一株产广谱抗菌肽的棒状乳杆菌及其抗菌肽的应用制造技术

本发明专利技术提供一株产广谱抗菌肽的棒状乳杆菌及其抗菌肽的应用，属于微生物技术领域。本发明专利技术的棒状乳杆菌（

【技术实现步骤摘要】
一株产广谱抗菌肽的棒状乳杆菌及其抗菌肽的应用
本专利技术属于微生物领域，具体涉及一株产广谱抗菌肽的棒状乳杆菌及其抗菌肽的应用。
技术介绍
鱼肉的腐败变质通常由自溶酶分解、脂肪氧化和微生物滋生三个因素引起；其中，微生物生长和代谢是导致鱼肉腐败的主要原因。在我国沿海地区盛产各种海水鱼，经捕捞离水上岸后因气压、温度、溶氧等环境因素骤变，大部分海水鱼不易存活。海水鱼死亡后，细胞代谢终止，表皮杯状细胞停止分泌含有抗菌物质的黏液；此外，鱼肉因肌纤维较短，且富含水分，在贮藏过程中易因微生物滋生导致腐败变质，造成巨大损失。研究表明，希瓦氏菌属、假单胞菌属、气单胞菌属、弧菌属、发光杆菌属、芽孢杆菌属和部分肠杆菌等是海水鱼中的特定腐败菌（SSOs），在海水鱼的腐败过程中发挥着主导作用。同时，由部分食源性致病菌污染海水鱼，尤其是单增李斯特菌、沙门氏菌、溶血性大肠杆菌、副溶血性弧菌等对人体健康带来严重威胁。乳酸菌是GRAS（GenerallyRegardedAsSafety）级微生物，已广泛应用于食品发酵与保鲜。大量研究表明，部分乳酸菌如植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、棒状乳杆菌、德氏乳杆菌等可产生胞外细菌素（抗菌肽），这些不同来源的细菌素对革兰氏阳性菌、阴性菌以及真菌展示出不同的抑菌活性。乳酸菌源细菌素因抗菌活性强、安全性高等特点，是一类具有广阔应用前景的绿色生物防腐剂。目前，国内外关于Plantaricin、Lactococcin、Acidocin、Lactocin等乳酸菌源细菌素的分离纯化、结构鉴定、抑菌活性的研究已有大量报道，抗菌肽在线数据库中（Theantimicrobialpeptidedatabase，2020年3月）已收录乳酸菌源细菌素43条。但是，大部分细菌素对革兰氏阳性菌（G+菌）有效，而对革兰氏阴性菌（G–菌）抗菌作用有限，只有植物乳杆菌素等少数细菌素可抑制G–菌。如植物乳杆菌所产的细菌素PlantaricinST28MS和ST26MS可抑制铜绿假单胞菌和大肠杆菌；PlantaricinMG可以抑制鼠伤寒沙门氏菌和大肠杆菌；PlantaricinBacTN635可以抑制肠炎沙门氏菌，铜绿假单胞菌，哈夫尼菌属和沙雷氏菌属。至今，只有乳酸链球菌素（Nisin）和PediocinPA-1两种乳酸菌源细菌素被批准可用作食品防腐剂，但在我国仅Nisin被允许可应用于食品。Nisin只对G+菌具有抑菌活性，对G–菌则无抑菌效果，限制了其在以腐败希瓦氏菌属、假单胞菌属等G–菌为特定腐败菌的生鲜海水鱼防腐保鲜中的应用。当前，国家对食品安全高度重视，因化学合成类防腐剂存在食品安全风险，开发新型、绿色、安全、广谱的乳酸菌源细菌素，用于海水鱼防腐保鲜，抑制微生物滋生与食源性致病菌污染具有重要意义。乳酸菌源广谱抗菌肽因抗菌活性强、抑菌谱广、安全性高等特点，是一类具有广阔应用前景的绿色生物防腐剂。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术的不足，提供一株产广谱抗菌肽的棒状乳杆菌及其抗菌肽的应用。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种产广谱抗菌肽的棒状乳杆菌，所述产广谱抗菌肽棒状乳杆菌为棒状乳杆菌（Lactobacilluscoryniformis）FZU63，其分类命名为：棒状乳杆菌（Lactobacilluscoryniformis），于2020年4月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNO.19553，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。上述棒状乳杆菌（Lactobacilluscoryniformis）FZU63是从吉林省榆树市农村家庭自制酸白菜中分离获得的。棒状乳杆菌（Lactobacilluscoryniformis）FZU63革兰氏染色为阳性，菌落呈圆形，微白色，小而凸起，边缘整齐。