靶向部分修饰的溶瘤病毒制造技术

本发明专利技术提供了用于治疗癌症的组合物和方法，其包括包含溶瘤病毒和在病毒表面上的靶向部分的组合物，其中所述溶瘤病毒在各个方面不编码或表达所述靶向部分，所述组合物和方法可用于治疗多种癌症(例如，胃肠癌，如食道癌，胃癌和结肠癌)。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】靶向部分修饰的溶瘤病毒相关申请的交叉引用本专利申请根据35U.S.C.§119(e)要求2017年11月16日提交的美国临时专利申请号62/587,103的权益，所述申请通过引用整体并入本文用于所有目的。专利
本专利技术一般涉及在其表面上具有靶向部分的溶瘤病毒。对序列表、表格或计算机程序的参考序列表的正式副本与作为ASCII格式文本文件的说明书通过EFS-Web同时提交，文件名为“VIRO405_ST25.txt”，创建日期为2017年11月16日，大小为4.30KB。通过EFS-Web提交的序列表是说明书的一部分，并通过引用将其整体并入本文。背景溶瘤病毒疗法已经被认为是用于癌症治疗的有前景的新治疗方法，因为溶瘤病毒引起强的肿瘤溶瘤并诱导全身肿瘤特异性免疫，同时引起比化学疗法或放射疗法治疗显著更少的副作用。在各种OV中，基于单纯疱疹病毒1型(“HSV-1”)的OV是最先进的，例如，基于疱疹病毒的OV(T-Vec)已经被美国FDA批准用于治疗黑色素瘤。HSV载体的代表性实例包括美国专利号7,223,593、7,537,924、7,063,835、7,063,851、7,118,755、8,277,818和8,680,068中所述的那些。然而，治疗癌症的一个难题是直接靶向和杀死癌症，而不靶向和杀死其它非癌组织和细胞的能力。为满足这种需要而开发的一种方法是减毒溶瘤病毒，例如通过缺失或改变某些病毒基因或基因区域，从而使病毒更安全和更具癌症特异性。已开发用于制备更具癌症特异性的溶瘤病毒的其它方法包括例如：1)转导靶向(例如，修饰病毒衣壳蛋白以特异性靶向癌细胞，同时降低进入非癌细胞的可能性)；和2)非转导靶向(例如，修饰病毒基因组以仅在癌细胞中复制，或转录控制病毒基因组的关键部分以仅在癌症中复制，例如在肿瘤特异性启动子的控制下)。然而，靶向特定癌细胞群的一个难题是，在临床环境中自身存在的癌症很少作为单一单克隆群存在(参见。例如，Shen，MichaelM.“Thecomplexseedsofmetastasis：Analysesofprostate-cancermetastasesrevealacomplexcellulararchitecture，andshowthatsecondarysitescanbeseededbymultiplecellpopulationsderivedfromboththeprimarytumorandothermetastases.”Nature，vol.520，no.7547，2015)。因此，虽然可能靶向肿瘤细胞的单克隆群，但在临床环境中，这样的治疗只能达到有限的成功。本专利技术克服了目前商业溶瘤病毒的缺点，并进一步提供了其他预料不到的益处。在
技术介绍
部分中讨论的所有主题不一定是现有技术，并且不应该仅仅因为其在
技术介绍
部分中讨论就被认为是现有技术。按照这些方式，在
技术介绍
部分中讨论的现有技术中或与这种主题相关的问题的任何认识不应被视为现有技术，除非明确地陈述为现有技术。相反，在
技术介绍
部分中对任何主题的讨论应当被视为专利技术人对特定问题的方法的一部分，这本身也可能是有创造性的。
技术实现思路
简而言之，本专利技术提供了用溶瘤病毒治疗癌症的组合物和方法，其利用了一种新的策略，即仅为病毒复制的第一周期提供OV的特异性靶向，然后允许OV的后代根据其如何(或已经)被遗传构建而在细胞中复制。例如，第一代OV可以被构建成在其表面上用靶向部分修饰(如下面更详细描述的)。不表达靶向部分的后代OV将根据OV的遗传特性在细胞中靶向和复制。本文所述的技术可与多种不同的溶瘤病毒一起使用，包括例如腺病毒、单纯疱疹病毒(HSV)、流感病毒、弹状病毒(例如水疱性口炎病毒(VSV))和痘病毒如牛痘病毒。在本专利技术的一个实施方案中，靶向部分是与包膜蛋白结合的肿瘤抗原特异性多肽或抗体。在某些实施方案中，包膜蛋白不负责OV感染(例如，在HSV、gC或gG的情况下)。在替代实施方案中，包膜蛋白(至少部分)负责OV感染(例如，在HSV、gD的情况下)。例如，包膜蛋白可与体外肿瘤特异性抗体结合(通过本文所述的技术)以产生用于肿瘤靶向的抗体修饰的oHSV。这种策略的一个关键优点在于其通用性，这是因为基于个体患者高度表达的细胞表面蛋白，可以将oHSV与针对每种不同肿瘤的任何肿瘤特异性抗体组合，这为每位患者提供了更精确的靶向和更个人化的方法。此外，因为抗体不是在病毒基因组中遗传编码的，所以来自最初感染的肿瘤细胞的子代病毒不仅仅限于带有细胞表面标志物的肿瘤细胞，并且可以感染肿瘤块内的所有细胞，这将大大增强肿瘤破坏。另一种策略是使用双特异性抗体靶向OV包膜蛋白和肿瘤表面抗原。将双特异性抗体与OV混合，用抗体包被病毒表面，并引发病毒优先靶向肿瘤细胞。在肿瘤块中复制后，子代病毒也失去抗体并且不限于特定的肿瘤细胞靶标，因此允许更广泛的感染性范围以杀死各种肿瘤相关细胞。在本专利技术特别优选的实施方案中，通过工程化双特异性抗体以结合例如HSV糖蛋白D，从而通过改变gD介导的组织趋向性将病毒从其天然受体去靶向，可以进一步增强肿瘤靶向。使用抗-gD抗体的类似方法可用于在病毒已经被修饰以显示肿瘤特异性抗体之后使病毒更具癌症特异性。本
技术实现思路
已经被提供来以简化的形式介绍某些概念，这些概念将在下面的详细描述中进一步详细描述。除非另有明确说明，否则本
技术实现思路
不旨在标识所要求保护的主题的关键或必要特征，也不旨在限制所要求保护的主题的范围。在下面的描述中阐述了一个或多个实施方案的细节。结合一个示例性实施方案示出或描述的特征可以与其它实施方案的特征组合。因此，可组合本文所述的各实施方案中的任一者以提供其它实施方案。如果需要，可以修改实施方案的各方面，以采用如本文所标识的各专利，申请和出版物的概念来提供另外的实施方案。根据说明书，附图和权利要求书，其它特征，目的和优点将是显而易见的。附图的简要说明从附图和以下对各种实施方案的详细描述中，本公开的示例性特征，其性质和各种优点将是显而易见的。参考附图描述了非限制性和非穷举的实施方案，其中除非另有说明，否则在各个视图中相似的标记或参考数字表示类似的部分。附图中的元件的尺寸和相对位置不必按比例绘制。例如，选择，放大和定位各种元件的形状以提高图的可读性。为了易于在附图中识别，已经选择了所绘制的元件的特定形状。在下文中参考附图描述一个或多个实施方案，其中：图1图解说明了代表性的单一结构域抗体，重链抗体和传统抗体的比较。图2说明了可用于定量与oHSV结合的抗-gC-抗-CEACAM6双特异性抗体的量的代表性夹心ELISA测定。双特异性抗体与oHSV缀合的效率的定量可以通过将病毒裂解物施用于包被有抗-llama或抗-gG抗体的ELISA板，然后与检测探针孵育来进行。如考虑到本文所提供的公开内容所显而易见的，可类似地进行类似的ELISA测定以定量其它抗体(例如，双特异性抗体，其中抗体的一个方面结合选自gB、gC、gE、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.溶瘤病毒，其表达共价结合对的一个成员(CBP1)。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171116 US 62/587,1031.溶瘤病毒，其表达共价结合对的一个成员(CBP1)。


