一种QPCR实时荧光数据定量分析的方法技术

技术编号:25430891 阅读:58 留言:0更新日期:2020-08-28 22:20
本发明专利技术公开了一种QPCR实时荧光数据定量分析的方法,涉及PCR反应领域,包括S1、采集每个样品在PCR反应过程中多个循环的荧光数据,得到每个样品的循环数—荧光亮度值的曲线A;S2、处理S1中的所有荧光数据,使每个样品的曲线A变得平滑得到曲线B;S3、获取每个样品的曲线B的基线并进行基线校准;S4、根据校准后的基线得到每个样品的Ct值;该方法从数据层面入手,通过一系列算法步骤,明显消除反应、加温、信号采集等对原始数据的影响,从而完成最终的分析,计算出待测样品的Ct值和浓度,定量分析的结果准确度。

【技术实现步骤摘要】
一种QPCR实时荧光数据定量分析的方法
本专利技术涉及PCR反应领域,尤其涉及一种QPCR实时荧光数据定量分析的方法。
技术介绍
QPCR实时荧光数据,通过各种类型传感器捕获后,需要对数据进行一系列分析以确定待测样本的浓度。实际中,由于PCR反应本身、温度控制、采集过程等各方面的误差,会导致最终采集结果出现不同程度偏移,使S曲线的形状变得不规则,定量分析的结果Ct值准确度受到影响。
技术实现思路
本专利技术的目的就在于为了解决上述问题设计了一种QPCR实时荧光数据定量分析的方法。本专利技术通过以下技术方案来实现上述目的:一种QPCR实时荧光数据定量分析的方法,包括以下步骤:S1、采集每个样品在PCR反应过程中多个循环的荧光数据,得到每个样品的循环数—荧光亮度值的曲线A;S2、处理S1中的所有荧光数据,使每个样品的曲线A变得平滑得到曲线B;S3、获取每个样品的曲线B的基线并进行基线校准;S4、根据校准后的基线得到每个样品的Ct值。进一步地,在S2中包括:S21、确本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种QPCR实时荧光数据定量分析的方法,其特征在于,包括以下步骤:/nS1、采集每个样品在PCR反应过程中多个循环的荧光数据,得到每个样品的循环数—荧光亮度值的曲线A;/nS2、处理S1中的所有荧光数据,使每个样品的曲线A变得平滑得到曲线B;/nS3、获取每个样品的曲线B的基线并进行基线校准;/nS4、根据校准后的基线得到每个样品的Ct值。/n

【技术特征摘要】
1.一种QPCR实时荧光数据定量分析的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、采集每个样品在PCR反应过程中多个循环的荧光数据,得到每个样品的循环数—荧光亮度值的曲线A;
S2、处理S1中的所有荧光数据,使每个样品的曲线A变得平滑得到曲线B;
S3、获取每个样品的曲线B的基线并进行基线校准;
S4、根据校准后的基线得到每个样品的Ct值。


2.根据权利要求1所述的一种QPCR实时荧光数据定量分析的方法,其特征在于,在S2中包括:
S21、确定平滑窗口,平滑窗口为3或5;
S22、第一个循环开始取滑动窗口数量的点数,使用平均值代替对应的采集值,使得每个样品的曲线A变成平滑的曲线B。


3.根据权利要求2所述的一种QPCR实时荧光数据定量分析的方法,其特征在于,在S3中包括:
S31、对每...

【专利技术属性】
技术研发人员:王寄竹石瑞
申请(专利权)人:成都瀚辰光翼科技有限责任公司成都瀚辰光翼生物工程有限公司
类型:发明
国别省市:四川;51

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