用于制造细胞外基质的方法和组合物技术

本文的实施方案包括用于制造细胞外基质(ECM)的方法、试剂盒和组合物。在一些实施方案中，所述方法包括将成纤维细胞分化为诱导型多能干细胞，扩增所述诱导型多能干细胞，并将所述诱导型多能干细胞分化为成纤维细胞。所述成纤维细胞可产生成熟ECM，所述成熟ECM可被分离并用于医疗和/或美容产品和程序。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于制造细胞外基质的方法和组合物相关申请的交叉引用本申请在PCT规则4.10下要求于2017年7月28日提交的标题为“用于制造细胞外基质的方法和组合物”的美国国家申请号15/662901的优先权，该申请的全部内容通过引用并入本文。序列表、表格或计算机程序表的引用电子版序列表连同本申请一起提交。序列表以文件名为“SEQUENCEBREK001WO.TXT”的文件被提交，其于2018年6月22日被创建并最后修改，其大小为247,550字节。电子版序列表中的信息以引用方式整体并入本文。
技术介绍
细胞外基质(ECM)是具有许多美容和治疗用途的多功能生物材料。大多数结缔组织包含胶原蛋白，并且在较小程度上(基于相对重量丰度)包含其他糖蛋白(例如层粘连蛋白、纤连蛋白)和糖胺聚糖(GAG)，所述糖胺聚糖包括透明质酸和其它硫酸化的GAGs(例如聚集蛋白聚糖和基底膜蛋白聚糖)。然而，胶原蛋白是交联的，并且需要酶促或化学降解以分离用于美容或治疗用途,并制成供人类使用的有用产品。包括使用胃蛋白酶消化或化学修饰之后牛和猪的真皮、猪肠粘膜下层和人尸体来源的组织(例如皮本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制造细胞外基质的方法，所述方法包括：/n将诱导型多能干细胞(iPSC)分化为生产成纤维细胞；/n培养所述生产成纤维细胞，借此所述生产成纤维细胞产生细胞外基质(ECM)；和/n将所述ECM与所述生产成纤维细胞分离，从而制造所述ECM。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170728 US 15/662,9011.一种制造细胞外基质的方法，所述方法包括：
将诱导型多能干细胞(iPSC)分化为生产成纤维细胞；
培养所述生产成纤维细胞，借此所述生产成纤维细胞产生细胞外基质(ECM)；和
将所述ECM与所述生产成纤维细胞分离，从而制造所述ECM。


2.如权利要求1所述的方法，其还包括在将所述iPSC分化为所述生产成纤维细胞之前对前体成纤维细胞进行去分化以形成所述iPSC。


3.如权利要求1所述的方法，其还包括在所述分化之前扩增所述iPSC。


4.如权利要求1所述的方法，其还包括在所述分化之前构建所述iPSC的储库。


5.如权利要求1所述的方法，其中，仅有的被分化的iPSC来自单一供体。


6.如权利要求1所述的方法，其中，所述生产成纤维细胞的培养在常氧下进行。


7.如权利要求1所述的方法，其中，培养所述生产成纤维细胞不包括培养间充质干细胞(MSC)。


8.如权利要求1所述的方法，其中，所述iPSC是无足迹的。


9.如权利要求1所述的方法，其中，所述方法不包括如下任何一种：胚胎干(ES)细胞、骨髓专能干细胞、ES衍生的MSC或非专能新生儿包皮成纤维细胞系。


10.如权利要求1所述的方法，其中，所述ECM包含COL1的c-末端前肽，或三螺旋或非还原γ型纤维状胶原，或两者。


11.一种制造细胞外基质(ECM)的方法，所述方法包括：
在基底上培养成纤维细胞和/或间充质干细胞(MSC)，所述基底包括至少两个表面，所述培养是无血清和无异种的，直到所述成纤维细胞和/或MSC在所述至少两个表面上限定出三维形状，并且至少80％的成纤维细胞和/或MSC停止其细胞周期；
此后使所述成纤维细胞和/或MSC与血清接触至少约两周，由此所述成纤维细胞和/或MSC产生可溶性成熟ECM，因此产生包含可溶性成熟ECM和所述成纤维细胞或MSC的溶液，其中所述溶液是无异种的；和
将所述可溶性成熟ECM与所述生产成纤维细胞分离，从而制造所述ECM，其中所述ECM是...

【专利技术属性】
技术研发人员：弗朗西斯·克里斯多夫·齐格勒，
申请(专利权)人：突破技术有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国;US