一种益生菌餐厨液型土壤修复剂的制备方法技术

一种益生菌餐厨液型土壤修复剂的制备方法，它涉及土壤修复剂的制备方法，它是要解决原有的餐厨垃圾处理方式利用率低、产品生产时间过长的技术问题。本方法：一、制备生产用解淀粉芽孢杆菌种子液、枯草芽孢杆菌种子液、巨大芽孢杆菌种子液和地衣芽孢杆菌种子液；二、生产用培养基的制备及灭菌：三、接种及发酵，获得益生菌；四、将餐厨垃圾固液分离出来的液体进行澄清、灭菌；五、将益生菌与无菌餐厨液转入培养罐中培养，得到益生菌餐厨液型土壤修复剂。其中有效活菌数总数大于320亿个/毫升，芽孢率大于94％，每种菌的有效活菌数大于2亿个/毫升。可用于农业领域提高土壤肥力、改善土壤环境、解药害、抗盐碱及提高农作物抗病性。

【技术实现步骤摘要】
一种益生菌餐厨液型土壤修复剂的制备方法
本专利技术涉及土壤修复剂的制备方法，属于环保和生物

技术介绍
实施垃圾分类和食堂餐厨垃圾的实施固液分离技术以后，餐厨液成为了大城市食堂很大的负担。餐厨垃圾的无序管理、任意处置方式已经严重影响市容市貌、居民身体健康及环境质量，因此合理处置餐厨垃圾已经成为当前极为重要的课题。目前餐厨垃圾的处理方法是首先经固液分离，固态物用于堆肥处理，液态物经过微生物处理作用土壤修改剂，如申请号为CN201511013981.4的中国专利：一株产槐糖脂酵母菌及其制备方法与应用中，利用废弃食用油脂(餐厨垃圾油)作用酵母菌株的碳源，经发酵后用于油污土壤及重金属污染土壤修复，但是这种方法只利用了餐厨垃圾的一小部分，就是餐厨垃圾的油脂部分，而不能利用固态物和水溶性液态部分，餐厨整体利用率低，应用受限制。申请号为CN201711459192.2的中国专利：高含多酚氧化酶的土壤修复剂及其生产方法与应用公开了一种高含多酚氧化酶的土壤修复剂及其生产方法与应用，其中土壤修复剂的生产方法为利用秸秆与餐厨垃圾，配以无机盐，经灭菌做成基料，再将用液体察氏培养基摇床培养的植物内生真菌种子液接种到基料上，在无菌房内变温发酵培养，获得的发酵产物即高含多酚氧化酶的土壤修复剂。直接添加于土壤中用作土壤修复剂，但是该土壤修复剂的变温发酵培养制备时间长达14～20天，培养时间过长，不利于工业化生产应用。
技术实现思路
本专利技术是要解决原有的餐厨垃圾处理方式受限较多、利用率低、产品生产时间过长等技术问题，而提供一种益生菌餐厨液型土壤修复剂的制备方法。本专利技术的益生菌餐厨液型土壤修复剂的制备方法，包括以下步骤：一、生产用益生菌种子液的制备：将解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌分别接入种子培养基进行培养，得到解淀粉芽孢杆菌种子液、枯草芽孢杆菌种子液、巨大芽孢杆菌种子液和地衣芽孢杆菌种子液；其中解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌的培养时间均为6～10h；巨大芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的培养时间均为5～l0h；二、生产用培养基的制备及灭菌：将生产用培养基加入发酵罐内，在95～125℃的条件下灭菌30～45分钟，冷却至35℃以下，得到生产用培养基；三、接种及发酵：先将解淀粉芽孢杆菌种子液、枯草芽孢杆菌种子液接入步骤二中所述的发酵罐，在温度为29～33℃、通氧条件下搅拌培养6～16h；然后将发酵温度提高至34～36℃，将巨大芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液接入发酵罐，同时加入浓缩灭菌培养基，在温度为30～37℃的条件下继续培养7～12h，获得益生菌；四、将餐厨垃圾固液分离出来的液体进行澄清处理，将澄清液在温度为95～100℃的条件下灭菌20分钟，冷却至35℃以下，得到无菌餐厨液；五、将益生菌与无菌餐厨液按体积比1:(9～12)转入培养罐中，在温度为30～37℃的条件下培养5～8h，得到益生菌餐厨液型土壤修复剂。更进一步地，步骤一中所述的种子培养基为牛肉膏蛋白胨培养基：每升种子培养基中含有3g牛肉膏、10g蛋白胨、5g氯化钠。更进一步地，步骤二中所述的生产用培养基的组成为：每升生产用培养基中含有5～15g蔗糖、5～12g乳糖、1～5g麦芽糖、1～5g可溶性淀粉、5～15g蛋白胨、2～9g酵母膏、1～5g尿素、3～8gNaCl、0.4～1.0gK2SO4、0.5～1.5gK2HPO4、2～3.5gMgSO4·7H2O、0.8～1.5gCaCl2、4～6.5gCaCO3和余量的水；生产用培养基的pH值为7.5～8.2；该生产用培养基既能给菌种生长提供足够的碳源、氮源以及无机盐，同时通过加入的CaCO3控制发酵过程中的pH不至于过低，加入的CaCl2具有促进菌体生长及产芽孢作用，使得获得的产品有效活菌数高，孢子量大，保证后期加工以及应用到工农业生产中的良好效果。