本发明专利技术公开了检测降糖中药类产品中非法掺入高极性降糖化学药物的定性分析检测方法。本发明专利技术所提供的检测降糖中药类产品中非法掺入高极性降糖化学药物的定性分析检测方法，流动相为磷酸盐－乙腈流动相体系；流速为０．８－１．２ｍｌ／ｍｉｎ；色谱柱采用Ｈｙｐｅｒｓｉｌ氨基色谱柱，柱温２０－４５℃，盐酸二甲双胍、盐酸苯乙双胍、阿卡波糖、伏格列波糖可实现完全分离。当降糖中药类产品中色谱峰的保留时间和降糖化药的保留时间一致时，而且有明显的吸收，说明待测样品中含有该种降糖化药。本发明专利技术具有快速、简便、灵敏度高、专属性强、覆盖面广等优点。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术提供了一种降糖中药类产品中非法掺入高极性降糖化学药物的定性分析 检测方法，属于药物质量检测体系。
技术介绍
糖尿病已成为当前世界性卫生问题，我国糖尿病患病率也逐年增加，新增的患 者主要为2型糖尿病，口服降糖药在这类患者的治疗中占有重要的地位。近年来，临 床常用的降糖药物有双胍类和a -葡萄糖苷酶抑制剂等，民间也出现一些中药降糖制 剂，其中有些中药制剂擅自添加西药成分，随意夸大疗效，有的病人误认为这些民 间中药制剂是纯中药制剂，副作用小，可以大量服用，临床出现服用这些中药降糖 药中毒的病人。因此，有必要建立灵敏、可靠的分析方法对中药降糖制剂中非法掺 入的降糖药进行鉴定。降糖化学药物一般可以分为磺酰脲类药物、双胍类药物、a-糖苷酶抑制剂、噻 唑烷二酮类药物、非磺酰脲类的胰岛素促进分泌剂等几大类，其中双胍类药物、a-糖苷酶抑制剂类降糖化学药物具有较高的水溶性，极性较高，为高极性降糖化学药 物，与其它几大类的极性有朋显差异。双胍类药物的典型代表为盐酸二甲双胍、盐 酸苯乙双胍；a-糖苷酶抑制剂类药物的典型代表为阿卡波糖、伏格列波糖。目前，已有采用高效液相色谱技术检测降糖中药类产品中掺杂的降糖化学药物， 如申请号为200610016419. l的中国专利，用高效液相色谱方法测定盐酸甲基丙炔苄 胺的含量，色谱条件与系统适用性试验为用十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；甲 醇-0.05mol/L磷酸二氢钾(10。/。磷酸调pl^3)15: 85为流动相；检测波长为217nm;柱 温4(TC，理论塔板数按盐酸甲基丙炔苄胺锋计算，应不低于5000。但是该专利方法 适用范围狭窄，仅能检测盐酸甲基丙炔苄胺一种降糖化学药物。《6种口服降糖药的液相色谱一质谱分析》(分析测试学报，第19巻第6期，2000 年11月，Page5—8) —文中采用以下高效液相色谱条件对二甲双胍、盐酸苯乙双胍 进行检测流动相为体积比为65: 35的甲醇一5mmol/L醋酸铵缓冲液(pH3.5),流速 0.5ml/min;柱温为室温；进样量为20yL ;《RP—HPLC检测中药保健品中的西药降糖成分》(中国药学杂志第40巻第4期，Page 316 — 317) —文中采用RP—HPLC法对双胍类药物进行检测；色谱条件为C18 色谱柱(伊立特4. 6 mraX 250 mm ， 5 u m;流动相甲醇一离子对试液(庚烷磺酸钠O. 5056 g ，加三乙胺1.4 mL ，加水至1000 mL ，用磷酸调节pH值至3. 5 ±0.05) (30 : 70); 流速1.0mL mirf1 ;进样量为10 y L , 40 u g mL—、 二极管阵列检测器及UV检测 波长233 nm;柱温为室温;理论板数按两个对照品峰计算应均不低于2 000;《反相液相色谱法同时测定六种降糖药西药成分》(现代科学仪器2006， 6， Page 89_91) —文中采用反相液相色谱法同时测定降糖样品中的盐酸二甲双胍、盐酸苯 乙双胍、格列吡嗪、格列齐特、格列本脲、格列美脲等六种降血糖西药成分。色谱 柱为Agilent C18柱，流动相为乙腈-0.02%磷酸溶液，梯度洗脱，波长229nm,流 速1.0mL/min。 17分钟可实现六组分的完全分离，各组分在一定范围内有良好的线 性关系；《液相色谱一串联四极杆质谱联用法测定中药降糖制剂中非法掺入苯乙双胍和 格列齐特的研究》(药物分析杂志2005 25， Page 1453 — 1455)提供了一种检测非 法惨入的苯乙双胍和格列奇特的专属性方法，HPLC条件为色谱柱ODS C18(250mm X4.6mm， 5um);流动相甲醇一醋酸盐缓冲液(pH4. 2) (50:50);流速l.OmLmin—、 柱温30。