大肠杆菌菌毛多克隆抗体及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种大肠杆菌菌毛多克隆抗体及其制备方法与应用，其目的是提供一种大肠杆菌菌毛多克隆抗体及其制备方法与其在检测大肠杆菌中的应用。该制备方法包括以下步骤：１）分离出大肠杆菌；２）感作离心后得到大肠杆菌菌毛抗原；３）将大肠杆菌菌毛抗原免疫动物；４）从经免疫的动物中分离、纯化抗血清，得到大肠杆菌菌毛多克隆抗体。用本发明专利技术方法制备的大肠杆菌菌毛多克隆抗体具有特异性高，纯度及效价高（大于６４００），可长期保存的优点，将其用于环境及食品检测领域中大肠杆菌的免疫检测中，将具有精确性、灵敏度高和检测步骤少的优势，应用前景广阔。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及抗体及其制备方法与应用，特别是涉及环境检测领域中的一种大肠杆菌菌毛多克隆抗体及其制备方法与其在检测大肠杆菌中的应用。
技术介绍
大肠杆菌是环境水质监测和食品安全中一种重要的指示微生物。目前，世界各国及国际组织都将大肠菌群数作为重要的环境卫生学指标，并对其在水中的浓度提出了严格的限制。世界卫生组织《饮用水水质标准》(第二版)中规定，所有饮用水中的大肠杆菌或耐热大肠菌在任意100mL水样中不得检出；现行美国饮用水水质标准国家一级饮用水标准规定总大肠杆菌(包括粪型及艾氏大肠菌)为0mg/L；中华人民共和国国家标准《生活饮用水水质卫生规范》中规定总大肠菌群及粪大肠菌群在任意100mL水样中不得检出。目前，国际上公认的大肠菌群标准检测方法以多管发酵法和滤膜法为主。我国在水和食品卫生检验标准中规定的大肠菌群数的检测方法也是多管发酵法和滤膜法。但是这两种检测方法都存在检测周期长，操作繁琐的缺点，因而难以实现对污染源的快速诊断。近年来，世界各国针对水环境和食品中大肠杆菌的快速检测进行了大量的研究工作，其中基于免疫技术原理的ELISA检测方法呈现出了良好的应用前景。免疫检测技术是利用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大肠杆菌菌毛多克隆抗体的制备方法，包括以下步骤：１）分离出大肠杆菌，具体方法为：先将样品接种于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上在３６－３８℃下培养１２－３６小时，再将在牛肉膏蛋白胨固体培养基长出的菌落涂布于品红亚硫酸钠培养基上在３６－３ ８℃下培养２４－４８小时，接着挑取在品红亚硫酸钠培养基上长出的紫红色带金属光泽的单菌落，再次接种于品红亚硫酸钠培养基上在３６－３８℃下培养２４－４８小时，然后挑取紫红色带金属光泽的单菌落，接种于添加了质量百分浓度为１．４－１．８％溴甲酚紫的乳糖蛋白胨培养基中在３６－３８℃下培养１２－３６小时，待乳糖蛋白胨培养基中的紫色褪去，将菌液接种于牛肉膏蛋白胨琼...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：何苗，王娜，施汉昌，蔡强，
申请(专利权)人：清华大学，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]