更进一步地，步骤二中所述的生产用培养基的组成为：每升生产用培养基中含有9～11g蔗糖、7～8g乳糖、2～3g麦芽糖、2～3g可溶性淀粉、9～11g蛋白胨、5～6g酵母膏、2～3g尿素、5～6gNaC1、0.6～0.75gK2SO4、0.9～1.1gK2HPO4、2.5～2.75gMgSO4·7H2O、1.0～1.2gCaCl2、5～5.25gCaCO3和余量的水；pH值为7.9～8.1；更进一步地，步骤三中所述的解淀粉芽孢杆菌种子液的接入量为生产用培养基体积的4％～5％；更进一步地，步骤三中所述的枯草芽孢杆菌种子液的接入量为生产用培养基体积的1％～1.5％；更进一步地，步骤三中所述的巨大芽孢杆菌种子液的接入量为生产用培养基体积的2.5％～5％；更进一步地，步骤三中所述的芽孢杆菌种子液的接入量为生产用培养基体积的2％～6％；更进一步地，步骤三中所述的浓缩灭菌培养基的加入量为生产用培养基体积的2％～10％；更进一步地，步骤三中所述的所述浓缩灭菌营养基组成为：每升浓缩灭菌培养基含有30～50g的蔗糖、30～40g的乳糖、5～15g的麦芽糖、5～15g的可溶性淀粉、25～35g的蛋白胨、20～30g酵母膏和5～l0g的NaCl、0.8-1.8gK2HPO4、2～4gMgSO4·7H2O、5～15g的CaCO3和余量的水；pH值为7.5～8.2；更进一步地，所述的浓缩灭菌培养基组成为：每升浓缩灭菌培养基含有40～42g蔗糖、34～35g乳糖、7～8g麦芽糖、7～8g可溶性淀粉、29～3lg蛋白胨、24～26g酵母膏、7～7.5gNaCl、1.2～1.4gK2HPO4、3～3.2gMgSO4·7H2O、7～7.5gCaCO3和余量的水；pH值为7.8～8.0。本专利技术的方法利用餐厨垃圾固液分离出来的液体培养解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌与地衣芽孢杆菌，它们同为革兰氏阳性菌，在本专利技术的接种及发酵条件下四种益生菌共同培养，使四种菌能够均衡地旺盛生长繁殖，保证土壤修复剂中四种益生菌的数量，同时保证四种芽孢杆菌都会产生大量的芽孢，确保土壤修复剂的应用效果。其中的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens(Fukumoto)Priestetal)是一种广泛分布于大自然中的革兰氏阳性菌，属于芽孢杆菌属，将解淀粉芽孢杆菌施入土壤或水体中，能够降解一些有毒物质，净化被污染的土壤，同时解淀粉芽孢杆菌又是典型的植物促生菌，能够分泌抗菌蛋白、抗生素、酶或多肽等活性物质，促进植物生长，防治植物真菌病害。枯草芽孢杆菌(Bacillussubstilus)是一种革兰氏阳性细菌，能分泌多种对植物病原真菌具有拮抗作用的次生代谢产物，如枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肤等活性物质，对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用；同时自身生长过程中合成多种活性酶以及有机酸、维生素、氨基酸类物质，具有促进作物生长，分解释放土壤中结合养分，降低土壤pH，提高作物抗性等优点。巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)是一种植物根系促生细菌，也是一种解磷促钾细菌，对卵磷本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种益生菌餐厨液型土壤修复剂的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：/n一、生产用益生菌种子液的制备：将解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌分别接入种子培养基进行培养，得到解淀粉芽孢杆菌种子液、枯草芽孢杆菌种子液、巨大芽孢杆菌种子液和地衣芽孢杆菌种子液；其中解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌的培养时间均为6～10h；巨大芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的培养时间均为5～l0h；/n二、生产用培养基的制备及灭菌：将生产用培养基加入发酵罐内，在95～125℃的条件下灭菌30～45分钟，冷却至35℃以下，得到生产用培养基；/n三、接种及发酵：先将解淀粉芽孢杆菌种子液、枯草芽孢杆菌种子液接入步骤二中所述的发酵罐，在温度为29～33℃、通氧条件下搅拌培养6～16h；然后将发酵温度提高至34～36℃，将巨大芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液接入发酵罐，同时加入浓缩灭菌培养基，在温度为30～37℃的条件下继续培养7～12h，获得益生菌；/n四、将餐厨垃圾固液分离出来的液体进行澄清处理，将澄清液在温度为95～100℃的条件下灭菌20分钟，冷却至35℃以下，得到无菌餐厨液；/n五、将益生菌与无菌餐厨液按体积比1:(9～12)转入培养罐中，在温度为30～37℃的条件下培养5～8h，得到益生菌餐厨液型土壤修复剂。/n...