C;进样量20nL ;检测波长240nm;《液相色谱一质谱联用法测定中药制剂中双胍类化学药物》(药物鉴定第16巻 第17期，Page 15_16)用液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用法测定纯中药降糖制剂 中非法掺入的双胍类化学药物，色谱条件为色谱柱AgelentC18柱(150mraX4.6mm， 5ym);流动相0. 02mol/L醋酸铵溶液(将醋酸pH调至3.5) —甲醇(70: 30);流 速0.3ml/min;柱温3(TC;进样量10uL;检测波长235nm;但是上述文献中都未涉及到a -糖苷酶抑制剂类药物阿卡波糖、伏格列波糖的检 测；《反相高效液相色谱法一二极管阵列检测器测定降糖中药制剂中的化学药品》 (中国药师，2005年第8巻第10期，Page 827 — 829)应用反相高效液相色谱法一二 极管阵列检测(RP — HPLC—_MD)测定中药降糖制剂中可能存在的3种化学药品一 苯乙双胍、阿卡波糖、格列本脲，色谱条件为Agilent ZORB — AX ODS C18(250mm X4.6腿，5um);流动相醋酸盐缓冲液(10mmol/L醋酸铵，20mmol/L三乙胺，用醋 酸调节pH5.5)与乙腈，梯度洗脱，流速0.6mLmirT';检测波长230nm;但是该工 艺需要梯度洗脱，略显复杂，而且分离时间较长，不利于快速鉴定。有鉴于此，本专利技术从降糖化学药物的极性高低着手，提出了一种，盐酸二甲双胍、盐酸苯乙 双胍、阿卡波糖、伏格列波糖可实现完全分离，具有快速、简便、灵敏度高、专属 性强、覆盖面广等优点。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供降糖中药类产品中非法掺入高极性降糖化学药物的定性 分析检测方法。简单的说，本专利技术提供的降糖中药类产品中非法掺入高极性降糖化学药物的定 性分析检测方法，包括(1) 方法高效液相色谱法；(2) 流动相磷酸盐一乙腈流动相体系，由A和B组成，A为0.06X磷酸二氢钾和0.0279%磷酸氢二钠的混合溶液，B为乙腈，体积比A:B为30:70，流速为0.8 — 1. 2ml/min;(3) 色谱柱Hypersil氨基色谱柱，柱温20—45。C;(4) 紫外检测波长检测波长为195nm;(5) 将一种或多种高极性降糖化学药物混合，制成对照品溶液，然后进行色谱 分析，得到各种高极性降糖化学药物的保留时间；(6) 将待分析的降糖中药类产品制成供试品溶液，然后进行色谱分析； 当降糖中药类产品色谱峰的保留时间和高极性降糖化学药物的保留时间一致时，而且有明显的吸收，说明待测样品中含有该种降糖化药；否则则无。其中，所述的流动相流速优选为1.0ml/min，所述的色谱柱柱温优选为3(TC。所述的Hypersil氨基色谱柱规格优选为粒径5 u m， 4. 6mraX250mm。所述的高极性降糖化学药物为盐酸二甲双胍、盐酸苯乙双胍、阿卡波糖和伏格列波糖。所述的对照品溶液和供试品溶液溶剂为甲醇。所述的对照品溶液中，含浓度为10ug/ml的盐酸二甲双胍，浓度为5wg/ml的盐 酸苯乙双胍，浓度为1000ug/ml的阿卡波糖，浓度为500y g/ml的伏格列波糖中的一 种或多种，溶剂均为甲醇。所述供试品溶液制备过程为胶囊和片剂均取5粒或5片，胶囊去掉胶囊壳，大 蜜丸取半粒，研细或切成小块，将药品粉末或小块转入25ml容量瓶中，加入20ml甲醇，超声处理15分钟，冷至室温，加甲醇定容，摇匀，过滤，滤液过0.4本文档来自技高网...
【技术保护点】
降糖中药类产品中非法掺入高极性降糖化学药物的定性分析检测方法，其特征在于，包括： （１）方法：高效液相色谱法； （２）流动相：磷酸盐－乙腈流动相体系，由Ａ和Ｂ组成，Ａ为质量百分比０．０６％磷酸二氢钾和０．０２７９％磷酸氢二钠的混合溶液，Ｂ为乙腈，体积比Ａ∶Ｂ为３０∶７０，流速为０．８－１．２ｍｌ／ｍｉｎ； （３）色谱柱：Ｈｙｐｅｒｓｉｌ氨基色谱柱，柱温２０－４５℃； （４）紫外检测波长：检测波长为１９５ｎｍ； （５）将高极性降糖化学药物混合，制成对照品溶液，然后进行色谱分析，得到各种高极性降糖化学药物的保留时间； （６）将待分析的降糖中药类产品制成供试品溶液，然后进行色谱分析； 当降糖中药类产品色谱峰的保留时间和高极性降糖化学药物的保留时间一致时，而且有明显的吸收，说明待测样品中含有该种降糖化学药物；否则则无。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：杨秉呼，赵秀梅，朝克图，刘小辉，郭栋，王江华，仵淑红，聂然，孙建慧，马家华，
申请(专利权)人：北京市东城区药品检验所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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