测定制造技术

本发明专利技术提供用于检测样品中感兴趣的被分析物的测定试剂盒。该试剂盒包括ａ）报道物；ｂ）具有第一和第二结合区的被标记物，其中第一结合区能够与感兴趣的被分析物结合，第二结合区能够与报道物结合；ｃ）能够与被标记物的第一结合区结合的固定化物；和ｄ）能够与报道物结合的固定化捕获剂。布置为使得样品接触被标记物，然后接触固定化物，随后接触固定化捕获剂，在样品暴露于固定化捕获剂之前加入报道物。如果样品中没有被分析物，则被标记物与固定化物结合并因此不能与固定化捕获剂结合。如果样品中有被分析物，则被分析物与被标记物结合，使得被标记物不能与固定化物结合，但是可以借助于报道物与固定化捕获剂结合，从而通过借助于报道物与固定化捕获剂结合的被标记物的存在而测定被分析物的存在。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及测定装置(assay device)，具体地而非排他地，涉及侧流测定装置，和它们在检测样品中是否存在被分析物的应用，所述被分析物具体地而非排他地为半抗原。用于检测样品中半抗原的存在和/或含量的侧流免疫测定装置是已知的，例如由EP291194公开。由于半抗原物质体积小，其中捕获剂(capture reagent)特异性结合在被分析物的两个不同表位上的夹心式捕获剂类型的结合反应是不可能的。代之以采用其中使样品中的被分析物与另一种物质(通常为相同的被分析物)竞争被标记的捕获剂的竞争反应。通常，侧流载体包括含颗粒被标记试剂的试剂区；和位于试剂区下游的包括固定化物的检测区。在没有被分析物时，被标记试剂在检测区结合，产生可检测信号。在通常在试剂区的上游被加入的样品中被分析物的存在下，被标记试剂能够优先与被分析物结合，从而不能在检测区结合。因此，在检测区形成的信号随着被分析物浓度的增加而减少。对于半定量的是-非可视读数测定，以这种方式提供结果可能引起使用者的混淆或不确定性。为了避免这种不确定性，这种免疫测定的制造商已经在每个装置上印刷阳性和阴性结果看起来是什么样子的图片，以帮助使用者判读结果。通常，这种测定的使用者，例如用于检测某些药物滥用，将是实验室技术人员。然而，药物滥用的增加使得这种测定越来越多地被未经培训的个体使用。因此，判读结果的容易程度显得非常重要。美国专利5451504和5874216公开了其中在检测区形成的信号随着被分析物浓度的增加而增加的半抗原检测用免疫测定法。仍需要用于检测样品中被分析物的存在的替代/改善的方法，其中产生的信号随着被分析物浓度的增加而增加。根据第一方面，本专利技术提供了用于检测样品中感兴趣的被分析物的测定试剂盒，其包括a)报道物；b)具有第一和第二结合区的被标记物，其中第一结合区能够与感兴趣的被分析物结合，第二结合区能够与报道物结合；c)能够与被标记物的第一结合区结合的固定化物；和d)能够与报道物结合的固定化捕获剂，布置为使得样品接触被标记物，然后接触固定化物，随后接触固定化捕获剂，在样品暴露于固定化捕获剂之前加入报道物，其中，如果样品中没有被分析物，则被标记物与固定化物结合并因此不能与固定化捕获剂结合；并且其中，如果样品中有被分析物，则被分析物与被标记物结合，使得被标记物不能与固定化物结合，但是可以借助于报道物与固定化捕获剂结合，从而通过借助于报道物与固定化捕获剂结合的被标记物的存在而测定被分析物的存在。固定化物可以在截留区中被提供，而固定化捕获剂可以在独立的检测区中被提供，样品从截留区移动到检测区。被标记物可以在位于截留区上游的试剂区中被提供。在向试剂区施加样品之后，被标记物可在样品中移动并且能够与样品中如果存在的感兴趣的被分析物结合，并且进一步能够移动到截留区和随后移动到检测区。报道物、被标记物、固定化物和固定化捕获剂可以在底物上和/或底物中被提供，其可为侧流载体。报道物可以是可移动的，并且可存在于检测区上游的底物上。在一个实施方案中，报道物在试剂区或其上游被提供。在另一个实施方案中，报道物在截留区被提供。被标记物的第一和第二结合区能够分别特异性结合感兴趣的被分析物和报道物，固定化物能够特异性结合被标记物的第一结合区，固定化捕获剂能够特异性结合报道物。根据第二方面，本专利技术提供侧流载体免疫测定装置，其包括a)具有可移动性被标记物的试剂区，可移动性被标记物具有第一和第二结合区，其中第一结合区是感兴趣的被分析物特异性的，第二结合区是报道物特异性的；b)位于试剂区或其下游的截留区，截留区包括待检测的固定化的感兴趣的被分析物；c)位于截留区下游的检测区，检测区包括报道物特异性的固定化捕获剂；和d)位于检测区上游的可移动性报道物。