普鲁兰短梗霉发酵产物及其制法及减少真菌病害的微生物制剂与减少农产品真菌病害的方法技术

本公开提供一种普鲁兰短梗霉(Aureobasidium pullulans)的发酵产物，其中普鲁兰短梗霉的发酵产物的形成方法，包括：将至少一种普鲁兰短梗霉以培养基进行发酵培养，以形成发酵液，其中培养基成分包括：酵母萃取物；麦芽萃取物；消化蛋白(Peptone)；以及右旋糖(dextrose)。本公开亦提供一种普鲁兰短梗霉的发酵产物的制备方法，一种微生物制剂及一种减少农产品的真菌病害的方法。

【技术实现步骤摘要】
普鲁兰短梗霉发酵产物及其制法及减少真菌病害的微生物制剂与减少农产品真菌病害的方法
本公开提供一种普鲁兰短梗霉的发酵产物及其制备方法。本公开另提供一种微生物组成。本公开又提供一种减少农产品的真菌病害的方法。
技术介绍
中国台湾地处热带及亚热带交界，气候温暖潮湿，农产品于采收后到配送至销售市场、由消费者购买的过程中，容易受到侵染型真菌病原菌(postharvestfungalpathogen)的感染，而造成农产品腐坏。为了避免农产品于采收后的配送过程中的损害，采收后的病害防治与延长保鲜处理是重要的课题。目前主要的采收后病害防治与延长保鲜技术主要可分为物理、化学与微生物法。物理抑菌保鲜方式是在运送过程中维持低温以避免微生物孳生。此方法不需要使用化学物质，因此不会对人体造成伤害，但仪器设施的投资成本高，且需消耗大量电力，较难普及应用。化学法是使用化学物质达到抑菌的效果，虽然不需使用仪器设备因此价格低廉，且化学物质的效果显著，然而化学物质残留于农产品上，人体食用后恐有造成毒性的潜在风险，会造成环境及健康问题。相较于上述方法，微生物法使用源自微生物产生的物质达到抑菌目的，例如微生物来源的乳酸链球菌素(Nisin)、ε-聚赖氨酸(ε-Polylysine)、纳他霉素(Natamycin)等(Xingetal.,2015,Liuetal.,2015)。微生物法主要要求天然、安全，目前已逐步取代物理或化学方式，但多数微生物抗菌范围较小，对病原菌的控制效果受到局限。有研究指出，利用微生物防治农产品收获后病害的机制主要可分类为1)病原菌的营养竞争、2)诱导宿主产生抗病性、或3)微生物本身分泌水解酵素，分解病原菌细胞壁，因而抑制病原菌生长(DavideandSamir,2016)。此外，亦有研究指出1％普鲁兰短梗霉胞外多糖可以降低油桃的失重率和腐烂率，保持果实光泽，达到较好的保鲜效果(欧阳等，2010)。然而，目前尚无针对中国台湾常见的侵染型真菌病害，例如青霉病、炭疽刺盘孢病、灰霉病等的微生物型抑菌保鲜剂。现有的微生物虽大致符合需求，然而其为单方剂型对病原菌适用范围窄，因此需要能广效抑菌的微生物。
技术实现思路
本公开提供一种普鲁兰短梗霉(Aureobasidiumpullulans)的发酵产物，其中普鲁兰短梗霉的发酵产物的形成方法，包括：将至少一种普鲁兰短梗霉以培养基进行发酵培养，以形成发酵液，其中于该培养基成分包括，包括：酵母萃取物；麦芽萃取物；消化蛋白(peptone)；以及右旋糖(dextrose)。本公开还提供一种减少真菌病害的微生物制剂，包括：如前述的普鲁兰短梗霉的发酵产物，其中减少真菌病害的微生物组成具有减少由真菌造成的真菌病害的功效。本公开另提供一种发酵产物的制备方法，系使用如前述的普鲁兰短梗霉的发酵产物。本公开又提供一种减少农产品的真菌病害的方法，将前述的微生物制剂施作于一农产品。本公开再提供一种新颖的普鲁兰短梗霉(Aureobasidiumpullulans)，其为在2018年10月26日保藏于中国台湾财团法人食品工业发展研究所生物资源保存及研究中心的普鲁兰短梗霉，其保藏编号为BCRC930198。本公开又提供一种新颖的普鲁兰短梗霉(Aureobasidiumpullulans)，其为在2018年10月26日保藏于中国台湾财团法人食品工业发展研究所生物资源保存及研究中心的普鲁兰短梗霉，其保藏编号为BCRC930199。附图说明图1为一实施例的普鲁兰短梗霉发酵产物对于抑制芒果表皮黑斑形成的图表。图2A-图2B为普鲁兰短梗霉株BCRC930198以马铃薯右旋糖琼胶在25℃，培养7天的菌落正面。图2C为普鲁兰短梗霉株BCRC930198以麦芽萃取物琼胶在25℃，培养7天的菌落正面。图2D-图2H为普鲁兰短梗霉株BCRC930198的产孢构造与分生孢子的显微构造。图中的粗黑线为比例尺，代表10μm。图2I为普鲁兰短梗霉株BCRC930198的结晶体的显微构造。图中的粗黑线为比例尺，代表10μm。图2J-图2L为普鲁兰短梗霉株BCRC930198的分生孢子的显微构造。图中的粗黑线为比例尺，代表10μm。图3A-图3B为普鲁兰短梗霉株BCRC930199以马铃薯右旋糖琼胶在25℃，培养7天的菌落正面。图3C为普鲁兰短梗霉株BCRC930199以麦芽萃取物琼胶在25℃，培养7天的菌落正面。图3D-图3F为普鲁兰短梗霉株BCRC930199的产孢构造与分生孢子的显微构造。粗黑线为比例尺，代表10μm。图3G为普鲁兰短梗霉株BCRC930199的结晶体的显微构造。粗黑线为比例尺，代表10μm。图3H-图3J为普鲁兰短梗霉株BCRC930199的分生孢子的显微构造。粗黑线为比例尺，代表10μm。具体实施方式鉴于上述课题，于本公开中从中国台湾本土采样、收集保存的普鲁兰短梗霉种资源中，建立普鲁兰短梗霉发酵物抑菌筛选方法，筛选出具有胞外多糖生产潜力的普鲁兰短梗霉，并从中筛选出两株具有抑制真菌的普鲁兰短梗霉，作为广效型天然抗菌的微生物，克服目前微生物保鲜抑菌法所面临的单方剂型对病原菌适用范围窄，而使病害控制效果受局限的问题。在本公开一第一实施方式中，本公开提供一种普鲁兰短梗霉(Aureobasidiumpullulans)的发酵产物。本公开的普鲁兰短梗霉的发酵产物具有抑制真菌生长的功效，但不限于此。其中形成上述普鲁兰短梗霉的发酵产物的方法，可包括但不限于，将普鲁兰短梗霉以培养基进行发酵培养，以形成发酵液，以获得所述普鲁兰短梗霉的发酵产物。上述培养基的成分，可包括酵母萃取物、麦芽萃取物、消化蛋白(peptone)与右旋糖(dextrose)，但不限于此。酵母萃取物的浓度可为约1-15g/L，例如约1-5g/L、1-8g/L、1.5-10g/L、2-6g/L，但不限于此。在一实施例中，可为3g/L。麦芽萃取物的浓度可为约1-15g/L，例如1-5g/L、1-8g/L、1.5-10g/L、2-6g/L，但不限于此。在一实施例中，可为3g/L。消化蛋白的浓度可为约1-20g/L，例如1-15g/L、1-10g/L、2-18g/L、3-12g/L，但不限于此。在一实施例中，可为5g/L。右旋糖的浓度可为约1-50g/L，例如5-30g/L、5-20g/L、3-20g/L、5-18g/L，但不限于此。在一实施例中，可为10g/L。上述发酵培养的温度并无特别限制只要适合普鲁兰短梗霉生长即可，例如15-30℃之间，例如22-28℃，但不限于此，在一实施例中可为25℃。上述发酵培养的方式也无特别限制，可为批次培养或连续培养。在一实施例中，发酵培养可由一培养槽进行。上述发酵培养的培养槽的转速可为100-200rpm，但不限于此，在一实施例中可为150rpm。上述发酵培养的培养时间为24-7本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种普鲁兰短梗霉的发酵产物，其中该普鲁兰短梗霉的发酵产物的形成方法，包括：/n将至少一种普鲁兰短梗霉以培养基进行发酵培养，以形成发酵液，/n其中该培养基成分，包括：/n酵母萃取物；/n麦芽萃取物；/n消化蛋白；以及/n右旋糖。/n

