一种新型冠状病毒核酸检测引物探针组合物、试剂盒及方法技术

技术编号:25513666 阅读:49 留言:0更新日期:2020-09-04 17:06
本发明专利技术涉及生物技术及医学检验技术领域,为解决传统病毒核酸检测方法准确度低、特异性差,灵敏度低的问题,提供了一种新型冠状病毒核酸检测引物探针组合物、试剂盒及方法,所述新型冠状病毒核酸检测引物探针组合物,包括:第一引物探针组,包括正向引物ORF1ab‑F,探针ORF1ab‑P和反向引物ORF1ab‑R;第二引物探针组,包括正向引物N‑F,探针N‑P和反向引物N‑R;第三引物探针组,包括正向引物Rpp30‑F,探针Rpp30‑P和反向引物Rpp30‑R。本发明专利技术的引物探针组合物通过扩增引物对及检测探针的巧妙设计,避免了多个引物对及对应的检测探针之间的相互干扰;试剂盒结构简单,通过内标对待测样本的采集、运输和提取过程中进行监控,避免检测结果的假阴性。

【技术实现步骤摘要】
一种新型冠状病毒核酸检测引物探针组合物、试剂盒及方法
本专利技术涉及生物技术及医学检验
,尤其涉及一种新型冠状病毒核酸检测引物探针组合物、试剂盒及方法。
技术介绍
新型冠状病毒(COVID-19)是一种具有包膜的正链单股RNA冠状病毒,此病毒每组基因组长度约30000个核苷酸左右,与SARS-CoV同属于冠状病毒谱系B(BetacoronavirusLineageB,Sarbecovirus)。与SARS-CoV类似,COVID-19可以借由人类的ACE2作为受体结合,通过呼吸道上皮细胞进入肺部进行复制过程,且主要作用对象也是与SARS-CoV相同的T淋巴细胞。其主要是通过与感染人员之间无防护的密切接触和飞沫传播,也可能会通过气溶胶传播。基本临床症状以发热、干咳、乏力为主要表现。少数患者伴有鼻塞、流涕、咽痛、肌痛和腹泻等症状。重症患者多发现于发病一周后出现呼吸困难和/或低氧血症,严重者可快速进展成为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和凝血功能障碍及多器官功能衰竭。基于目前的流行病学调查,潜伏期1~14天,多为3~7天。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种新型冠状病毒核酸检测引物探针组合物,其特征在于,包括:/n第一引物探针组,包括正向引物ORF1ab-F,探针ORF1ab-P和反向引物ORF1ab-R,其核苷酸序列分别如SEQ ID No.1~3所示;/n第二引物探针组,包括正向引物N-F,探针N-P和反向引物N-R,其核苷酸序列分别如SEQID No.4~6所示;/n第三引物探针组,包括正向引物Rpp30-F,探针Rpp30-P和反向引物Rpp30-R,其核苷酸序列分别如SEQ ID No.7~9所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种新型冠状病毒核酸检测引物探针组合物,其特征在于,包括:
第一引物探针组,包括正向引物ORF1ab-F,探针ORF1ab-P和反向引物ORF1ab-R,其核苷酸序列分别如SEQIDNo.1~3所示;
第二引物探针组,包括正向引物N-F,探针N-P和反向引物N-R,其核苷酸序列分别如SEQIDNo.4~6所示;
第三引物探针组,包括正向引物Rpp30-F,探针Rpp30-P和反向引物Rpp30-R,其核苷酸序列分别如SEQIDNo.7~9所示。


2.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒核酸检测引物探针组合物,其特征在于,所述探针ORF1ab-P、探针N-P和探针Rpp30-P的5’端标记有荧光基团,3’端标记有荧光淬灭基团。


3.根据权利要求2所述的一种新型冠状病毒核酸检测引物探针组合物,其特征在于,所述荧光基团选自FAM、VIC、CY5、ROX、HEX、JOE、NED、TexasRed和CY3中的至少1种。


4.根据权利要求2所述的一种新型冠状病毒核酸检测引物探针组合物,其特征在于,所述荧光淬灭基团选自MGB、BHQ-1、BHQ-2、BHQ-3和TAMRA中的至少1种。


5.一种包含如权利要求1-4任一所述的引物探针组合物的新型冠状病毒核酸检测试剂盒,其特征在于,包括引物探针组合物容器,内外质控容器,逆转录反应和PCR扩增反应容器,所述引物探针组合物容器内含有核苷酸序列如SEQIDNo.1~9所示的引物探针干粉或者溶液;所述...

【专利技术属性】
技术研发人员:方耀东陈林李明阳韩丽张文学古迪
申请(专利权)人:上海五色石医学研究股份有限公司上海五色石医学科技有限公司
类型:发明
国别省市:上海;31

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