一种猪氟烷基因基因型的检测方法技术

技术编号:2572772 阅读:433 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术提供了一种猪氟烷基因基因型的检测方法,根据猪氟烷基因突变位点两端的碱基序列设计两组不同的引物,将样品DNA分别与两组引物同时进行PCR扩增,通过PCR扩增产物的荧光信号强度变化监测产物量的变化,从而判断其基因型。本发明专利技术要解决现有技术中的检测猪氟烷基因基因型的方法准确率低、操作步骤多、过程复杂、时间长、检测试剂有毒的技术问题,提高了检测准确性,简化了操作程序,避免了有毒有害试剂的使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程领域,尤其涉及一种基因检测方法,特别涉及一种猪氟垸基因基因型的检测方法,具体来说是一种应用荧光定量PCR技术检测猪氟垸基因不同基因型的方法。
技术介绍
猪氟烷基因又称骨骼肌钙离子释放通道基因或兰尼定受体基因,由一 对等位基因Har和Har组成,并构成HalNN (野生型)、HalNn (杂合型)和 Hal (突变型)3种基因型,是导致猪应激综合症的一个主效基因,猪应激 综合症的典型症状为猪恶性高热、肌肉强直、突然死亡,以及屠宰后肉质 变差,形成劣质肉。由于猪应激综合症产生的猪应激死亡、劣质肉已给世 界各国的养猪生产和猪肉的销售加工造成了巨大损失,因此,需要通过检 测来分辨并剔除猪群中氟烷基因的Har基因,以避免猪应激综合症的产生。 目前检测猪氟垸基因的方法主要有生理、生化和分子生物学检测。生理检 测是使幼猪吸入一定浓度的氟烷气体被麻醉后,表现出肌肉痉挛、四肢僵 直的为氟烷阳性(Ha广),未出现任何症状、四肢松软的为氟垸阴性(HalNN) 或杂合子(HalNn)。此法简单易操作,但检测准确性不高,且只能检出氟烷 阳性。生化检测是通过检测猪血液中氟烷基因连锁的酶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种猪氟烷基因基因型的检测方法,其特征在于包括如下步骤: a)对猪氟烷基因进行PCR扩增,然后对扩增出的碱基片段进行碱基测序,确定猪氟烷基因的突变位点,根据突变位点两端的碱基序列设计两组引物,其中一组引物的上游引物3’端和野生型的基因位点匹配,另一组引物的上游引物3’端和突变型的基因位点匹配,两组的下游引物相同; b)将待检测猪的样品DNA分别与野生型引物、突变型引物在两个反应体系中同时进行PCR扩增,扩增后每个样品与每组引物产生一个荧光信号,即每个样品产生两个荧光信号,随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加,每经过一个循环,收集一次荧光信号,通过荧光信号的强度...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:李建颖刘炜吴昊旻马芳芳黄国庆
申请(专利权)人:上海市动物疫病预防控制中心
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]

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