【技术特征摘要】
1.一种益生菌餐厨液型土壤修复剂的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
一、生产用益生菌种子液的制备：将解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌分别接入种子培养基进行培养，得到解淀粉芽孢杆菌种子液、枯草芽孢杆菌种子液、巨大芽孢杆菌种子液和地衣芽孢杆菌种子液；其中解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌的培养时间均为6～10h；巨大芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的培养时间均为5～l0h；
二、生产用培养基的制备及灭菌：将生产用培养基加入发酵罐内，在95～125℃的条件下灭菌30～45分钟，冷却至35℃以下，得到生产用培养基；
三、接种及发酵：先将解淀粉芽孢杆菌种子液、枯草芽孢杆菌种子液接入步骤二中所述的发酵罐，在温度为29～33℃、通氧条件下搅拌培养6～16h；然后将发酵温度提高至34～36℃，将巨大芽孢杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液接入发酵罐，同时加入浓缩灭菌培养基，在温度为30～37℃的条件下继续培养7～12h，获得益生菌；
四、将餐厨垃圾固液分离出来的液体进行澄清处理，将澄清液在温度为95～100℃的条件下灭菌20分钟，冷却至35℃以下，得到无菌餐厨液；
五、将益生菌与无菌餐厨液按体积比1:(9～12)转入培养罐中，在温度为30～37℃的条件下培养5～8h，得到益生菌餐厨液型土壤修复剂。


2.根据权利要求1所述的一种益生菌餐厨液型土壤修复剂的制备方法，其特征在于步骤一中所述的种子培养基为牛肉膏蛋白胨培养基：每升种子培养基中含有3g牛肉膏、10g蛋白胨和5g氯化钠。


3.根据权利要求1或2所述的一种益生菌餐厨液型土壤修复剂的制备方法，其特征在于步骤二中所述的生产用培养基的组成为：每升生产用培养基中含有5～15g蔗糖、5～12g乳糖、1～5g麦芽糖、1～5g可溶性淀粉、5～15g蛋白胨、2～9g酵母膏、1～5g尿素、3～8gNaCl、0.4～1.0gK2SO4、0.5～1.5gK2HPO4、2～3.5gMgSO4·7H2O、0.8～1.5gCaCl2、4～6.5gCaCO3和余量的水；生产用培养基的pH...

【专利技术属性】
技术研发人员：高照亮，隽加香，付学鹏，谢丽，杜恩鹏，赵美兰，宋东洋，王磊，
申请(专利权)人：黑龙江艾加生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：黑龙;23