一种捕获水蛭素类多肽的探针及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种捕获水蛭素类多肽的生物识别探针的制备方法及应用。本发明专利技术通过在磁性固相载体表面修饰配基，间接固定凝血酶，极大程度保留其生物活性，所获得的探针可结合多种检测器实现水蛭素类多肽的提取和测定，具有选择性高、快速灵敏、稳定性好、适用性广、干扰小、重复利用率高和环境友好等优势。

【技术实现步骤摘要】
一种捕获水蛭素类多肽的探针及其应用
本专利技术属于多肽检测领域。
技术介绍
水蛭素类多肽是具有与天然水蛭素相同或相似的化学结构，分子量为5～7kDa的二价直接凝血酶抑制剂，可同时作用于凝血酶的活性部位和底物识别部位。水蛭素是从水蛭唾液中分离纯化的一种由65～66个氨基酸组成的单链多肽化合物，包含HV1，HV2，HV3三种变异体，是迄今最有效的凝血酶天然特异性抑制剂，类似的还有从菲牛蛭中提取的菲牛蛭素和从山蛭中分离的山蛭素。天然水蛭素产量较少，不利于临床的推广，通过基因工程技术生产的重组水蛭素，如来匹卢定、地西卢定等在临床中起到理想的疗效。研究表明，水蛭素类多肽抗凝抗栓作用强于肝素，在处理诸如心脑血管疾病、肿瘤、眼科疾病、妇科疾病、周围神经损伤等病例方面显示出巨大的优势。现阶段，水蛭素类多肽的含量测定基本上采用生物活性法，主要有凝血酶滴定法、生色底物法、光散射法、纤维蛋白原平板法、凝血酶时间法，从药物质控模式的适用性来看，生物检测技术由于与安全性和有效性关联密切，往往比化学成分检测更具实际价值，但也有自身的缺陷：a)定量灵敏度低，当目标多本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种捕获水蛭素类多肽的探针，其特征在于：所述探针由磁性固相载体、凝血酶配基和凝血酶组成；/n其中磁珠与配基通过位于磁性固相载体表面的活性基团进行共价或非共价化学连接；/n凝血酶配基与凝血酶进行非共价化学连接。/n

【技术特征摘要】
1.一种捕获水蛭素类多肽的探针，其特征在于：所述探针由磁性固相载体、凝血酶配基和凝血酶组成；
其中磁珠与配基通过位于磁性固相载体表面的活性基团进行共价或非共价化学连接；
凝血酶配基与凝血酶进行非共价化学连接。


2.如权利要求1所述的探针，其特征在于：
所述配基的核苷酸序列如SEQIDNO.1～6任一所示，或在SEQIDNO.1～6的3’或5’末端添加6～18个T碱基；
优选的，所述配基的核苷酸序列如SEQIDNO.7或8所示。


3.如权利要求1或2所述的探针，其特征在于：所述磁性固相载体为以磁性物质为核心，外层包覆了聚合物或生物大分子的磁珠；
优选的，所述磁性固相载体为：聚苯乙烯磁珠、琼脂糖磁珠、二氧化硅磁珠、MOF金磁珠、MOF汞磁珠或MOF铅磁珠。


4.如权利要求1或2所述的探针，其特征在于：所述活性基团是羧基或活化羧基、氨基、巯基、甲苯磺酸基或环氧基；
或，所述活性基团为链霉亲和素、生物素或吡啶二硫化物。

【专利技术属性】
技术研发人员：曹秀君，国锦琳，聂应，罗莎杰，张佳斌，
申请(专利权)人：成都中医药大学，
类型：发明
国别省市：四川;51