棒状乳杆菌（Lactobacilluscoryniformis）FZU63产生的抗菌物质具有广谱的抑菌活性，对金黄色葡萄球菌ATCC6538、金黄色葡萄球菌ATCC12600、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MW2、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌N315、单增李斯特菌CICC21633、藤黄微球菌CMCC28001，6株革兰氏阳性菌和大肠埃希氏菌ATCC25922、大肠埃希氏菌CMCC(B)44102、肠道出血性大肠埃希氏菌CICC21530、副溶血性弧菌ATCC17802、猪霍乱沙门氏菌CICC13312、鼠伤寒沙门氏菌CICC51005、肠炎沙门氏菌CICC21527、甲型副伤寒沙门氏菌CMCC(B)50093、乙型副伤寒沙门氏菌CMCC(B)50094、阪崎克罗诺肠杆菌ATCC29544、荧光假单胞菌AS1.55、希瓦氏菌ATCC49138，12株革兰氏阴性菌，均表现出良好的抑菌效果。上述产广谱抗菌肽棒状乳杆菌，即棒状乳杆菌（Lactobacilluscoryniformis）FZU63产生的抗菌肽AMP-fzu63，所述抗菌肽AMP-fzu63包含2条多肽序列，具体多肽序列为：RQQPMTLDYRW、LVKNAKERGY。上述抗菌肽AMP-fzu63在海水鱼保鲜中的应用。本专利技术的优点在于：本专利技术筛选获得一株产广谱抗菌肽的棒状乳杆菌FZU63，棒状乳杆菌FZU63产生的抗菌肽对多种革兰氏阳性菌和阴性菌具有显著的抑制作用。棒状乳杆菌FZU63产生的抗菌肽AMP-fzu63包含多肽序列为RQQPMTLDYRW、LVKNAKERGY的2条多肽序列。棒状乳杆菌FZU63产生的抗菌肽AMP-fzu63应用于海水鱼保鲜中，能通过抑制海水鱼中微生物的生长与繁殖，从而降低不良气味物质己醛和1-辛烯-3-醇的产生，其作用效果显著优于现有技术中用于食品防腐保鲜的乳酸菌源抗菌肽乳酸链球菌素（Nisin）。附图说明：图1PCR扩增产物凝胶电泳图。从左到右依次是FZU63、FZU72、FZU73、FZU101、FZU105、FZU122、Marker。图2基于16SrDNA基因序列构建FZU63菌株的系统发育树。图3棒状乳杆菌FZU63发酵液对革兰式阳性菌的抑菌效果。A:金黄色葡萄球菌ATCC6538，B：金黄色葡萄球菌ATCC12600，C：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MW2，D：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌N315，E：单增李斯特菌CICC21633，F：藤黄微球菌CMCC28001。图4棒状乳杆菌FZU63发酵液对革兰式阴性菌的抑菌效果。A：大肠埃希氏菌ATCC25922，B：大肠埃希氏菌CMCC(B)44102，C：肠道出血性大肠埃希氏菌CICC21530，D：副溶血性弧菌ATCC17802，E：猪霍乱沙门氏菌CICC13312，F：鼠伤寒沙门氏菌CICC51005，G：肠炎沙门氏菌CICC21527，H：甲型副伤寒沙门氏菌CMCC(B)50093，I：乙型副伤寒沙门氏菌CMCC(B)50094，J：阪崎克罗诺肠杆菌ATCC29544，K：荧光假单胞菌AS1.55，L：希瓦氏菌ATCC49138。图5棒状乳杆菌FZU6本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株产广谱抗菌肽的棒状乳杆菌，其特征在于：所述产广谱抗菌肽的棒状乳杆菌为棒状乳杆菌（

【技术特征摘要】
1.一株产广谱抗菌肽的棒状乳杆菌，其特征在于：所述产广谱抗菌肽的棒状乳杆菌为棒状乳杆菌（Lactobacilluscoryniformis）FZU63，其分类命名为：棒状乳杆菌（Lactobacilluscoryniformis），于2020年4月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNO.19553，保藏地址为...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪少芸，韩金志，孟晓洁，沈昊，姚思羽，陈旭，蔡茜茜，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：福建;35