一种表达小鼠抗菌肽基因的乳酸乳球菌制造技术

本发明专利技术公开了一种表达小鼠抗菌肽基因的乳酸乳球菌，属于基因工程技术领域。本发明专利技术通过优化CRAMP蛋白的核苷酸序列，并将构建的表达CRAMP蛋白的乳酸乳球菌用于制备调节肠道菌群紊乱的疫苗，对肠道菌群的调节以及肠道免疫应答与维持有优势，全培养物可直接作为口服疫苗刺激小鼠并引起较强的细胞免疫应答，该重组乳酸乳球菌可以作为一种具有良好产业前景的新型口服疫苗产品，对减轻肠道炎症起到积极的作用，对促进肠道健康发展具有重要的实践意义。

【技术实现步骤摘要】
一种表达小鼠抗菌肽基因的乳酸乳球菌
本专利技术涉及一种表达小鼠抗菌肽基因的乳酸乳球菌，属于基因工程

技术介绍
抗菌肽是植物、无脊椎动物和脊椎动物(包括人类)等多种宿主的先天免疫和防御的主要成分。Cathelicidins是一类主要的抗菌肽，其特征在于保守的阴离子N-末端前体序列，称为cathelin。cathelin序列的保守性表明该家族的各种成员是从共同祖先基因的复制和修饰进化而来的。CRAMP(Cathelicidin-RelatedAntiMicrobialPeptide)含有34个氨基酸(GLLRKGGEKIGEKLKKIGQKIKNFFQKLVPQPEQ)，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌具有强大的抗菌活性，但对人红细胞没有溶血活性。1mM的CRAMP能够直接导致大肠杆菌内膜的立即透化。抗CRAMP的抗血清在骨髓前体和中性粒细胞中显示出丰富的表达。与天蚕素A类似，50mMCRAMP未显示出对人红细胞的任何溶血活性。此外，研究发现CRAMP对一些致病真菌(Candiaalicans和Aspergillusfumigatus)和肿瘤本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种乳酸乳球菌，其特征在于，表达并分泌CRAMP蛋白；所述CRAMP蛋白为(a)或(b)：/n(a)如SEQ ID NO.2所示的CRAMP蛋白；/n(b)在(a)的基础上对一个或几个氨基酸进行缺失、取代或增减且具有抑菌特性的由(a)衍生的蛋白质。/n

【技术特征摘要】
1.一种乳酸乳球菌，其特征在于，表达并分泌CRAMP蛋白；所述CRAMP蛋白为(a)或(b)：
(a)如SEQIDNO.2所示的CRAMP蛋白；
(b)在(a)的基础上对一个或几个氨基酸进行缺失、取代或增减且具有抑菌特性的由(a)衍生的蛋白质。


2.根据权利要求1所述的乳酸乳球菌，其特征在于，以乳酸乳球菌NZ9000为宿主。


3.根据权利要求1或2所述的乳酸乳球菌，其特征在于，以pMG36e或pNZ8148为载体。


4.根据权利要求1～3任一所述的乳酸乳球菌，其特征在于，以Usp45信号肽促进CRAMP蛋白的表达。


5.一种构建权利要求1～4任一所述乳酸乳球菌的方法，其特征在于，将编码SEQIDNO.1所示CRAMP蛋白的基因与载体连接，再转化至乳酸乳球菌细胞中；所述载体为pMG36e或pNZ8148。


6.一种组合物，其特征在于，含...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙嘉，潘礼龙，张明，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32