一种植物基因转化方法及其应用技术

一种植物基因转化方法及其应用。本发明专利技术提供的转化方法直接以植物成熟期果实种子的胚芽作为转化对象，与以往采用植物组织培养作为转化对象不同，利用种子胚为转化对象，一方面避免了无菌组织培养过程中的外植体消毒不彻底而造成的污染问题，也避免了植物组织培养再生困难的问题；另一方面，采用种子胚作为转化对象，直接将转化载体导入种子胚中，不受植物组织基因型、培养条件等限制，得到的转化产物可直接发芽生长成植株，不需要进行生根诱导，可直接培育得到转基因苗，极大的提高了转基因效率及转基因植物的存活率。

【技术实现步骤摘要】
一种植物基因转化方法及其应用
本专利技术涉及分子育种领域，尤其涉及一种植物基因转化方法及其应用。
技术介绍
植物转基因工程应用的前提是建立高效稳定的再生体系，2000年以来，国内外学者已尝试用植物的叶片、下胚轴为外植体建立植物的离体再生体系，因部分植物再生比较困难，具再生顽抗性，其叶片、下胚轴等外植体均表现出较低的再生能力。叶片外植体在培养过程中易出现组织褐化死亡现象，胚轴和茎段外植体在培养过程中易形成白色无活力愈伤，抑制了不定芽的再生。部分植物的离体组培再生技术是目前限制植物基因工程应用的主要因素。目前，植物转基因工程试验中，主要以农杆菌转化法为常用的转化方法。采用农杆菌转化法进行试验的整个转基因体系的建立步骤大致可以归纳为：目的载体的构建---载体的农杆菌转化---农杆菌与植株共培养---转化植株的筛选---转化植株的鉴定。其中，载体的农杆菌转化，目前有很成熟的方法，常用的为热激和电激的转化方法。农杆菌与植株的共培养，即为植株转化实验。转化植株的筛选，大多是利用抗生素进行筛选的，抗生素的选择则需根据目的载体确定，设置不同梯度的抗生素本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种植物基因转化方法，其特征在于，所述植物基因转化方法包括如下步骤：/n获取植物成熟期果实种子，培育出胚芽；/n提供待转化载体，所述待转化载体包括植物转化质粒以及携带所述植物转化质粒的金属微粒；/n采用基因枪将所述待转化载体转化至所述胚芽中，得到转化产物；/n对所述转化产物进行培育，筛选含有所述植物转化质粒的植株。/n

【技术特征摘要】
1.一种植物基因转化方法，其特征在于，所述植物基因转化方法包括如下步骤：
获取植物成熟期果实种子，培育出胚芽；
提供待转化载体，所述待转化载体包括植物转化质粒以及携带所述植物转化质粒的金属微粒；
采用基因枪将所述待转化载体转化至所述胚芽中，得到转化产物；
对所述转化产物进行培育，筛选含有所述植物转化质粒的植株。


2.根据权利要求1所述的植物基因转化方法，其特征在于，提供待转化载体的步骤中，按照所述金属微粒与所述植物转化质粒的质量比为15mg:2μg进行包被，制备得到所述待转化载体。


3.根据权利要求1所述的植物基因转化方法，其特征在于，采用基因枪将所述待转化载体转化至所述胚芽中的步骤中，所述待转化载体用于转化100～500个胚芽的比例进行转化。


4.根据权利要求1所述的植物基因转化方法，其特征在于，所述金属微粒的直径为0.6μm～1.8μm。


5.根据权利要求1所述的植物基因转化方法，其特征在于，采用基因枪将所述待转化载体转化至所述胚芽中的步骤，在压力为450～22000PSI的条件下进行。


6.根据权利要求1～5任一所述的植物基因转化方法，其特征在于，获取植物成熟期果实种子，培育出胚芽的方法，包括如下步骤：获取植物成熟期果实种子，将所述种子进行灭菌处理后，暗培养得到所述种子的胚芽。


7.根据权利要求6所述的植物基因转化方法，其特征在于，对将所述种子进行灭菌处理后，暗培养得到所述种子的胚芽的方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏立新，于为常，骆超，周秋艳，
申请(专利权)人：深圳大学，
类型：发明
国别省市：广东;44