一种人DMD基因外显子PCR扩增系统、检测试剂盒及其应用的方法技术方案

本发明专利技术属于人核酸体外检测技术领域，具体为人DMD基因的PCR扩增检测系统及其应用。PCR扩增检测系统包括：引物组、PCR反应母液容器；引物组容器包含引物SEQ ID No.1～SEQ ID No.52贮存液。本发明专利技术在DNA提取情况后，通过PCR反应对人DMD基因26个外显子目的片段同时扩增，进行DMD基因外显子有无缺失突变的判断，通过测序片段的基因序列与Reference Sequence进行比对，最终进行目标序列中有无单碱基突变的判断，以期对人DMD基因全部外显子进行金标准方法探讨分析D型肌营养不良症在分子遗传水平上的发病原因。而且，本方法操作简单，使用仪器设备普及度很高，适合推广使用。

Human DMD gene exon PCR amplification system, detection kit and its application method

The invention belongs to the field of human nucleic acid in vitro detection technology, in particular to a PCR amplification detection system for human DMD gene and its application. The PCR amplification detection system includes primer group, mother liquor container of PCR reaction, and primer group container contains primer SEQ ID No.1~SEQ ID No.52 storage liquid. After DNA extraction, the target fragments of 26 exons of human DMD gene are amplified simultaneously by PCR reaction, and the deletion mutation of the exon of DMD gene is judged. The gene sequence of the sequence fragment is compared with Reference Sequence, and the single base mutation in the target sequence is judged finally, so as to make a judgment on whether there is a single base mutation in the target sequence. All exons of human DMD gene were analyzed by gold standard method to explore the pathogenesis of D muscular dystrophy at the molecular genetic level. Moreover, this method is simple to operate, and the popularity of instrument and equipment is very high, so it is suitable for popularization and application.

【技术实现步骤摘要】
一种人DMD基因外显子PCR扩增系统、检测试剂盒及其应用的方法
本专利技术属于人核酸体外检测
，具体涉及一种人DMD基因全部的26个外显子PCR扩增系统、检测试剂盒及其应用。
技术介绍
Duchenne型肌营养不良症(Duchennemusculardystrophy,DMD)和Becker型肌营养不良症(Beckermusculardystrophy,BMD)均属于假肥大性肌营养不良症，一种严重的X染色体连锁隐性遗传性神经肌肉疾病，该病系位于X染色体短臂(Xp12)上的抗肌萎缩蛋白dystrophin基因突变导致抗肌萎缩蛋白发生结构和功能的改变所致，发病的主要特征为缓慢进行性加重的对称性肌无力和肌萎缩1-2；DMD发病主要累及男性，发病率约占活产男婴的1/3500，女性为携带者，通常不发病。目前无有效的治愈方法(FDA虽在2016年9月份批准(非完全批准)Sarepta公司的新药Exondys51，有望成为首个获批治疗DMD的药物，但实际数据表明该药增加肌营养蛋白疗效非常微弱，平均增加正常值0.28％的肌营养蛋白，其完全批准上市前景还有待观察)。DMD基因是目前已知的人类最大本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于人DMD基因26个外显子的PCR扩增系统，所述扩增系统包含以下外显子位点相对应的26对PCR扩增引物：位点Exon3，相对应的引物序列为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2；位点Exon4，相对应的引物序列为SEQ ID No.3和SEQ ID No.4；位点Exon5，相对应的引物序列为SEQ ID No.5和SEQ ID No.6；位点Exon6，相对应的引物序列为SEQ ID No.7和SEQ ID No.8；位点Exon7，相对应的引物序列为SEQ ID No.9和SEQ ID No.10；位点Exon8，相对应的引物序列为SEQ ID No.11和SEQ ID ...

【技术特征摘要】
1.一种用于人DMD基因26个外显子的PCR扩增系统，所述扩增系统包含以下外显子位点相对应的26对PCR扩增引物：位点Exon3，相对应的引物序列为SEQIDNo.1和SEQIDNo.2；位点Exon4，相对应的引物序列为SEQIDNo.3和SEQIDNo.4；位点Exon5，相对应的引物序列为SEQIDNo.5和SEQIDNo.6；位点Exon6，相对应的引物序列为SEQIDNo.7和SEQIDNo.8；位点Exon7，相对应的引物序列为SEQIDNo.9和SEQIDNo.10；位点Exon8，相对应的引物序列为SEQIDNo.11和SEQIDNo.12；位点Exon9，相对应的引物序列为SEQIDNo.13和SEQIDNo.14；位点Exon10，相对应的引物序列为SEQIDNo.15和SEQIDNo.16；位点Exon11，相对应的引物序列为SEQIDNo.17和SEQIDNo.18；位点Exon12，相对应的引物序列为SEQIDNo.19和SEQIDNo.20；位点Exon13，相对应的引物序列为SEQIDNo.21和SEQIDNo.22；位点Exon14，相对应的引物序列为SEQIDNo.23和SEQIDNo.24；位点Exon15，相对应的引物序列为SEQIDNo.25和SEQIDNo.26；位点Exon16，相对应的引物序列为SEQIDNo.27和SEQIDNo.28；位点Exon17，相对应的引物序列为SEQIDNo.29和SEQIDNo.30；位点Exon18，相对应的引物序列为SEQIDNo.31和SEQIDNo.32；位点Exon19，相对应的引物序列为SEQIDNo.33和SEQIDNo.34；位点Exon45，相对应的引物序列为SEQIDNo.35和SEQIDNo.36；位点Exon46，相对应的引物序列为SEQIDNo.37和SEQIDNo.38；位点Exon47，相对应的引物序列为SEQIDNo.39和SEQIDNo.40；位点Exon48，相对应的引物序列为SEQIDNo.41和SEQIDNo.42；位点Exon49，相对应的引物序列为SEQIDNo...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭朝敏，金云舟，周巍，陈林，李明阳，邓淑燕，
申请(专利权)人：上海五色石医学研究股份有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31