一种重组蛛丝蛋白的产业化生产方法技术

本发明专利技术涉及一种适用于蛛丝蛋白原核分泌表达放大的生产工艺路线，对工艺中的关键质量参数进行优化，根据优化条件，完成产业化规模放大。本发明专利技术采用的发酵培养基成分简单、成本低廉；发酵工艺中采用特定的控制条件，能耗更低，而表达量提高50％，纯度提高50％。

【技术实现步骤摘要】
一种重组蛛丝蛋白的产业化生产方法
本专利技术属于生物工程领域，涉及重组蛛丝蛋白大肠杆菌分泌表达的产业化生产方法。
技术介绍
蜘蛛丝既有钢般的坚硬,又有橡胶般的弹性。其突出的性能主要表现在:高强度、高弹性、高断裂功,可以说是迄今为止最强韧的材料,被誉为“生物钢”。随着对蜘蛛丝的研究深入,发现蜘蛛丝还具有生物可降解性、超收缩性、耐高温、耐低温及与生物组织的相容性等特性。由于蜘蛛丝这些独特的物理和生物学特性,它在医学、材料、军事和纺织等方面都有着广泛的应用前景。瑞典科学家JanJohansson利用无刺激性化学物质制造出的人工蜘蛛丝具有良好的生物相容性，可应用于脊髓修复或帮助干细胞生长来修复损伤的心脏组织等再生医学研究中，亦可用于自身防护用具等纺织工业应用中(NatureChemicalBiology,DOI:10.1038/nchembio.2269(2017))。鉴于蜘蛛丝蛋白巨大的潜在应用性,国内外学者加强对蜘蛛丝的研究,希望蜘蛛丝能够像蚕丝那样大规模地应用于实际。由于蜘蛛无法驯养和天然蜘蛛丝产量少等原因,惟有通过基因工程手段才能大量获本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.蛛丝蛋白原核分泌表达放大工艺，包括发酵以及纯化工艺，发酵工艺包括重组大肠杆菌活化、发酵种子液培养、高密度发酵，其特征在于：高密度发酵菌体增殖初始阶段发酵温度为37℃，pH＝7.0±0.2，转速＝300rpm培养，DO值100％；高密度发酵的诱导阶段温度为35℃-37℃，pH值为7.0-7.4，诱导剂添加量为0.5M。/n

【技术特征摘要】
20181228 CN 20181162417011.蛛丝蛋白原核分泌表达放大工艺，包括发酵以及纯化工艺，发酵工艺包括重组大肠杆菌活化、发酵种子液培养、高密度发酵，其特征在于：高密度发酵菌体增殖初始阶段发酵温度为37℃，pH＝7.0±0.2，转速＝300rpm培养，DO值100％；高密度发酵的诱导阶段温度为35℃-37℃，pH值为7.0-7.4，诱导剂添加量为0.5M。


2.权利要求1所述蛛丝蛋白原核分泌表达放大工艺，其特征在于：高密度发酵补料阶段补加甘油和七水合硫酸镁。
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【专利技术属性】
技术研发人员：马永，张韬，赵百学，王安良，
申请(专利权)人：江苏京森生物医药新材料科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32