2.如权利要求1所述的溶瘤病毒，其中所述共价结合对的成员(CBP1)编码在病毒不负责感染或复制的区域内。


3.如权利要求2所述的溶瘤病毒，其中所述CBP1编码在不负责所述溶瘤病毒感染的包膜蛋白内。


4.如权利要求1-3中任一项所述的溶瘤病毒，其中所述溶瘤病毒选自溶瘤腺病毒和溶瘤牛痘病毒。


5.如权利要求1-3中任一项所述的溶瘤病毒，其中所述溶瘤病毒是溶瘤疱疹病毒。


6.如权利要求5所述的溶瘤病毒，其中所述溶瘤疱疹病毒包膜蛋白选自gB、gC、gD、gEgC、gD、gE、gG、gI、gJ、gK、gM、gN、UL20、UL24、UL43、UL45、UL56和US9。


7.包含两个连接的结合结构域的双特异性抗体，其中第一结合结构域靶向溶瘤病毒的包膜，并且第二结合结构域靶向肿瘤特异性抗原。


8.如权利要求7所述的双特异性抗体，其中所述溶瘤病毒的包膜是疱疹病毒包膜。


9.如权利要求8所述的双特异性抗体，其中所述疱疹病毒包膜选自gB、gC、gD、gE、gG、gI、gJ、gK、gM、gN、UL20、UL24、UL43、UL45、UL56和US9。


10.包含两个连接的结合结构域的双特异性抗体，其中第一结合结构域是共价结合对的一个成员，并且第二结构域靶向肿瘤抗原。


11.如权利要求10所述的双特异性抗体，其中所述第一结合结构域是SpyTag(AHIVMVDAYKPTK)(SEQIDNo.6)。


12.如权利要求7-11中任一项所述的双特异性抗体，其中所述肿瘤抗原选自CDK-1、COX-2、CRISP3、ESO-1、HER-2、MAGE-A1、MAGE-2、MAGE-A3、MAGE-B6、MAPPK...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾威廉，德米特里·V·泽耶科，刘小虎，亚纳尔·M·穆拉德，卜学贤，
申请(专利权)人：复诺健生物科技加拿大有限公司，
类型：发明
国别省市：加拿大;CA