根据第三方面，本专利技术提供用于检测样品中感兴趣的被分析物的存在的方法，该方法包括使样品接触具有第一和第二结合区的被标记物，其中第一结合区能够与感兴趣的被分析物结合，第二结合区能够与报道物结合；使样品接触能够与被标记物的第一结合区结合的固定化物；随后使样品接触能够与报道物结合的固定化捕获剂；其中在样品接触固定化捕获剂之前加入报道物，并且其中如果样品中没有被分析物，则被标记物与固定化物结合并因此不能借助于报道物与固定化捕获剂结合；并且其中如果样品中有被分析物，则被分析物与被标记物结合，使得被标记物不能与固定化物结合，但是可以借助于报道物与固定化捕获剂结合，从而通过借助于报道物与固定化捕获剂结合的被标记物的存在而测定被分析物的存在。样品可以在暴露于检测区之前暴露于截留区下，所述检测区存在于具有固定化捕获剂的底物上，所述截留区存在于具有固定化物的底物上。本专利技术第三方面的方法可包括使样品暴露于试剂区，所述试剂区存在于具有被标记物的底物上。当样品接触试剂区时，被标记物可在样品中移动，然后移动的被标记物能够与样品中感兴趣的被分析物(如果存在)结合。本专利技术第三方面的方法可包括将被怀疑含有感兴趣的被分析物的样品加入到包括可移动性报道物、可移动性被标记物、固定化物、和固定化捕获剂的底物中的单一步骤。或者，报道物和/或被标记物在施加于底物之前可以被加入到样品中。根据另外的方面，本专利技术提供用于半抗原的阳性检测的方法，其中将流体样品加入到侧流载体中，于是，如果存在被分析物，则形成与可移动性被标记物结合的第一结合复合物。可移动性被标记物在形成被分析物复合物之前或之后也经历与报道物的特异性结合反应，所述报道物随后渗透到检测区中，于是，该报道物被报道物特异性固定化捕获剂所捕获。可以测定存在于检测区中的被标记试剂或使其显像，以提供被分析物存在的指示。当没有被分析物时，可移动性被标记物与报道物形成结合复合物。该复合物随后被截留区所捕获并因此不能渗透到检测区中。根据另一个方面，本专利技术提供本专利技术的测定试剂盒或装置用于在检测样品中被分析物的应用。本专利技术提供用于检测样品中被分析物的测定试剂盒或装置，其中产生的信号随着样品中被分析物浓度的增加而成比例地增加。样品可为流体，如液体，例如取自受试者的体液，或为来源于固体的液体。该鉴定试剂或其它试剂可用于从固体得到液体样品。测定试剂盒或装置可包括材料的单一连续条带，在该材料上适当地布置有分割区，使得样品的流向为从试剂区(如果存在)到截留区，直到检测区。或者，测定装置可包括单独的室，这些单独的室指定为用于执行试剂区、截留区和检测区中每一个区的指定功能；和将每个室的产物转移到下一个室中的装置。所述各区是指相同或不同材料的单独区段(section)。这些区段可部分或完全地彼此重叠，使得样品能够从一个区段通到另一个区段。在具有良好释放特征的材料的一个或多个区段上可提供可移动性试剂(即，使试剂能够再悬浮在样品中并且能够沿着材料或通过材料渗透)，并且可以在一个或多个具有良好结合特征的区段上提供固定化试剂。所述区段可在使用之前经过处理，以增强或降低它们的结合和/或释放特征。具有良好释放特征的材料的例子为玻璃纤维，具有良好结合特征的材料的例子为硝化纤维。这种处理和材料在EP291194和EP383619中描述。本专利技术某些实施方案的侧流载体可选自适当的多孔载体，如硝化纤维。或者，可使用允许样品移动通过截留区和检测区的任何适当的材料。另外，侧流载体可由强本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于检测样品中感兴趣的被分析物的测定试剂盒，其包括：　　　　ａ）报道物；　　　　ｂ）具有第一和第二结合区的被标记物，其中第一结合区能够与感兴趣的被分析物结合，第二结合区能够与报道物结合；　　　　ｃ）能够与被标记物的第一结合区结合的固定化物；和　　　　ｄ）能够与报道物结合的固定化捕获剂，　　　　布置为使得样品接触被标记物，然后接触固定化物，随后接触固定化捕获剂，在样品暴露于固定化捕获剂之前加入报道物，　　　　其中，如果样品中没有被分析物，则被标记物与固定化物结合并因此不能与固定化捕获剂结合；并且其中，如果样品中有被分析物，则被分析物与被标记物结合，使得被标记物不能与固定化物结合，但是可以借助于报道物与固定化捕获剂结合，从而通过借助于报道物与固定化捕获剂结合的被标记物的存在而测定被分析物的存在。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：巴比尔拉伊，
申请(专利权)人：因弗因斯医药瑞士股份有限公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]