水牛乳β-酪蛋白抗氧化物的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种水牛乳β‑酪蛋白抗氧化物的制备方法，包括以下步骤：水牛乳脱脂，加热、调节pH值后加入氯化钙溶液，所得沉淀进行清洗；清洗后沉淀加超纯水溶解、冷却、调节pH值、离心，所得的上清液加热、调节pH值、离心，得到β‑CN沉淀；β‑CN沉淀透析脱盐、冻干；得β‑CN蛋白粉。将β‑CN蛋白粉利用碱性蛋白酶进行酶解，得水牛乳β‑酪蛋白抗氧化物。该水牛乳β‑酪蛋白抗氧化物具有较强的抗氧化能力。

【技术实现步骤摘要】
水牛乳β-酪蛋白抗氧化物的制备方法
本专利技术属于新型抗氧化肽的分离纯化及相关产品开发，具体涉及一种水牛乳β-酪蛋白抗氧化物的制备方法。
技术介绍
生物活性肽是对身体功能或状况产生积极影响并最终影响健康的特定蛋白质片段。酶解法是制备生物活性肽的常用方法之一，其原理是通过切割蛋白质特定位点来释放具有活性的多肽片段。机体内小肽比游离氨基酸吸收地更多，代谢速率更快，许多肽甚至还具有蛋白质或其组成氨基酸所没有的新特性。已有大量研究表明乳源性活性肽可以在人体中发挥抗高血压、抗氧化、抗血栓、降低胆固醇、抗菌和免疫调节等作用[1]。其中抗氧化活性肽是被研究的较广泛的一个方向，由于某些化学合成类抗氧化剂(丁基羟基甲苯和丁基羟基茴香醚等)对人体健康有害，因此寻求有效、无毒的天然抗氧化剂(如抗氧化肽)便得到了社会的广泛认可。水牛是世界上最主要的反刍动物之一，资源丰富。与传统荷斯坦牛乳相比，水牛乳富含蛋白质、脂肪、乳糖、矿物质和共轭亚油酸，营养价值更高。酪蛋白是牛乳蛋白质的主要成分，占总蛋白的80％左右，在酪蛋白中，β-CN又是最主要蛋白之一，占35％左右[本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.水牛乳β-酪蛋白抗氧化物的制备方法，其特征在于包括依次进行以下步骤：/nS1、水牛乳β-CN的制备：/nS1.1、将水牛乳于(4±1)℃离心，从而除去上层的脂肪，得脱脂乳：/nS1.2、将脱脂乳加热到(30±2)℃，先调节pH值至(11.0±0.2)，再加入0.5M氯化钙溶液，接着调节pH值至(7.0±0.2)，离心，得沉淀；/n每100g的脱脂乳配用(15±2)ml的0.5M氯化钙溶液；/nS1.3、溶解--调节pH值--离心：将沉淀用超纯水溶解，调节pH值至(7.0±0.2)后离心；/n再重复上述溶解--调节pH值--离心1～3次，得清洗后沉淀；/nS1.4、将清洗后沉淀加超纯水溶解，...

【技术特征摘要】
1.水牛乳β-酪蛋白抗氧化物的制备方法，其特征在于包括依次进行以下步骤：
S1、水牛乳β-CN的制备：
S1.1、将水牛乳于(4±1)℃离心，从而除去上层的脂肪，得脱脂乳：
S1.2、将脱脂乳加热到(30±2)℃，先调节pH值至(11.0±0.2)，再加入0.5M氯化钙溶液，接着调节pH值至(7.0±0.2)，离心，得沉淀；
每100g的脱脂乳配用(15±2)ml的0.5M氯化钙溶液；
S1.3、溶解--调节pH值--离心：将沉淀用超纯水溶解，调节pH值至(7.0±0.2)后离心；
再重复上述溶解--调节pH值--离心1～3次，得清洗后沉淀；
S1.4、将清洗后沉淀加超纯水溶解，冷却到2～4℃，调节pH值至(4.5±0.2)，离心，得到上清液；
将上清液加热至(35±2)℃，调节pH值至(4.6±0.2)，离心，得到β-CN沉淀；
S1.5、将β-CN沉淀溶于超纯水中，装入分子截留量为8000～14000Da的透析袋内，将透析袋放入超纯水中透析48h，每隔8h换一次超纯水；得β-CN溶液；
β-CN沉淀与超纯水的料液比为1g/30～50ml；
S1.6、将β-CN溶液冷冻干燥，得β-CN蛋白粉；
S2、蛋白酶酶解：
S2.1、将β-CN蛋白粉配制成质量浓度2.0％～3.0％的水溶液，先于(80±10)℃加热(10±1)min，再冷却至室温；
接着调节pH值至(8.0±0.2)，(55±2)℃预热8～12分钟后加入碱性蛋白酶于(100±10)r/min保温酶解，酶解时间为120～210min，得酶解液；整个酶解过程中始终控制pH值为(8.0±0.2)；
碱性蛋白酶的添加量为：...

【专利技术属性】
技术研发人员：任大喜，陈晨，刘建新，李珊珊，步婷婷，李玲，宋小玲，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33