一种分离的抗病毒感染的SARS-CoV-2蛋白结合分子制造技术

本发明专利技术公开了一种分离的抗病毒感染的SARS‑CoV‑2蛋白结合分子，该结合分子是SARS‑CoV‑2的S蛋白的单克隆抗体。该结合分子的重链可变区的氨基酸序列选自SEQ ID NOs:4、12、和20，轻链可变区的氨基酸序列选自SEQ ID NOs:8、16、和24。本发明专利技术的结合分子能够与SARS‑CoV‑2的S蛋白特异性结合并能中和SARS‑CoV‑2从而发挥抗病毒作用。

【技术实现步骤摘要】
一种分离的抗病毒感染的SARS-CoV-2蛋白结合分子
本专利技术属于抗病毒治疗、分子免疫学领域，涉及一种分离的抗病毒感染的SARS-CoV-2蛋白结合分子，所述结合分子是针对蛋白的特异性抗体。
技术介绍
新型冠状病毒肺炎(CoronaVirusDisease2019，COVID-19)，简称“新冠肺炎”，是由SARS-CoV-2感染导致的肺炎，呼吸道飞沫传播是主要传播途径，在相对封闭的环境中长时间暴露于高浓度气溶胶情况下存在经气溶胶传播的可能，其他传播途径尚待明确；人群普遍易感，潜伏期1～14d，一般为3～7d。临床类型包括无症状感染者、轻型、普通型、重型和危重型，老年及有基础疾病病例预后较差，儿童病例症状相对较轻。截至2020年3月25日17时，我国累计报告确诊病例81896例，累计死亡病例3287例；国外累计报告确诊病例342244例，累计死亡病例15747例，COVID-19已对全球人类健康构成了严重威胁。新型冠状病毒肺炎的病原SARS-CoV-2为冠状病毒科β病毒属，是线性正链RNA病毒，研究发现，SARS-CoV-2在进化树的位置上，与SARS-CoV、类SARS-CoV的类群相邻，新型冠状病毒有4种主要的结构蛋白：刺突蛋白(spikeprotein，S蛋白)，核衣壳蛋白(nucleocapsid，N蛋白)，膜蛋白(membraneprotein，M蛋白)，包膜蛋白(envelopeprotein，E蛋白)。S蛋白含有两个亚基，S1和S2，S1包括N-末端域和C-末端RBD域。中和抗体(NeutralizingAntibody)是一种可通过中和或抑制病原体(例如病毒)的生物学活性来保护细胞免受侵害的治疗性抗体。研究表明，SARS-CoV-2-S-RBD与人ACE2互作进而感染人的呼吸道上皮细胞，对于病毒感染起到重要作用，是宿主中和抗体的重要作用位点以及疫苗设计的关键靶点。COVID-19传播迅速、疫情紧急，目前尚无有效的疫苗用于预防，人感染了SARS-CoV-2，亦无特效药用于临床，主要以对症治疗为主。而作为疫苗和化学治疗的补充，由抗体介导的预防和治疗病毒感染的措施已显现良好的效果，其应用前景得到专家的认同。目前已经有将COVID-19患者康复后的血浆，输注给重症病人实现治愈的成功案例。但多抗血浆不仅来源有限，同时其临床应用也受到诸如难以质控、供受体血型不匹配、潜在的传染性因子等条件的限制，而人源化抗体对病原体具有高度的特异性，在安全性上有所保障；与痊愈病人血清相比，抗体可以通过工程化实现药物量产，从而保证临床大量应用。目前国内外尚没有上市的抗SARS-CoV-2的抗体，因此建立和发展具有自主知识产权的以抗体为基础的检测和诊治用品，对于多种相关性疾病的干预具有重要的现实意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种SARS-CoV-2蛋白结合分子，所述结合分子通过中和SARS-CoV-2发挥抗病毒感染的作用。为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：本专利技术提供了一种分离的抗病毒感染的SARS-CoV-2蛋白结合分子，所述结合分子包括：重链可变区CDR1，其包含选自SEQIDNOs:1、9、和17的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列；重链可变区CDR2，其包含选自SEQIDNOs:2、10、和18的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列；重链可变区CDR3，其包含选自SEQIDNOs:3、11、和19的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列；轻链可变区CDR1，其包含选自SEQIDNOs:5、13、和21的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列；轻链可变区CDR2，其包含选自SEQIDNOs:6、14、和22的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列；轻链可变区CDR3，其包含选自SEQIDNOs:7、15、和23的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列。一优选的组合包括：(a)重链可变区CDRl，其包含SEQIDNO:1所示的氨基酸序列；(b)重链可变区CDR2，其包含SEQIDNO:2所示的氨基酸序列；(c)重链可变区CDR3，其包含SEQIDNO:3所示的氨基酸序列；(d)轻链可变区CDRl，其包含SEQIDNO:5所示的氨基酸序列；(e)轻链可变区CDR2，其包含SEQIDNO:6所示的氨基酸序列；和(f)轻链可变区CDR3，其包含SEQIDNO:7所示的氨基酸序列。另一优选的组合包括：(a)重链可变区CDRl，其包含SEQIDNO:9所示的氨基酸序列；(b)重链可变区CDR2，其包含SEQIDNO:10所示的氨基酸序列；(c)重链可变区CDR3，其包含SEQIDNO:11所示的氨基酸序列；(d)轻链可变区CDRl，其包含SEQIDNO:13所示的氨基酸序列；(e)轻链可变区CDR2，其包含SEQIDNO:14所示的氨基酸序列；和(f)轻链可变区CDR3，其包含SEQIDNO:15所示的氨基酸序列。另一优选的组合包括：(a)重链可变区CDRl，其包含SEQIDNO:17所示的氨基酸序列；(b)重链可变区CDR2，其包含SEQIDNO:18所示的氨基酸序列；(c)重链可变区CDR3，其包含SEQIDNO:19所示的氨基酸序列；(d)轻链可变区CDRl，其包含SEQIDNO:21所示的氨基酸序列；(e)轻链可变区CDR2，其包含SEQIDNO:22所示的氨基酸序列；和(f)轻链可变区CDR3，其包含SEQIDNO:23所示的氨基酸序列。进一步，本专利技术的结合分子包括：重链可变区，其包含与选自SEQIDNOs:4、12、和20的氨基酸序列至少80％同源的氨基酸序列；轻链可变区，其包含与选自SEQIDNOs:8、16、和24的氨基酸序列至少80％同源的氨基酸序列。一优选的组合包括：重链可变区，其包含SEQIDNO:4所示的所示的氨基酸序列；轻链可变区，其包含SEQIDNO:8所示的所示的氨基酸序列。另一优选的组合包括：重链可变区，其包含SEQIDNO:12所示的所示的氨基酸序列；轻链可变区，其包含SEQIDNO:16所示的所示的氨基酸序列。另一优选的组合包括：重链可变区，其包含SEQIDNO:20所示的所示的氨基酸序列；轻链可变区，其包含SEQIDNO:24所示的所示的氨基酸序列。本专利技术的结合分子可以为例如全长抗体，或者，所述结合分子可以为抗体片段，诸如Fab或Fab'2片段，或单链抗体。本专利技术还涵盖编码本专利技术的结合分子的核酸，以及包含此类核酸的重组载体和包含此类核酸或重组载体的宿主细胞。重组载体的种类没有特别限定，可以使用通常使用的表达载体等。重组载体可以是直链状也可以是环状，可以是质粒等非病毒载体，也可以是病毒载体，还可以是基于转座子的载体。作为载体，例如可以举出病毒载体、质粒载本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离的抗病毒感染的SARS-CoV-2蛋白结合分子，其特征在于，所述结合分子包括：/n重链可变区CDR1，其包含选自SEQ ID NOs:1、9、和17的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列；/n重链可变区CDR2，其包含选自SEQ ID NOs:2、10、和18的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列；/n重链可变区CDR3，其包含选自SEQ ID NOs:3、11、和19的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列；/n轻链可变区CDR1，其包含选自SEQ ID NOs:5、13、和21的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列；/n轻链可变区CDR2，其包含选自SEQ ID NOs:6、14、和22的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列；/n轻链可变区CDR3，其包含选自SEQ ID NOs:7、15、和23的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列。/n

