新型γδT细胞受体和其配体制造技术

本公开涉及一种新的T细胞受体(TCR)，特别是其至少一个互补决定区(CDR)；表达所述TCR的T细胞；表达所述TCR的克隆；编码所述TCR的载体；所述TCR的可溶形式；包含所述TCR、所述细胞、所述克隆或所述载体的药物组合物或免疫原性剂或双特异性或疫苗；所述TCR或所述细胞或所述克隆或所述载体或所述药物组合物或免疫原性剂或双特异性或疫苗，用于治疗癌症；使用所述TCR、所述细胞、所述克隆、所述载体、包含所述TCR的所述药物组合物、免疫原性剂、双特异性或疫苗治疗癌症的方法；以及所述TCR所结合的配体。

Novel \u03b3 \u03b4 T cell receptors and their ligands

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】新型γδT细胞受体和其配体
本公开涉及一种新的T细胞受体(TCR)，特别是其至少一个互补决定区(CDR)；表达所述TCR的T细胞；表达所述TCR的克隆；编码所述TCR的载体；所述TCR的可溶性形式；包含所述TCR、所述细胞、所述克隆或所述载体的药物组合物或免疫原性剂或双特异性或疫苗；所述TCR或所述细胞或所述克隆或所述载体或所述药物组合物或免疫原性剂或双特异性或疫苗用于治疗癌症的用途；一种使用所述TCR、所述细胞、所述克隆、所述载体、包含所述TCR的所述药物组合物、免疫原性剂、双特异性或疫苗治疗癌症的方法；以及所述TCR与之结合的配体。背景我们发现了一种有效治疗癌症的新类型的γδT细胞，它要求靶细胞表达完整的SCNN1A基因以进行识别。该T细胞不遵循需要特定人类白细胞抗原(HLA)以识别靶标的惯例，因此被称为“非常规”。HLA基因座高度可变，目前已描述了17,000多个不同的等位基因。因此，任何经由HLA起作用的治疗方法都仅对少数患者有效。相比之下，全部人类群体都表达SCNN1A，经由我们的γδTCR和其相应的下文中称为SW.3G1的新T细胞克隆识别癌细胞所需的基因。该克隆是在筛选可识别用Epstein-Barr病毒(EBV)(也称为人疱疹病毒4(HHV-4))感染健康的B细胞而创建的类淋巴母细胞系(LCL)的γδT细胞的过程中发现的。有利地，SW.3G1γδT细胞克隆对健康的B细胞或其他健康的细胞系无反应。进一步的研究表明，SW.3G1γδT细胞克隆可以识别大多数，即便不是全部，癌细胞。这种识别需要SCNN1A基因，并且SCNN1A基因因此是SW.3G1TCR的结合配体。正如人们所知，并如图2所示，TCR是二硫键连接的膜锚定的异二聚体蛋白，通常由高度可变的γ链和δ链组成，这些γ和δ链与不变的CD3链分子结合形成完整的功能性TCR。表达此受体的T细胞称为γ:δ(或γδ)T细胞。γ链和δ链由包含恒定(C)区和可变(V)区的胞外结构域组成。恒定区接近细胞膜，其后是跨膜区和短的细胞质尾部，而可变区与配体结合。大多数γδT细胞的配体仍然未知。TCR的γ-链和δ-链的可变域各自具有三个称为互补决定区(CDR)的可变区域。通常，抗原结合位点是由TCR的γ-链和δ-链的CDR环形成的。CDR1γ和CDR2γ由独立Vγ基因编码，而CDR1δ和CDR2δ由独立Vδ基因编码。TCRγ链的CDR3是高变的，这是由于在V区和连接区的连接部分周围可能添加和移除核苷酸。TCRδ链CDR3具有更大的变异能力，因为在VDJ重组发生后，它还可以包含多样性(D)基因。2015年，约有9050万人患有癌症。每年大约发生1,410万新病例(不包括黑色素瘤以外的皮肤癌)。它导致约880万人死亡(15.7％)。男性中最常见的癌症类型是肺癌，前列腺癌，结直肠癌和胃癌。女性中，最常见的癌症类型是乳腺癌，结直肠癌，肺癌和宫颈癌。如果将黑色素瘤以外的皮肤癌包括在每年总新发癌症中，则其约占病例数的40％。在儿童中，急性淋巴母细胞性白血病和脑肿瘤是最常见的，除了在非洲，那里更常出现非霍奇金淋巴瘤。2012年，约有165,000名15岁以下的儿童被诊断出患有癌症。癌症的风险随着年龄的增长而显著增加，并且许多癌症在发达国家更常见。随着越来越多的人活到老年，以及随着发展中国家生活方式的改变，比率正在增加。截至2010年，癌症的财务成本估计为每年1.16万亿美元。因此存在提供更好和更安全的方式以治疗或根除该疾病的需要。使用身体天然防御系统杀死异常组织的免疫疗法被公认为比化学干预更为安全，但要有效，免疫疗法必须是癌症特异性的。而且，发现一种对任何类型的癌症都有效的免疫疗法将是极其有益的，因为它不仅可以施用于患有多种不同类型癌症的个体(即可以在广泛人群应用)，而且还可以施用于患有多于一种类型的癌症的单个患者。另外，鉴定非MHC限制的免疫疗法也将是非常有利的，因为这意味着可以将其施用于任何个体，无需顾及MHC组织类型。我们在本文中鉴定出的T细胞具有前述有利特性，因为它们对任何类型的癌症均有效，并且不受MHC限制，并且由于识别所需的SCNN1A基因产物是普遍表达的而具有广泛人群的应用。专利技术描述根据本专利技术的第一方面，提供了一种肿瘤特异性T细胞受体(TCR)或其片段，其特征在于至少一个互补决定区(CDR)包含CATWDRRDYKKLF(SEQIDNO:1)和/或CALGVLPTVTGGGLIF(SEQIDNo:2)或由其组成。在本专利技术的一个优选实施方案中，所述CDR包含(CDR)CATWDRRDYKKLF(SEQIDNO:1)和/或CALGVLPTVTGGGLIF(SEQIDNo:2)，或与之具有至少88％、例如89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的CDR、或由其组成。本文所描述的CDR代表所述TCR的CDR3，因此是负责识别加工的抗原或配体的主要CDR。其他CDR(CDR1γ，CDR2γ，CDR1δ和CDR2δ)由种系编码。因此，本专利技术还涉及一种TCR，其还包括与所述一个或多个CDR3序列组合的这些其他CDR即CDR1γ、CDR2γ、CDR1δ和/或CDR2δ中的一个或多个。因此，在一个优选的实施方案中，所述TCR包含以下互补决定区的一个或多个(包括任何组合)，或由其组成：VTNTFY(CDR1γ)SEQIDNO:3YDVSTARD(CDR2γ)SEQIDNO:4TSWWSYY(CDR1δ)SEQIDNO:5QGS(CDR2δ)SEQIDNO：6。在本文中所提及的肿瘤特异性TCR是在SCNN1A基因表达的背景下特异性识别肿瘤细胞或肿瘤细胞配体的TCR，并且由其激活，但是不被非肿瘤细胞或非肿瘤细胞配体激活。在本专利技术的一个优选的实施方案中，所述TCR是具有一条γ链和一条δ链的γδTCR，并且所述γ链的所述CDR包含以下CDR或由其组成：CATWDRRDYKKLF(SEQIDNO:1)或与之具有至少88％，例如89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的CDR；所述δ链的所述CDR包含以下CDR或由其组成：CALGVLPTVTGGGLIF(SEQIDNo:2)或与之具有至少88％，例如89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的CDR。因此，所述TCR可包含前述CDR中的一个或两个，并且在优选的实施方案中，包含两个所述CDR。在本专利技术的另一个优选实施方案中，所述TCR的所述CDR另外或可选地包含为CALWEVDYKKLF(SEQIDNO:9)的γ链序列和/或为CALGEPVLFAVRGLIF(SEQIDNO:10)和/或CACDLLGDRYTDKLIF(SEQIDNO:11)的δ链序列，或与之具有至少88％，例如89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的CDR，或由其组成。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肿瘤特异性T细胞受体(TCR)或其片段，其特征在于至少一个互补决定区包含(CDR)CATWDRRDYKKLF(SEQ ID NO:1)和/或CALGVLPTVTGGGLIF(SEQ ID No:2)，或与任一CDR(即SEQ ID NO:1或2)具有至少88％同一性的CDR，或由其组成。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171120 GB 1719169.31.一种肿瘤特异性T细胞受体(TCR)或其片段，其特征在于至少一个互补决定区包含(CDR)CATWDRRDYKKLF(SEQIDNO:1)和/或CALGVLPTVTGGGLIF(SEQIDNo:2)，或与任一CDR(即SEQIDNO:1或2)具有至少88％同一性的CDR，或由其组成。


