乙醇损失。沉淀蛋白法是将离心分离后的血液上清液再加入试剂，以沉淀其中的蛋白，目的是保护色谱柱，方法较简便，但引入的试剂也可能造成干扰或污染色谱系统。稀释法因稀释了血液，降低了血样对进样系统和色谱柱的污染，但同时会降低方法的灵敏度。
技术实现思路
本专利技术的目的就是为了解决现有技术中存在的不足之处，提供一种。本专利技术通过如下措施来实现本专利技术的思路是要求分析方法操作简便，准确度高，不需要对血样进行特殊处理，数分钟内即可完成从采样、预处理、样品进样与分析步骤。一种，其特征在于抽取人体血样0.5微升～2毫升于含抗凝剂的针或容器中；选择色谱级二乙烯基苯多孔聚合物固定相，或者选择担载5％甲基聚硅氧烷的白色硅藻土固定相和色谱级二乙烯基苯多孔聚合物固定相两种固定相，制备色谱柱；控制色谱条件为柱温150℃；汽化室温度150℃；FID检测器温度160℃；载气流量22ml/min；柱前压0.14MPa；氢气42ml/min；空气270ml/min；进样方式柱上进样；进样量0.5-5μl；对人体血液中微量乙醇进行气相色谱分析。以上所述“担载5％甲基聚硅氧烷的白色硅藻土固定相”制备过程为将5份重量的甲基聚硅氧烷溶解于与100份重量白色硅藻土担体等体积的二氯甲烷中，再将100份重量粒度80～140目的白色硅藻土担体浸入溶液，待溶剂自然挥发使甲基聚硅氧烷均匀地涂布在白色硅藻土担体上，制成担载5％甲基聚硅氧烷的白色硅藻土固定相。本专利技术所说的色谱柱总柱长0.6～2米，外径φ1～4毫米。本专利技术制备色谱柱的固定相可以单一选择色谱级二乙烯基苯多孔聚合物固定相，填充到玻璃或不锈钢管中制备色谱柱；同样地也可以选择担载5％甲基聚硅氧烷的白色硅藻土固定相和色谱级二乙烯基苯多孔聚合物固定相制备色谱柱，其中担载5％甲基聚硅氧烷的白色硅藻土固定相填充柱头部分8～15厘米，其余部分填充色谱级二乙烯基苯多孔聚合物固定相。本专利技术所用的载气选自N2，H2，He，Ar中任意一种气体。本专利技术所述血液抗凝剂，选自医用商品肝素或者枸橼酸钠溶液。为进一步说明本专利技术，现进行更加详细的描述本专利技术涉及色谱分析仪器系统和血样分析方法两个部分。色谱分析仪器系统由装有色谱柱的气相色谱仪及数据处理机或色谱工作站构成；血样分析方法包括血样采集处理和将样品注入分析系统分析两个步骤。一.色谱分析仪器系统本专利技术所述色谱分析仪器系统为装配有填充柱进样口和氢火焰离子化检测器(FID)或光离子化检测器(PID)的常规或微型气相色谱仪，色谱炉内装有本专利技术所提及的色谱柱。色谱数据由数据处理机或色谱工作站计算处理。1)色谱柱制备将5份重量的甲基聚硅氧烷溶解于与100份重量白色硅藻土担体等体积的二氯甲烷中，再将100份重量粒度80～140目的白色硅藻土担体浸入溶液，待溶剂自然挥发使甲基聚硅氧烷均匀地涂布在白色硅藻土担体上，制成担载5％甲基聚硅氧烷的白色硅藻土固定相。单一选择色谱级二乙烯基苯多孔聚合物固定相，填充到玻璃或不锈钢管中制备成色谱柱；同样地也可以选择担载5％甲基聚硅氧烷的白色硅藻土固定相和色谱级二乙烯基苯多孔聚合物固定相制备成色谱柱，担载5％甲基聚硅氧烷的白色硅藻土固定相填充柱头部分8～15厘米，其余部分填充色谱级二乙烯基苯多孔聚合物固定相。色谱柱总柱长0.6～2米，外径φ1～4毫米。两种色谱柱性能一致，通过更换柱头部分担载5％甲基聚硅氧烷的白色硅藻土固定相可以延长专用色谱柱寿命。2)色谱柱老化在色谱柱中通N2，H2，He，Ar中任意一种气体，流量10～50ml/分钟，程序升温50℃保持5分钟，以10℃/min升温至100℃(保持5分钟)，以5℃/min升温至150℃(保持5分钟)，再以2℃/min升温至250℃(保持60～120分钟)。3)色谱条件柱温150℃(恒温)；汽化室温度150℃；FID检测器温度160℃；载气(N2，H2，He，Ar中任意一种气体)流量22ml/min；柱前压0.14MPa；氢气42ml/min；空气270ml/min；进样方式柱上进样；进样量0.5-5μl。二.血样分析方法1)取一滴人指尖血或耳垂血可进行单次快速分析，如需进行多次分析，并需留样以备复检，则需静脉抽取血样1～2毫升。分述如下a.以1～5微升的微量进样器抽/排常规血液抗凝剂溶液(如肝素、枸橼酸钠溶液等)数次，使针管内部表面有极薄一层抗凝剂；以1～5微升微量进样器取一滴人指尖血或耳垂血中0.5～5微升，直接注入已准备好的气相色谱仪进样口中进行分析，进样后微量进样器继续抽/本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人体血液中微量乙醇的气相色谱分析方法，其特征在于抽取人体血样０．５微升～２毫升于含抗凝剂的针或容器中；选择色谱级二乙烯基苯多孔聚合物固定相，或者选择担载５％甲基聚硅氧烷的白色硅藻土固定相和色谱级二乙烯基苯多孔聚合物固定相两种固定相，制备色谱柱；控制色谱条件为柱温：１５０℃；汽化室温度：１５０℃；ＦＩＤ检测器温度：１６０℃；载气流量：２２ｍｌ／ｍｉｎ；柱前压：０．１４ＭＰａ；氢气：４２ｍｌ／ｍｉｎ；空气：２７０ｍｌ／ｍｉｎ；进样方式：柱上进样；进样量：０．５－５μｌ；对人体血液中微量乙醇进行气相色谱分析。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：梁冰，李辰，
申请(专利权)人：中国科学院兰州化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：62[中国|甘肃]