【技术特征摘要】
1.一种分离的抗病毒感染的SARS-CoV-2蛋白结合分子，其特征在于，所述结合分子包括：
重链可变区CDR1，其包含选自SEQIDNOs:1、9、和17的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列；
重链可变区CDR2，其包含选自SEQIDNOs:2、10、和18的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列；
重链可变区CDR3，其包含选自SEQIDNOs:3、11、和19的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列；
轻链可变区CDR1，其包含选自SEQIDNOs:5、13、和21的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列；
轻链可变区CDR2，其包含选自SEQIDNOs:6、14、和22的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列；
轻链可变区CDR3，其包含选自SEQIDNOs:7、15、和23的氨基酸序列及其保守修饰的氨基酸序列。


2.根据权利要求1所述的结合分子，其特征在于，所述结合分子包括：
重链可变区，其包含与选自SEQIDNOs:4、12、和20的氨基酸序列至少80％同源的氨基酸序列；
轻链可变区，其包含与选自SEQIDNOs:8、16、和24的氨基酸序列至少80％同源的氨基酸序列。


3.根据权利要求1所述的结合分子，其特征在于，所述结合分子包括嵌合、人源化或全人源抗体或其部分；优选地，所述抗体的部分包括Fab、F(ab')2、Fv片段、或scFv。


4.编码权利要求1-3中任一项所述的结合分子的核酸；优选地，所述核酸序列如SEQIDNOs：25...

【专利技术属性】
技术研发人员：张文帅，郭喜玲，焦永军，曾晓燕，朱凤才，朱宝立，
申请(专利权)人：江苏省疾病预防控制中心江苏省公共卫生研究院，
类型：发明
国别省市：江苏;32