2.根据权利要求1的肿瘤特异性T细胞受体(TCR)，其中所述TCR包含两个所述CDR。


3.根据权利要求1或权利要求2的肿瘤特异性T细胞受体(TCR)，其中所述TCR包括或由以下组成：下述互补决定区的一个或多个，包括任何组合：
VTNTFY(CDR1γ)SEQIDNO:3
YDVSTARD(CDR2γ)SEQIDNO:4
TSWWSYY(CDR1δ)SEQIDNO:5
QGS(CDR2δ)SEQIDNO:6。


4.根据权利要求1-3中任一项的肿瘤特异性T细胞受体(TCR)，其中所述TCR是γ链，其包含或由下述组成：




或与之具有至少88％同源性的γ链。


5.根据权利要求1-3中任一项的肿瘤特异性T细胞受体(TCR)，其中所述TCR是δ链，其包含或由下述组成：




或与之具有至少88％同源性的δ链。


6.根据权利要求1-5中任一项的肿瘤特异性T细胞受体(TCR)，其中所述TCR的所述CDR另外或可替代地包含或由下述组成：为CALWEVDYKKLF(SEQIDNO:9)的γ链序列和/或为CALGEPVLFAVRGLIF(SEQIDNO:10)和/或CACDLLGDRYTDKLIF(SEQIDNO:11)的δ链序列，或与所述γ链序列或所述δ链序列具有至少88％同一性的CDR。


7.根据权利要求1-6中任一项的肿瘤特异性T细胞受体(TCR)，其中所述TCR是可溶的。


8.表达根据权利要求1-7中任一项所述的TCR的T细胞。


9.表达根据权利要求1-7中任一项所述的TCR的T细胞克隆。


10.根据权利要求9的T细胞克隆，其中所述克隆是SW.3G1克隆。


11.编码根据权利要求1-7中任一项所述的TCR的载体。


12.药物组合物或免疫原性剂或双特异性或疫苗，其包含根据权利要求1-7中任一项所述的TCR或根据权利要求8所述的细胞或根据权利要求9或10所述的克隆或根据权利要求11所述的载体...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·苏厄尔，G·多尔顿，
申请(专利权)人：卡迪夫大学学院顾问有限公司，
类型：发明
国别省市：英国;GB