【技术特征摘要】
20190221 TW 1081057351.一种普鲁兰短梗霉的发酵产物，其中该普鲁兰短梗霉的发酵产物的形成方法，包括：
将至少一种普鲁兰短梗霉以培养基进行发酵培养，以形成发酵液，
其中该培养基成分，包括：
酵母萃取物；
麦芽萃取物；
消化蛋白；以及
右旋糖。


2.如权利要求1所述的普鲁兰短梗霉的发酵产物，其中该酵母萃取物的含量为1g/L-15g/L。


3.如权利要求1所述的普鲁兰短梗霉的发酵产物，其中该麦芽萃取物的含量为1g/L-15g/L。


4.如权利要求1所述的普鲁兰短梗霉的发酵产物，其中该消化蛋白的含量为1g/L-20g/L。


5.如权利要求1所述的普鲁兰短梗霉的发酵产物，其中该右旋糖的含量为1g/L-50g/L。


6.如权利要求1所述的普鲁兰短梗霉的发酵产物，其中该发酵培养的温度为15-30℃。


7.如权利要求1所述的普鲁兰短梗霉的发酵产物，其中该发酵培养的培养时间为24-72小时。


8.如权利要求1所述的普鲁兰短梗霉的发酵产物，其中该普鲁兰短梗霉的发酵产物的形成方法还包括使发酵液中的菌体失活。


9.如权利要求1所述的普鲁兰短梗霉的发酵产物，其中该普鲁兰短梗霉为在2018年10月26日保藏于中国台湾财团法人食品工业发展研究所生物资源保存及研究中心的普鲁兰短梗霉，其保藏编号为BCRC930198和/或在2018年10月26日保藏于中国台湾财团法人食品工业发展研究所生物资源保存及研究中心的普鲁兰短梗霉，其保藏编号为BCRC930199。


10.一种减少真菌病害的微生物制剂，包括：
如权利要求1所述的普鲁兰短梗霉的发酵产物，
其中该减少真菌病害的微生物组成具有减少由真菌造成的真菌病害的功效。


11.如权利要求10所述的减少真菌病害的微生物制剂，其中该普鲁兰短梗霉为在2018年10月26日保藏于中国台湾财团法人食品工业发展研究所生物资源保存及研究中心的普鲁兰短梗霉，其保藏编号为BCRC930198和/或在2018年...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪怡芳，黄乔盈，刘桂郁，赖进此，
申请(专利权)人：财团法人食品工业发展研究所，
类型：发明
国别省市：中国台湾;71